Blood Fibronectin in Influenza Patients Complicated by Pneumonia

Abstract

In the pathogenesis of influenza complicated by pneumonia, a significant role is assigned to intravascular activation of the hemostasis system up to the development of DIC syndrome, manifested clinically by hemorrhages in the skin, mucosa and internal organs. Hemorrhagic syndrome often determines not only the severity, but also the outcome of the disease.

Full Text

В патогенезе гриппа, осложненного пневмонией, существенная роль отводится внутрисосудистой активации системы гемостаза вплоть до развития ДВС-синдрома, проявляющегося клинически кровоизлияниями в кожу, слизистые и внутренние органы. Геморрагический синдром нередко определяет не только тяжесть, но и исход заболевания. Одним из важнейших факторов защиты микроциркуляторного русла от фибриновых и тромбоцитарных агрегатов, поддержания жидкого состояния крови служит белок фибронектин. Он связывается с фибриногеном, фибринмономерами, гепарином [1, 3], участвует в адгезии и агрегации тромбоцитов [8, 9], стимулирует фибринолиз [6]. Кроме того, благодаря своей способности к опсонизации вирусов, бактерий и других инородных частиц, фибронектин усиливает фагоцитоз [2, 7]. Исходя из описанных выше свойств фибронектина и наличия геморрагического синдрома у больных гриппом, можно предположить изменение уровня фибронектина при этом заболевании.

Целью настоящей работы являлось изучение концентрации фибронектина в крови больных гриппом, осложненным пневмонией, в зависимости от тяжести заболевания и наличия геморрагического синдрома.

Нами были обследованы 113 больных гриппом А во время эпидемии 1983—1985 гг. в г. Казани. Диагноз гриппа был подтвержден у всех больных клинически и серологически (четырехкратным и более повышением титра специфических антител в РТГА), а пневмония — рентгенологически. Тяжесть клинической картины заболевания определяли по выраженности синдрома интоксикации, дыхательной и сердечно-сосудистой недостаточности.

Среди 113 больных было 70 мужчин и 43 женщины в возрасте от 16 до 57 лет. Тяжелое течение болезни отмечалось у 19 (16,8%) больных, среднетяжелое — у 94 (83,2%). При тяжелом течении заболевания рентгенологически были выявлены обширные очагово-сливные и сегментарные пневмонии, которые у 4 больных осложнились экссудативным плевритом, у 2 — абсцедированием. Геморрагический синдром наблюдался у 9 (47,4%) больных и проявлялся носовыми кровотечениями, кровохарканьем, геморрагиями в. зеве и петехиями на коже, микрогематурией. При среднетяжелом течении заболевания имели место очаговые (у 51), сегментарные и очагово-сливные пневмонии без осложнений (у 43); геморрагический синдром был констатирован у 44 (46,8%) больных.

У всех обследованных определяли концентрацию фибронектина в плазме крови дважды: в разгаре заболевания (1—2-й день поступления больного в стационар) и в периоде ранней реконвалесценции (через 5— 6 сут после первого исследования). Кровь для получения плазмы брали из локтевой вены утром натощак и стабилизировали 3,8% раствором цитрата натрия в соотношении 1 : 9. Полученную плазму хранили в замороженном состоянии до момента исследования.

Содержание фиронектина в плазме устанавливали иммуноферментным методом.

В лунки полистироловых планшетов помещали аффинные антитела кролика к фибронектину человека (10 мкг/мл в 0,0} М карбонатном буфере pH 9,6). Иммобилизацию антител проводили в течение 15—1,8, ч при температуре 4°, затем в лунки предварительно отмытых планшетов вносили исследуемые образцы плазмы (по 0,02 мл), разведенной в концентрации 1 : 1000 в фосфатносолевом буферном растворе (pH 7,2) с твином-20 (0,05% раствор). После получасовой/ инкубации при температуре 37° планшеты отмывали и лунки заполняли раствором коньюгата антител к фибронектину с пероксидазой в количестве 0,2 мл. Через 30 мин лунки планшетов вновь отмывали и заполняли субстратом (30% раствор перекиси водорода с о-фенилендиамином) по 0,2 мл. Результаты реакции учитывали через 10 мин на микрофотометре «Flow Laboratories» (США) при длине волны 492 нм. Количество фибронектина определяли по калибровочной кривой, для которой готовили ряд разведений фибронектина.

Анализ полученных результатов показал, что у больных гриппом, осложненным пневмонией, в разгаре заболевания отмечается снижение уровня фибронектина плазмы. Особенно низкой концентрация фибронектина была у больных с тяжелым течением заболевания; ее колебания составляли 50—220 мкг/мл, в среднем 142,2±15,5 мкг/мл, тогда как у здоровых этот показатель был равен 327,3±37,9 мкг/мл (Р < 0,001). При повторном исследовании в периоде ранней реконвалесценции у тяжелых больных уровень фибронектина оставался сниженным по сравнению с таковым у здоровых (170,6±29,2 мкг/мл; Р < 0,001).

У больных со среднетяжелым течением гриппа, осложненного пневмонией, в разгаре заболевания уровень фибронектина имел тенденцию к снижению (266,3±20,1 мкг/мл; Р > 0,05). У 64% больных этой группы уровень фибронектина был ниже нормы (209,1±16,5 мкг/мл, Р < 0,01), у 13% — оставался в пределах нормы (363,1±36,5 мкг/мл; Р > 1,0) и у 23% —был повышенным (409±30,1 мкг/мл; Р < 0,01). При повторном исследовании концентрация фибронектина достигала 419,3±23,7 мкг/мл, что превышало показатели здоровых (Р < 0,005).

Снижение уровня фибронектина плазмы в разгаре заболевания можно объяснить его потреблением, что является отражением неспецифической защиты организма, способствующей элиминации из крови патогенных макромолекул и клеточных дериватов. Повышение уровня фибронектина, выявленное у среднетяжелых больных при повторном исследовании, следует рассматривать, по-видимому, как компенсаторную реакцию при благоприятном течении заболевания.

Нам не удалось обнаружить достоверных различий между показателями фибронектина у больных с геморрагическим синдромом и без геморрагического синдрома, хотя у первых уровень фибронектина в среднем составлял 260,3±28,7 мкг/мл и был ниже, чем у больных без геморрагического синдрома (314,2±35,7 мкг/мл; Р > 0,05).

Таким образом, у больных гриппом, осложненным пневмонией, в разгаре заболевания наблюдается снижение уровня фибронектина плазмы. Потребление фибронектина более выражено у больных с тяжелым течением заболевания. Наши результаты согласуются с данными других исследователей, которые отмечали снижение уровня фибронектина у тяжелых больных с сепсисом, менингитами разной этиологии, токсико-инфекционным шоком [4, 5]. По-видимому, потребление фибронектина в разгаре тяжелого инфекционного заболевания является универсальной защитной реакцией макроорганизма на чрезвычайное по силе воздействие микроорганизма.