Новый метод лабораторной диагностики коклюша
- Авторы: Амфитеатрова Н.Ф.1,2,3, Баширова Д.К.1,2,3, Галеева Р.К.1,2,3, Киселев А.О.1,2,3
-
Учреждения:
- Казанский институт усовершенствования врачей имени В. И. Ленина
- Казанский орден Трудового Красного Знамени медицинского института имени С. В. Курашова
- Инфекционная больница № 1
- Выпуск: Том 72, № 2 (1991)
- Страницы: 128-130
- Раздел: Теоретическая и клиническая медицина
- Статья получена: 21.04.2022
- Статья одобрена: 21.04.2022
- Статья опубликована: 15.02.1991
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/106587
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj106587
- ID: 106587
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Разработан новый метод лабораторной диагностики коклюша, основанный на выявлении противококлюшных антител в слюне по реакции пластинчатой окрашенной латекс-микроагглютинации (РПОЛМА). По степени выявляемости больных коклюшем он не уступает серологическому методу и превосходит бактериологический. Метод РПОЛМА имеет следующие преимущества: он нетравматичен, исключает связанную со взятием крови возможность инфицирования через медицинский инструментарий вирусами СПИДа и гематита В, сокращает сроки исследования на 5—7 дней. Рекомендуется как метод экспресс-диагностики коклюша.
Ключевые слова
Полный текст
До настоящего времени предварительная и окончательная диагностика коклюша основывается на клинико-эпидемиологических данных, ибо бактериологическая диагностика остается несовершенной. Последнее связано, возможно, с плохим качеством коммерческой среды КУА и в большинстве своем с поздними сроками обследования, а серодиагностика проводится поздно.
В работе представлены результаты апробации нового метода лабораторной диагностики коклюша по выявлению противококлюшных антител в слюне с помощью реакции пластинчатой окрашенной латекс-микроагглютинации (РПОЛМА).
Под наблюдением находились 32 ребенка, госпитализированные в инфекционную больницу по поводу коклюша. Из них 14 больных были в возрасте от 2 мес до одного года, 3 — от одного года до 3 лет, 4 — от 3 до 7 лет и один — в возрасте 14 лет. Все дети были не привитыми против коклюша. У 8 (25%) больных была легкая форма коклюша, у 20 (62,5%) —среднетяжелая форма, у 4 (12,5%) —абортивное течение болезни. Только у половины детей был выявлен тесный и продолжительный контакт с коклюшными или длительно кашляющими больными. Больные в стационар поступали преимущественно в судорожном периоде болезни, один ребенок — в начальном периоде и 3 — в инкубационном (по эпидемическим показаниям) как контактные по коклюшу.
У всех детей первоначально участковым педиатром была диагностирована ОРВИ. Основным симптомом начальной стадии болезни был простой нарастающий кашель, не поддающийся лечению. Нарушения самочувствия не наблюдались, температура оставалась у большинства (87,8%) больных нормальной, и лишь у 4 из 8 детей в возрасте до 6 мес отмечались кратковременное незначительное повышение температуры и насморк.
Лечение больных коклюшем было комплексным: антибиотики, иммуноглобулины, гипосенсибилизирующие препараты, бронхолитики, пребывание на свежем воздухе, массаж грудной клетки, 1 % хлоралгидрат или аминазин per os в возрастных дозировках.
Всех наблюдаемых больных обследовали с помощью бактериологического и иммунологических методов — реакции агглютинации (РА) с сывороткой крови и реакции пластинчатой окрашенной латекс-микроагглютинации (РПОЛМА) со слюной больных.
Бактериологическое обследование проводили однократно на 2-й день после поступления больного в стационар. У 4 детей это совпало с абортивным течением болезни на 1-й неделе, у остальных — через 2—8 нед от начала заболевания. Все результаты были отрицательными. Это объясняется, по-видимому, ранним назначением антибиотикотерапии, плохим качеством коммерческой среды КУА и в ряде случаев высокой высеваемостью бордетелл, связанной с поздними сроками обследования.
