On the effects of pelentan on human erythrocyte membrane proteins and lipids

Full Text

Взаимоотношения природных нафтохинонов и производных оксикумарина по-прежнему привлекают внимание исследователей и интенсивно изучаются [2—9], хотя до настоящего времени остается много неясного в интимных механизмах такого антагонистического влияния. Известно, что оксикумарины оказывают влияние не только на процессы гемокоагуляции, но и на состав и взаимоотношение мембранных фосфолипидов (ФЛ), изменяя адгезивные (когезивные) свойства клеток [13]. В связи с этим была показана возможность их эффективного применения для профилактики раннего метастазирования малигнизированных (атипичных) клеток [10]. Кроме того, изучено их влияние на генерацию отрицательного потенциала на мембране, препятствующего инициации процессов гемокоагуляции [12]. В более ранних исследованиях К. М. Лакина и соавт. [6] было выявлено снижение резистентности эритроцитов животных и человека к гемолитикам в условиях длительного применения антикоагулянтов оксикумаринового (пелентан, синкумар) или фенилиндандионового ряда.

Представляло интерес исследование содержания и количественного соотношения фракций структурных белков эритроцитарных мембран в условиях использования антивитаминов К — производных оксикумарина (пелентана), а также определение в плазме крови и эритроцитарных биомембранах содержания липоидного фосфора, общего холестерина, а также его соотношения в биомембранах эритроцитов с мембранными фосфолипидами. Кроме того, изучали состояние метаболизма в эритроцитах людей, длительно леченных антивитамином К — пелентаном.

Для исследований был использован материал (эритроциты, мембраны эритроцитов, плазма крови) от 24 здоровых и 53 больных (атеросклероз, ишемическая болезнь сердца, осложненные гиперкоагуляцией), которым вводили пелентан (до 300 мг/сут, 12—14 дней). Состояние гемокоагулирующей системы контролировали тромбоэластографически (Тромб-1) и по протромбиновому индексу не менее 6—7 раз. Взятие крови осуществляли в силиконированные пробирки и тотчас использовали для исследований. Эритроцитарные биомембраны получали по Л. В. Крюковой [5]. Для анализа содержания структурных белков эритроцитарных биомембран применяли градиентный диск — электрофорез на полиакриламидном геле. Для солюбилизации белков применяли комбинированный метод обработки мембран 1% раствором додецилсульфата-натрия (ДДС-Na) и ультразвуком (12—15 ватт, 8—10 мин) [13]. Уровень общего холестерина и липоидного фосфора определяли по В. Н. Ореховичу [7]; содержание общих и свободных жирных кислот — титрометрически [8]; активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (ГлбФДГ) —спектрофотометрически [1]. Результаты подвергнуты статистической обработке с использованием критерия достоверности Стьюдента.

В результате исследований установлено (табл.), что пелентан вызывает снижение содержания интегральных белков эритроцитарных биомембран (Р <0,01), липоидного фосфора в эритроцитарных мембранах (с 1,47 ± 0,13 до 1,09 ± 0,03 ммоль/л) и нарастание уровня холестерина (с 4,59 ± 1,02 до 6,14 ±1,0 ммоль/л). В плазме крови была выявлена обратная зависимость: содержание липоидного фосфора нарастало (с 1,4 ± 0,04 до 3,97 ± 0,7 ммоль/л),

а холестерина снижалось (с 4,31 ± 0,3 до 3,9±0,07 ммоль/л), что свидетельствовало о нарушении соотношения в биомембране фосфолипидов и холестерина. Увеличение содержания холестерина приводит к изменению микровязкости (текучести) и препятствует конформационным переходам в биомембране (твердый гель — жидкий кристалл), что влияет на активность энзимов, зависимых от их липидного окружения [14]. Кроме того, в плазме крови больных, которые получали пелентан (до 300 мг/день), нарастало содержание общих (с 12,64±1,48 до 19,24±1,31 ммоль/л) и свободных (с 1,16±0,23 до 1,87 ±0,21 ммоль/л) жирных кислот (Р<0,05). Параллельно повышалась активность Гл6ФДГ в эритроцитах (от 0,25±0,04 ммоль/(ч-л) до 0,37±0,01 ммоль/(ч-л)) и в плазме крови (от 0,025±0,003 ммоль/(ч-л) До 0,14±0,03 ммоль/(ч-л)). Это свидетельствовало об активации аэробного плеча пентозного шунта и ингибировании гликолиза. В плазме крови больных, леченных пелентаном, отмечено также нарастание количества цитрата в 4 раза (с 0,3±0,01 До 1,12±0,13 ммоль/л).

Таким образом, длительное назначение в клинике оксикумаринов приводит к нарушению структуры мембраны эритроцитов и как следствие — к изменению в них метаболизма. Указанные нарушения отражают, очевидно, общее состояние метаболизма в тканях. Выявленные изменения структуры мембраны эритроцитов в условиях длительного введения в организм человека антивитаминов К (оксикумаринов) подтверждают экспериментальные данные на животных и соответствуют данным литературы [3, 4, 11].

Полученные результаты могут найти применение в клинике при разработке метода контроля за состоянием структуры и метаболизма эритроцитов в условиях вынужденного длительного лечебного использования оксикумаринов. 

About the authors

V. A. Leader

Ustinov Medical Institute; Institute of Nutrition of the USSR Academy of Medical Sciences

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation

N. G. Bogdanov

Ustinov Medical Institute; Institute of Nutrition of the USSR Academy of Medical Sciences

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation

References

Supplementary files