Comparative data on fluctuations in the level of catecholamines obtained by the methods of K.V. Lebedev - S.V. Senkevich and V.O. Osinskaya

Abstract

Determination of adrenaline and norepinephrine in biological fluids, as the most active of the catecholamines produced by chromaffin cells, is of great practical and theoretical interest.

Full Text

Определение в биологических жидкостях адреналина и норадреналина, как наиболее активных из катехоламинов, вырабатываемых хромафинными клетками, представляет большой практический и теоретический интерес. Высоко чувствительными и специфическими являются флуорометрические методы исследования, но они, помимо длительной биохимической обработки, требуют наличия дорогостоящей специальной аппаратуры, что затрудняет их широкое и повсеместное использование. В Казани создан и успешно применяется до настоящего времени метод люминесцентного анализа в модификации К. В. «Лебедева — С. В. Сенкевича (1959), который позволяет производить суммарное определение катехоламинов в биологических жидкостях, в том числе и в крови. Целью данной работы являлось сравнение результатов, полученных с помощью метода К- В. Лебедева — С. В. Сенкевича и при других общепризнанных в настоящее время флуорометрических методах. Для этого в перфузатах определялось суммарное содержание катехоламинов методом К. В. Лебедева — С. В. Сенкевича на фотометре Пульфриха и раздельное содержание адреналина и норадреналина методом В. О. Осинской (1953) на сконструированном в Центральной научно-исследовательской лаборатории Казанского мединститута флуорометре.

Исследуемую жидкость собирали путем перфузии сосудов задних конечностей лягушки (препарат Лавен — Тренделенбурга) на фоне раздражения 7—8-го брюшных симпатических ганглиев 0,25% раствором никотина. Уровень катехоламинов измеряли у интактных лягушек и после двухсторонней эпинефрэктомии. В исследованиях И. Н. Волковой и А. В. Кибякова (1946) установлено, что при удалении мозгового слоя надпочечных желез наступает расстройство симпатинообразовательного процесса. И действительно, если по методу Лебедева — Сенкевича у интактных лягушек уровень симпатина в перфузате составлял в среднем 0,40 мкг/мл, то после эпинефрэктомии он понижался уже с 2—5-го послеоперационных дней и особенно падал к 12-му дню (до 0,11 мкг/мл). На 13—15-е сутки содержание симпатина начинало повышаться (до 0,19 мкг/мл), но далеко не достигало нормы.

Во второй серии опытов перфузат собирали в тех же условиях, а количество катехоламинов в нем замеряли с помощью метода В. О. Осинской на флуорометре. У интактных лягушек содержание адреналина составляло в среднем 0,0104 мкг, а норадреналина— 0,0108 мкг. После эпинефрэктомии на 4—12-е сутки адреналин в перфузате вообще отсутствовал, лишь на 14-е сутки содержание его равнялось 0,0029, а на 15-е — 0,0082 мкг/мл.

Содержание норадреналина изменялось следующим образом: на 4—5-е сутки после операции почти равнялось норме, на 7—8-е снижалось до 0,0032—0,0038 мкг/мл, на 11—12-е — равнялось нулю и лишь на 15-й день после эпинефрэктомии достигало 0,0110 мкг/мл.

Таким образом, абсолютные цифры содержания катехоламинов, полученные по методу Лебедева — Сенкевича, значительно отличаются от цифр, полученных с помощью метода Осинской; однако динамика колебаний уровня катехоламинов при определении как методом Лебедева — Сенкевича, так и методом Осинской на фоне стойкого нарушения их синтеза не обнаруживает существенных отличий; поэтому метод Лебедева — Сенкевича, не требующий сложной предварительной обработки образцов, может успешно использоваться для суммарного измерения уровня катехоламинов при наблюдениях в динамике.