Indicator paper for determination of bacterial reduction of nitrates and nitrites
- Authors: Ruzal G.I.1,2,3, Abdrazyakova S.Y.1,2,3, Tarnopolskaya F.V.1,2,3, Shiman T.I.1,2,3, Irtuganova A.A.1,2,3, Khabibullina N.K.1,2,3
-
Affiliations:
- Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR
- City Sanitary-Epidemiological Station
- 1st Infectious Diseases Hospital
- Issue: Vol 70, No 3 (1989)
- Pages: 231-232
- Section: Articles
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/99924
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj99924
- ID: 99924
Cite item
Full Text
Abstract
For identification of microorganisms, chemical and bacteriological studies, indicator papers are increasingly being introduced, eliminating the use of liquid differential media, various test systems, etc. They are attractive because of their simplicity, reliability, and long storage time. This report presents the results of approbation of papers developed in Kazan Research Institute of EMP for the detection of nitrate and nitrite reductase in representatives of various genera of microorganisms.
Keywords
Full Text
Для идентификации микроорганизмов, химических и бактериологических исследований все шире внедряются индикаторные бумаги, исключающие применение жидких дифференциальных сред, различных тест-систем и т. д. Привлекают они простотой, надежностью, длительностью хранения.
В данном сообщении представлены результаты апробации разработанных в Казанском НИИЭМ бумаг для выявления нитрат- и нитрит- редуктазы у представителей различных родов микроорганизмов.
Для смачивания хроматографической бумаги использовали следующие растворы: 1) реактив Грисса—Илоева из жидких компонентов: сульфаниловой кислоты, а-нафтиламина, уксусной кислоты; 2) 1—2—3—5% водные растворы сухого реактива Грисса производства Ереванского завода объединения «Союзреактив», при этом оптимальным оказался 3% раствор; 3) индикаторную смесь из равных объемов водных растворов — 15,0 ± 3,0% раствора соляной кислоты и 1,0 ± 0,2% раствора риванола. Все растворы готовили непосредственно перед применением небольшими партиями, так как при соединении ингредиентов выпадает осадок. В смеси добавляли 3% раствор глицерина в качестве стабилизатора и для предотвращения ломкости индикаторной бумаги при длительном ее хранении. Для смачивания индикаторной бумаги размером 1,0 Х 8,0 см требуется 0,2 мл индикаторной смеси. Бумагу подсушивали на лотках в темноте при 37° или при комнатной температуре [2] и хранили в бумажных пакетах в темноте. Все испытанные смеси обладают высокой чувствительностью, открывают следы нитритов (0,001—0,005 мкг).
Испытание индикаторной бумаги проведено на 282 культурах микроорганизмов Escherichia, Klebsiella, Citrobacter, Proteus, Salmonella, Hafnia, Shigella, Staphylococcus, Neisseria. При использовании индикаторной бумаги и контрольных методов совпадение результатов установлено в 98,3—100% случаев, причем с помощью индикаторной бумаги реакцию можно учитывать уже через 24 ч инкубации микроорганизмов в нитратных и нитритных бульонах, в то время как контрольные методы дают результат лишь на 5—7-й день. Кроме того, при выполнении 100 анализов с помощью индикаторной бумаги экономия времени персонала составляет 30,3—33,3 человеко-часов.
Высоковоспроизводимые результаты наблюдались при использовании индикаторных бумаг, смоченных смесью риванола и соляной кислоты, хранившихся до 9 мес, и индикаторных бумаг, пропитанных смесью Грисса, хранившихся до 1,5 лет.
Следы нитратов и нитритов определяли также методом Лунге [1]. При постановке реакции традиционными методами, по нашим данным, оптимальным является следующее соотношение ингредиентов, вносимых в нитратные и нитритные бульоны: 3 капли 15% раствора соляной кислоты и 6 капель перманганата калия. Для смачивания индикаторной бумаги использовали реактивы Лунге в следующем соотношении: один объем 15% раствора соляной кислоты к двум объемам 0,001% раствора перманганата калия. Индикаторная бумага имеет сиреневый оттенок, в присутствии же нитритов она обесцвечивается. Однако при длительном хранении индикаторная бумага, смоченная смесью Лунге, обесцвечивается и делается непригодной к употреблению.
ВЫВОДЫ
- Для определения редукции нитратов и нитритов микроорганизмами возможно применение индикаторных бумаг, пропитанных смесью риванола и соляной кислоты или реактивом Грисса (жидким реактивом или 3% водным раствором сухого препарата Грисса).
- Для приготовления индикаторных бумаг на срок более года следует пользоваться реактивами Грисса.
- Индикаторные бумаги, пропитанные смесью соляной кислоты и перманганата калия, непригодны для длительного хранения.
About the authors
G. I. Ruzal
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR; City Sanitary-Epidemiological Station; City Sanitary-Epidemiological Station; 1st Infectious Diseases Hospital
Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan; Naberezhnye Chelny; Kazan
S. Yu. Abdrazyakova
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR; City Sanitary-Epidemiological Station; City Sanitary-Epidemiological Station; 1st Infectious Diseases Hospital
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan; Naberezhnye Chelny; Kazan
F. V. Tarnopolskaya
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR; City Sanitary-Epidemiological Station; City Sanitary-Epidemiological Station; 1st Infectious Diseases Hospital
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan; Naberezhnye Chelny; Kazan
T. I. Shiman
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR; City Sanitary-Epidemiological Station; City Sanitary-Epidemiological Station; 1st Infectious Diseases Hospital
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan; Naberezhnye Chelny; Kazan
A. A. Irtuganova
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR; City Sanitary-Epidemiological Station; City Sanitary-Epidemiological Station; 1st Infectious Diseases Hospital
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan; Naberezhnye Chelny; Kazan
N. Kh. Khabibullina
Kazan Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Ministry of Health of the RSFSR; City Sanitary-Epidemiological Station; City Sanitary-Epidemiological Station; 1st Infectious Diseases Hospital
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan; Naberezhnye Chelny; Kazan