Characteristic of antiadhesive properties of the saliva of newborns and breast milk of their mothers

Abstract

The estimation of the effect of saliva and breast milk on the adhesion of fungus C. albicans to literal epithelium surface is given. The reduction of adhesive activity of the saliva in newborns, patients with acute respiratory disease and breast wilk in sick mothers is noted. The antiadhesive activity of colostrum is higher than of mature breats wilk.

Full Text

В последние годы возрос интерес к изучению влияния секретов человека (слюна, грудное молоко) на процесс адгезии микроорганизмов к поверхности эпителиоцитов. Установлено, что женское молоко подавляет адгезию S. pneumoniae и H. influenzae к поверхности фарингеального эпителия, в результате эти микроорганизмы лишаются возможности вызывать инфекционный процесс [6]. Известно также, что слюна здоровых детей подавляет прикрепление Ps. aeruginosa и C. albicans к буккальным эпителиоцитам [4].

Механизм влияния слюны и грудного молока на процесс адгезии микробных клеток полностью не выяснен. Несомненно, что важную роль при этом в секретах играют такие факторы, как антитела, прежде всего класса IgA, препятствующие адгезии бактерий к эпителиоцитам. Не менее важны лизоцим, трансферрин, лактоферрин, компоненты комплемента, клеточные элементы (нейтрофилы, макрофаги), фибронектин, РНК-азы, ДНК-азы, биологически активные фосфолипиды и их метаболиты и т. д. [1 2, 5, 7, 8, 9] .

Определенный интерес вызывает оценка действия слюны и грудного молока на адгезию гриба C. albicans к поверхности буккального эпителия (БЭ), поскольку представители рода C. albicans часто колонизируют слизистые оболочки полости рта при дисбактериозах. Именно данный аспект исследований, представляющий большую важность для клиницистов, наименее освещен в публикациях и потому явился предметом нашего более детального исследования.

Антиадгезивные свойства слюны были изучены у 42 новорожденных в возрасте от 1 часа жизни до 28 дней. Одновременно нами были исследованы антиадгезивные свойства грудного молока 84 матерей на первом месяце лактации. В числе образцов грудного молока было 11 проб молозива и 73 пробы зрелого молока. С учетом состояния здоровья новорожденные были распределены на три группы: 1-ю составили здоровые новорожденные, 2-ю — дети группы риска и 3-ю — дети с ОРЗ.

У детей 1-й группы масса тела при рождении была равна 3502,5±21,7 г, длина —53,5±0,5 см; оценка по шкале Апгар — 8—9 баллов, находились на грудном вскармливании. Матери этих детей были в возрасте в среднем 24 лет, какой-либо патологией не страдали, беременность и роды протекали физиологически.

Масса тела новорожденных из группы риска была меньше —3368,0±66,7, длина —52,5±0,4 см. В определенной степени этому способствовало отягощенное течение беременности и родов у матерей, причем в 60% случаев факторы риска сочетались. Дети также находились на грудном вскармливании, были выписаны домой из роддома на 6—8-е сутки в удовлетворительном состоянии.

Дети (3-я группа) были в возрасте от 6 до 28 дней жизни. Отягощенное течение беременности и родов отмечалось у 68% матерей. ОРЗ преимущественно протекало в среднетяжелой форме. На естественном вскармливании были 72% новорожденных, на смешанном и искусственном — 28%.

Антиадгезивную активность слюны определяли в модификации И.В. Маянской и соавт. [4], а постановку соответствующей реакции осуществляли в собственной модификации, основанной на методе М.В. Кушнаревой и соавт. [3] (рац. предложение КГМИ № 983/43 от 1 декабря 1992). Предварительно производили забор слюны и грудного молока, которое перед реакцией обезжиривали. Использованный для постановки реакции штамм C. albicans № 5 получали из Нижегородского медицинского института; БЭ забирали от одного и того же здорового донора. Далее готовили инкубационную взвесь из микробных клеток C. albicans (0,5 мл), взвеси БЭ донора (0,5 мл) с добавлением слюны (0,2 мл) для одной реакции либо молока (0,5 мл) — для другой. В контроле вместо слюны или молока использовали забуференный физиологический раствор. После инкубации в термостате при 37°С 30 минут путем трехкратного центрифугирования при 1000 g по 3 минуты удаляли неприлипшие микробные клетки C. albicans. Из осадка готовили мазки, фиксировали метанолом в течение 10 минут, окрашивали по Романовскому и микроскопировали при увеличении ×900. Определяли среднее количество адгезированных клеток C. albicans в пересчете на один эпителиоцит при просмотре 50 БЭ (рис. 1, 2). Показатель антиадгезивной активности молока (ПААМ) или слюны (ПААС) рассчитывали по формуле $1-\frac{N}{n}$, где N — количество адгезированных бактерий в опыте, n — в контроле.

Рис. 1. Буккальный эпителиоцит после искусственной колонизации C. albicans (контроль). На поверхности эпителиоцита в большом количестве адгезированные клетки C. albicans. ×900.

Рис. 2. Буккальный эпителиоцит после искусственной колонизации C. albicans с добавлением слюны или молока (опыт). Адгезия C. albicans к поверхности эпителиоцита резко снижается. ×900.

Анализ полученных результатов показал, что у всех новорожденных уже с первых часов жизни слюна вызывала ослабление адгезии клеток C. albicans к БЭ донора. Значение ПААС колебалось от 0 до 0,98. Если средние величины ПААС в группе здоровых детей составляли 0,86±0,03, в группе риска —0,83±0,04, то у больных ОРЗ они были достоверно снижены — 0,66±0,05 (Р<0,001).

Аналогичной антиадгезивной активностью обладает и грудное молоко. Величина ПААМ колебалась от 0,04 до 0,98, однако во всех 3 группах новорожденных средние показатели были примерно одинаковыми — соответственно 0,75±0,04; 0,77±0,02; 0,70±0,06 (Р>0,1). Отмечена различная антиадгезивная активность молозива (0,88±0,01) и зрелого грудного молока (0,77±0,02; Р<0,001). Важен тот факт, что показатели ПААМ в значительной степени зависели от состояния здоровья матери в случае диагностирования у них острых и/или хронических инфекционных процессов в периоде беременности. Показатели антиадгезивной активности молока снижались до 0,55±0,08 и существенно отличались от таковых у здоровых матерей. Более того, в отдельных случаях мы наблюдали обратный эффект грудного молока — оно способствовало адгезии микробных клеток к БЭ.

Таким образом, новорожденные с момента рождения наделены способностью противостоять адгезии патологических штаммов микроорганизмов к клеткам буккального эпителия. Этому способствует также присущая грудному молоку антиадгезивная активность, особенно в периоде секреции молозива. Вместе с тем дифференцированная оценка указанных показателей выявила в случае заболевания новорожденных ОРЗ снижение ПААС и у больных матерей — ПААМ. Последующее снижение колонизационной резистентности БЭ повышает риск инфицирования и создает предпосылки для осложненного течения неонатального периода.

ВЫВОДЫ

1. Слюна новорожденного с первых часов жизни и молоко матери обладают антиадгезивной активностью, что подтверждается на модели регистрации адгезии C. albicans к буккальным эпителиоцитам донора.
2. Отмечено снижение антиадгезивной активности слюны у новорожденных, больных ОРЗ, и грудного молока у больных матерей.
3. Антиадгезивная активность молозива выше, чем у зрелого грудного молока.