Иммунологические исследования проводили через 2—9 нед болезни. РПОЛМА в слюне ставили на стекле по методике, описанной в наших предыдущих исследованиях [1, 2], с помощью разработанного на кафедре микробиологии КГМИ коклюшного латексного диагностикума. Последний представляет собой полистироловый монодисперсный латекс с диаметром частиц 0,5 мкм, сенсибилизированный дезинтегратом коклюшных бактерий и содержащий 975 мкг/мл белка (по Лоури). Слюну в количестве 0,5—1,0 мл брали утром натощак или через 2,5—3 ч после еды, разводили ее в 2 раза глициновым буфером (pH 8,2), центрифугировали при 3 000 об./мин в течение 5 мин, после чего вновь ее двукратно разводили начиная с соотношения 1:5. В качестве контроля были обследованы 4 группы детей (табл. 1).
Титры антител по РПОЛМА в слюне и по РА в сыворотке крови в контрольных группах детей
Группы детей | Возраст | Средние титры антител в слюне по РПОЛМА | Средние титры антител в сыворотке крови по РА |
Больные ОРВИ, не привитые против коклюша и не болевшие им (неорганизованные) |
|
|
|
1-я (24 чел.) | от 6 мес до 2 лет | 4,0±0,3 | 11,5±1,2 |
2-я (6) | до одного года | 3,7±0,8 | 10,0±4,7 |
3-я (18) | от одного года до 2 лет | 4,1±0,4 | 12,2±1,8 |
Дети, не привитые против коклюша (здоровые, организованные) |
|
|
|
4-я (46) | от 2,5 до 3,5 лет | 5,3±0,3 | — |
Примечание. Здесь и далее титры антител представлены в обратных величинах.
У 14 из 32 больных коклюшем (у 10 — с типичной клиникой, у 4 — с абортивным течением) слюну и сыворотку крови исследовали двукратно с интервалом в 6—15 дней. Высокие титры противококлюшных антител в слюне по РПОЛМА (1:20 и более) наблюдали при первом или втором исследованиях во всех случаях, кроме одного. У 6 детей было отмечено нарастание титров антител в 4 и более раз, у 2 — в 2 раза, у 2, напротив— снижение титров в 4 и более раз, у 2 — в 2 раза, у одного ребенка титры держались на одном уровне (1:40). Средние арифметические титров антител по РПОЛМА в слюне при первом и втором исследовании составляли соответственно 26,0 ± 5,2 и 44,6±10,1 (Р>0,05). Отсутствие статистически достоверной разницы между ними объясняется, по-видимому, поздними сроками первичного взятия материала (через 2—9 нед болезни), так как уже со 2-й недели титры антител в слюне существенно превышали уровень антител у детей 1 и 4-й контрольной групп (табл. 2). По РА при обследовании парных сывороток крови больных коклюшем отмечалось нарастание титров антител в 4 и более раз у 11 больных, в 2 раза — у одного (1:40 — 1:80): снижение титров антител в 2 раза было у 2 детей (1 : 640 — 1 : 320 и 1 : 80 — 1 : 40). Средние титры антител по РА в сыворотке крови при первом и втором исследовании составили соответственно 27,6 ± 5,3 и 147,1 ± 16,5 (Р<0,001).
У 18 остальных детей слюну и сыворотку крови исследовали однократно, так как материал брали на поздних сроках (через 2—9 нед) болезни, а через 3 — 8 дней после исследования дети были выписаны из стационара. По РПОЛМА в слюне высокие титры противококлюшных антител (1:20 и выше) отмечались у 15 больных. У 3 детей титры были низкими (1:5 — 1:10), что можно объяснить поздним (на 5-й и более неделях болезни) взятием слюны. По РА в сыворотке крови высокие титры противококлюшных антител регистрировались также у 15 детей. У 3 больных при взятии материала на 2—3-й неделе от начала заболевания титры были низкими (1:20), повторного же исследования не проводилось.
Таким образом, у 28 (87%) из 32 обследованных по РПОЛМА в слюне были выявлены высокие титры противококлюшных антител. У 29 (90,6%) детей по РА в сыворотке крови было обнаружено либо четырехкратное нарастание титров антител при исследовании парных сывороток крови, либо титры, существенно превышали фоновый уровень, имевшийся у детей 1-й контрольной группы (11,5±1,2). Следовательно, метод РПОЛМА по выявляемое™ больных коклюшем не уступает серологическому (Р>0,05). Более того, он имеет ряд преимуществ по сравнению с серологическим: нетравматичен, исключает возможность связанного со взятием крови инфицирования через медицинский инструментарий вирусами СПИДа и гепатита В.
