Индикаторная бумага для определения редукции бактериями нитратов и нитритов

Полный текст

Для идентификации микроорганизмов, химических и бактериологических исследований все шире внедряются индикаторные бумаги, исключающие применение жидких дифференциальных сред, различных тест-систем и т. д. Привлекают они простотой, надежностью, длительностью хранения.

В данном сообщении представлены результаты апробации разработанных в Казанском НИИЭМ бумаг для выявления нитрат- и нитрит- редуктазы у представителей различных родов микроорганизмов.

Для смачивания хроматографической бумаги использовали следующие растворы: 1) реактив Грисса—Илоева из жидких компонентов: сульфаниловой кислоты, а-нафтиламина, уксусной кислоты; 2) 1—2—3—5% водные растворы сухого реактива Грисса производства Ереванского завода объединения «Союзреактив», при этом оптимальным оказался 3% раствор; 3) индикаторную смесь из равных объемов водных растворов — 15,0 ± 3,0% раствора соляной кислоты и 1,0 ± 0,2% раствора риванола. Все растворы готовили непосредственно перед применением небольшими партиями, так как при соединении ингредиентов выпадает осадок. В смеси добавляли 3% раствор глицерина в качестве стабилизатора и для предотвращения ломкости индикаторной бумаги при длительном ее хранении. Для смачивания индикаторной бумаги размером 1,0 Х 8,0 см требуется 0,2 мл индикаторной смеси. Бумагу подсушивали на лотках в темноте при 37° или при комнатной температуре [2] и хранили в бумажных пакетах в темноте. Все испытанные смеси обладают высокой чувствительностью, открывают следы нитритов (0,001—0,005 мкг).

Испытание индикаторной бумаги проведено на 282 культурах микроорганизмов Escherichia, Klebsiella, Citrobacter, Proteus, Salmonella, Hafnia, Shigella, Staphylococcus, Neisseria. При использовании индикаторной бумаги и контрольных методов совпадение результатов установлено в 98,3—100% случаев, причем с помощью индикаторной бумаги реакцию можно учитывать уже через 24 ч инкубации микроорганизмов в нитратных и нитритных бульонах, в то время как контрольные методы дают результат лишь на 5—7-й день. Кроме того, при выполнении 100 анализов с помощью индикаторной бумаги экономия времени персонала составляет 30,3—33,3 человеко-часов.

Высоковоспроизводимые результаты наблюдались при использовании индикаторных бумаг, смоченных смесью риванола и соляной кислоты, хранившихся до 9 мес, и индикаторных бумаг, пропитанных смесью Грисса, хранившихся до 1,5 лет.

Следы нитратов и нитритов определяли также методом Лунге [1]. При постановке реакции традиционными методами, по нашим данным, оптимальным является следующее соотношение ингредиентов, вносимых в нитратные и нитритные бульоны: 3 капли 15% раствора соляной кислоты и 6 капель перманганата калия. Для смачивания индикаторной бумаги использовали реактивы Лунге в следующем соотношении: один объем 15% раствора соляной кислоты к двум объемам 0,001% раствора перманганата калия. Индикаторная бумага имеет сиреневый оттенок, в присутствии же нитритов она обесцвечивается. Однако при длительном хранении индикаторная бумага, смоченная смесью Лунге, обесцвечивается и делается непригодной к употреблению.

ВЫВОДЫ

1. Для определения редукции нитратов и нитритов микроорганизмами возможно применение индикаторных бумаг, пропитанных смесью риванола и соляной кислоты или реактивом Грисса (жидким реактивом или 3% водным раствором сухого препарата Грисса).
2. Для приготовления индикаторных бумаг на срок более года следует пользоваться реактивами Грисса.
3. Индикаторные бумаги, пропитанные смесью соляной кислоты и перманганата калия, непригодны для длительного хранения.

Об авторах

Г. И. Рузаль

Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР; городская санитарно-эпидемиологическая станция; городская санитарно-эпидемиологическая станция; 1-я инфекционная больница

Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань; Казань; Набережные Челны; Казань

С. Ю. Абдразякова

Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР; городская санитарно-эпидемиологическая станция; городская санитарно-эпидемиологическая станция; 1-я инфекционная больница

Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань; Казань; Набережные Челны; Казань

Ф. В. Тарнопольская

Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР; городская санитарно-эпидемиологическая станция; городская санитарно-эпидемиологическая станция; 1-я инфекционная больница

Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань; Казань; Набережные Челны; Казань

Т. И. Шиман

Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР; городская санитарно-эпидемиологическая станция; городская санитарно-эпидемиологическая станция; 1-я инфекционная больница

Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань; Казань; Набережные Челны; Казань

А. А. Иртуганова

Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР; городская санитарно-эпидемиологическая станция; городская санитарно-эпидемиологическая станция; 1-я инфекционная больница

Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань; Казань; Набережные Челны; Казань

Н. Х. Хабибуллина

Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР; городская санитарно-эпидемиологическая станция; городская санитарно-эпидемиологическая станция; 1-я инфекционная больница

Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань; Казань; Набережные Челны; Казань

Список литературы

Дополнительные файлы