Functional state of neutrophils in newborns with purulent-septic diseases

Full Text

Вследствие недостаточного развития факторов иммуннобиологической защиты у новорожденных создаются предпосылки для генерализации местной и рецидивифукщей гнойной инфекции [2]. Опасность возникновения общесептического процесса возрастает при инфицировании штаммами госпитальной бактериальной флоры, а также при вирусной суперинфекции [3]. Отсутствие четких критериев для своевременной и объективной диагностики сепсиса новорожденных является причиной запоздалой адекватной интенсивной терапии, приводит к развитию осложнений и лежит в -основе неблагоприятного прогноза, особенно при атипичных, стертых формах сепсиса, с подострым и вялым течением заболевания.

Цель исследования заключалась в изучении функциональной способности нейтрофилов периферической крови при гнойно-септической патологии, о которой судили по тесту восстановления нитросинего тетразолия (HCT-тест), чтобы использовать ее для ранней дифференциальной диагностики сепсиса и локальной гнойной инфекции. Имеющиеся в литературе данные по изучению HCT-теста у новорожденных при гнойно-септических заболеваниях немногочисленны и разноречивы [4], получены в основном в результате использования спонтанного (нестимулированного) теста.

Исследования проводили по микрометодике М. Е. Виксмана и А. Н. Маянского (1979). Реакцию ставили параллельно с нестимулированными и стимулированными in vitro нейтрофилами, что позволяло оценивать резервную функцию нейтрофилов. Для стимуляции применяли вакцину из штамма S. marcessens, полученную в лаборатории иммунологии и биохимии Казанского НИИЭМ. Результаты выражали в процентах нейтрофилов, восстанавливающих нитросиний тетразолий в цитоплазме до темно-синих гранул диформазана.

Под наблюдением находилось 76 детей в возрасте от 5 до 30 дней жизни с различными проявлениями гнойно-септической инфекции. Для контроля обследовано 20 здоровых новорожденных, родившихся при неосложненном течении беременности и родов. Показатели спонтанного HCT-теста у них колебались от 10 до 35% (в среднем 12,8+3,5%), показатели стимулированного вакциной НСТ-теста — от 15 до 45% (в среднем 25,4 ± 4,8%).

В зависимости от характера течения патологического процесса больные дети были разделены на 3 группы. В 1-ю вошли 23 ребенка, у которых локальная гнойная инфекция протекала в легкой и среднетяжелой форме, во 2-ю — 33 ребенка с тяжелой формой локальной гнойной инфекции. 3-ю группу составили 22 новорожденных с сепсисом, из них у 13 была септикопиемическая форма заболевания, у 9 — септицемическая.

У детей 1-й группы имелись преимущественно изолированные очаги поражения в виде пиодермии, омфалита, конъюнктивита. Состояние их на протяжении всего наблюдения было удовлетворительным, температурная реакция непродолжительной. Со стороны внутренних органов и периферической крови патологических изменений не наблюдалось. Под влиянием проводимой терапии у них наступала быстрая прибавка массы тела, местные воспалительные изменения исчезали к 7 — 10-му дню лечения.

У детей 2-й группы, имевших, как правило, обширные пиемические очаги к виде гнойного мастита, парапроктита, множественных абсцессов и флегмон, лимфаденитов с перифокальной реакцией, заболевание сопровождалось симптомами токсикоза, значительной температурной реакцией, нарушением функции дыхания и кровообращения, иногда желудочно-кишечной дисфункцией, выраженной реакцией периферической крови в виде лейкоцитоза, нейтрофилеза со сдвигом влево. Причинами развития локальной гнойной инфекции у наблюдавшихся детей были чаще всего дефекты ухода, а также гнойные очаги у матери (мастит, фурункулез, хронический тонзиллит).

У детей 3-й группы на основании бактериологического обследования и наблюдения был диагностирован сепсис. В клинической картине заболевания у них доминировали выраженные симптомы интоксикации, нарастающая дистрофия, анемия, упорное рецидивирующее течение имевшихся гнойных очагов. У 5 детей была затянувшаяся конъюгационная желтуха. При посевах крови у 7 новорожденных выделен эпидермальный стафилококк, у 5 — золотистый. Из содержимого гнойных очагов у всех детей высевалась различная, во многих случаях смешанная микрофлора (микрококки, энтеробактерии, синегнойная палочка, кишечная палочка, протей, клебсиелла и др.). У всех детей с сепсисом был неблагоприятный преморбидный фон. 13 из 22 детей родились недоношенными и с признаками внутриутробной гипотрофии. Анамнез 10 матерей был отягощен в период беременности вирусными и бактериальными заболеваниями, у 6 отмечена экстрагенитальная патология. С признаками натального повреждения головного и спинного мозга родилось 5 детей.

HCT-тест с нейтрофилами у больных детей выполняли 2—3 раза: при поступлении, улучшении состояния и при выписке (всего 196 исследований). У новорожденных с локальной гнойной инфекцией в легкой и среднетяжелой форме выявилось небольшое по сравнению с контролем повышение спонтанной HCT-редукции (см. табл.). Стимуляция вакциной вызвала у них ответную реакцию — повышение показателей НСТ-теста, которые по средним величинам почти совпадали с контролем.