В динамике заболевания титры противококлюшных антител в слюне больных коклюшем распределялись следующим образом: на 2-й неделе от начала болезни уровень антител был существенно выше, чем в 1 и 4-й контрольных группах. На последующих сроках, включая 5-ю неделю болезни, они сохранялись на таком же высоком уровне (Р<0,05). На более поздних сроках (на 6—9-й неделях болезни) отмечалось достоверное снижение титров антител (56,7 ± 13,5 и 25,0 ± 7,0; Р<0,05), однако их уровень был значительно выше, чем у детей 1 и 4-й контрольных групп (Р<0,01).
При распределении в динамике болезни титров антител по РА в сыворотке крови больных коклюшем было констатировано достоверное нарастание их уровня по сравнению с фоновым лишь к 3-й неделе от начала заболевания (Р<0,01). На 2-й неделе болезни уровень противококлюшных антител в сыворотке крови по РА существенно не отличался от такового у детей 1-й контрольной группы (23,0 ± 7,2 и 11,5 ± 1,2; Р>0,05). На последующих сроках обследования (4—9-я недели болезни) титры противококлюшных антител в сыворотке крови оставались такими же высокими (Р>0,05) и существенно превышали аналогичные показатели у детей 1-й контрольной группы.
Сравнение средних титров антител по РПОЛМА в слюне у детей в возрасте до одного года и у детей старше одного года показало достоверную разницу в результатах — соответственно 38,0 ± 5,2 и 55,5 ± 6,3 (Р<0,05). То же было выявлено и при сопоставлении средних титров антител по РА в сыворотке крови — соответственно 76,9 ± 20,9 и 157,6 ± 34,0 (Р<0,05). Это свидетельствует, по-видимому, о более зрелом характере иммунной системы у детей старше одного года. При сопоставлении средних титров противококлюшных антител у больных с осложненными и неосложненными формами коклюша по РПОЛМА в слюне и по РА в сыворотке крови обнаружено отсутствие достоверной разницы в том и другом случае — соответственно 44,5 ± 4,4 и 47,7 ± 2,7 (Р>0,05) и 114,0 ± 27,2 и 120,0 ± 2,8 (Р>0,05). Достоверная разница в результатах констатирована при сравнении средних титров антител у больных всех групп с контролем.
Об авторах
Н. Ф. Амфитеатрова
Казанский институт усовершенствования врачей имени В. И. Ленина; Казанский орден Трудового Красного Знамени медицинского института имени С. В. Курашова; Инфекционная больница № 1
Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
кафедра инфекционных болезней, кафедра микробиологии, зав.— проф.
Россия, Казань; Казань; КазаньД. К. Баширова
Казанский институт усовершенствования врачей имени В. И. Ленина; Казанский орден Трудового Красного Знамени медицинского института имени С. В. Курашова; Инфекционная больница № 1
Email: info@eco-vector.com
зав.— проф., кафедра инфекционных болезней, кафедра микробиологии
Россия, Казань; Казань; КазаньР. К. Галеева
Казанский институт усовершенствования врачей имени В. И. Ленина; Казанский орден Трудового Красного Знамени медицинского института имени С. В. Курашова; Инфекционная больница № 1
Email: info@eco-vector.com
кафедра инфекционных болезней, кафедра микробиологии
Россия, Казань; Казань; КазаньА. О. Киселев
Казанский институт усовершенствования врачей имени В. И. Ленина; Казанский орден Трудового Красного Знамени медицинского института имени С. В. Курашова; Инфекционная больница № 1
Email: info@eco-vector.com
кафедра инфекционных болезней, кафедра микробиологии
Россия, Казань; Казань; КазаньСписок литературы
- Амфитеатрова Н. Ф., Киселев А. О.//Казанский мед. ж. — 1989. — № 3. — С. 225—227.
- Амфитеатрова Н. Ф., Киселев А. О., Чечик О. С.//Бюлл. изобр. — 1990. — № 1. — С. 181.
Дополнительные файлы