Как видно из таблицы, у детей 2-й группы наблюдались более высокие значения показателей спонтанного HCT-теста, превышающие в 1,5—2 раза нормальные (^р < 0,01). Процент стимулированных вакциной HCT-позитивных нейтрофилов в среднем был несколько более низким, чем у здоровых детей.

 

Показатели HCT-теста с нейтрофилами у новорожденных при гнойно-септических заболеваниях

Обследованные группы	Спонтанный НСТ-тест, %		Стимулированный НСТ-тест, %
	острый период	ремиссия, выздоровление	острый период	ремиссия, выздоровление
1-я	16,4±3,3	11,7±1,6	27,6±1,9	24,8±3,9
2-я	40,4±4,3	26,3±1,8	21,7±2,8	23,3±2,2
3-я	25,6±4,1	13,8±2,3	12,7±3,1	19,3±2,1

 

Количество НСТ-восстанавливающих нейтрофилов у новорожденных 3-й группы было в среднем в 1,5 раза меньше, чем у детей предыдущей группы (^р < 0,05). Особенно низкими были показатели спонтанного HCT-теста при отягощенном преморбидном фоне (недоношенность, последствия внутриутробной гипоксии), а также при септицемическом варианте течения процесса, когда в клинике заболевания доминировали симптомы тяжелой интоксикации без явных пиемических очагов. Однако при сепсисе с массивными гнойными очагами (септикопиемический вариант), наблюдавшимися у одной трети детей, регистрировались высокие показатели спонтанного HCT-теста (до 50—70%), что обусловило повышение средних величин по сравнению с таковыми у здоровых детей. У таких детей отмечалось резкое угнетение функциональной активности стимулированных нейтрофилов. Среднее количество стимулированных нейтрофилов составило у них в разгаре заболевания 13,8 ± 2,3%. Парадоксальная реакция в виде угнетения HCT-теста в ответ на стимуляцию вакциной наблюдалась у 13 детей. Количество стимулированных в HCT-тесте нейтрофилов у половины больных колебалось от 1 до 8%.

Анализируя динамику изучаемых показателей у больных различных групп в зависимости от формы и периода заболевания, мы обнаружили, что у новорожденных с легкими формами локальной гнойной инфекции в процессе лечения происходила нормализация спонтанного HCT-теста. Показатели стимулированного HCT-теста слегка уменьшались, приближаясь к норме. У детей 2-й группы в период ремиссии и при выздоровлении параметры спонтанного HCT-теста также постепенно снижались, однако к моменту выписки из стационара у части из них еще сохранялись его высокие значения. В то же время среднее количество нейтрофилов, восстанавливающих тетразолий, оставалось увеличенным. Несмотря на проведенную терапию, спонтанный НСТ-тест был подавленным у большинства детей с сепсисом, особенно при стертом, латентном течении заболевания. Острое активное течение, с наличием массивных пиемических очагов сопровождалось в разгаре заболевания повышением спонтанного нет-теста, а затем его быстрым падением. Исследования, проведенные в двух случаях незадолго до летального исхода, выявили полное подавление как спонтанной, так и стимулированной HCT-редукции (нулевые показатели). В то же время у 3 детей с развившимся на фоне сепсиса язвенно-некротическим энтероколитом наблюдались довольно высокие показатели спонтанной HCT-редукции нейтрофилами при подавлении стимулированной реакции.

Таким образом, исследования показали, что при бактериальной гнойной инфекции у новорожденных отмечается повышение спонтанной HCT-редукции нейтрофилами, что можно объяснить достаточной стимуляцией лейкоцитов новорожденных в процессе фагоцитоза при контакте их с бактериями. Существует мнение, что процесс восстановления тетразолия в окрашенный диформазан коррелирует с внутриклеточным образованием перекиси водорода, которая наряду с ферментными, системами крови образует важную бактерицидную систему полиморфонуклеарных лейкоцитов.

Выводы

1. Локальная гнойная инфекция в легкой и среднетяжелой форме у новорожденных не вызывает существенных изменений HCT-редукции нейтрофилами. Массив- пая гнойная инфекция с тяжелым течением приводит к значительному повышению спонтанной HCT-редукции нейтрофилами без адекватной реакции на стимуляцию вакциной.
2. Генерализованный септический процесс сопровождается угнетением НСТ-редукции нейтрофилами, более выраженным в условиях стимуляции. Временное повышение показателей спонтанного HCT-теста нейтрофилов у детей с сепсисом может стать предвестником новых пиемических осложнений, в том числе и такого грозного, как язвенно-некротический энтероколит.

About the authors

Y. V. Volkova

Kazan Order of the Red Banner of Labor Medical Institute named after S. V. Kurashov

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com

Department of Pediatric Diseases of the Faculty of Pediatrics 

Russian Federation, Kazan

N. A. Romanova

Казанский ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. С. В. Курашова

Email: info@eco-vector.com

Department of Pediatric Diseases of the Faculty of Pediatrics 

Russian Federation, Kazan

References

Supplementary files