On the question of mute infection in experimental syphilis of rabbits

Abstract

A silent “infection, according to Reiter’y, is one that does not show any clinical symptoms, just like Levinthal’s“ Symptomlose Infektion ”. As you know, about 10% of rabbits experimentally infected with syphilis do not detect, after inoculation by means of pieces of chancre containing millions of spirochetes, no clinical signs of syphilis: there are no primary affects, there are no sufficiently definite infiltrates at the vaccination site, there are no swelling of the glands and secondary phenomena.

Full Text

„Немая“ инфекция, по Reiter’y, есть такая, которая не выражает­ся никакими клиническими симптомами, точно также, как „Symptomlose Infektion“ Levinthal’a. Как известно, около 10% экспериментально зараженных сифилисом кроликов не обнаруживают после прививки по­средством кусочков шанкра, содержащих миллионы спирохет, никаких клинических признаков сифилиса: отсутствуют первичные аффекты, от­сутствуют достаточно определенные инфильтраты на месте прививки, от­сутствуют припухания желез и вторичные явления. Прежде предполагали, что спирохеты в теле таких так называемых нулевиков погибают, так как они, быть может, обладают естественной резистентностью против си­филитической инфекции. Первые исследования о том, что кролик может быть заражен сифилисом и хранить в себе вирулентные спирохеты даже тогда, когда после прививки не наступило очевидных явлений болезни, принадлежат Neisser’y, который уже давно показал (1907—1908), что три кролика, не давшие никакой реакции на прививку в яички сифи­лиса (в качестве прививочного материала служила каша из селезенки и костного мозга люэтических обезьян), на самом деле были латентные сифилитики, ибо последующая перевивка органов этих кроликов (каша селезенки и каша костного мозга) на обезьян дала у этих последних первичные аффекты.

В наше время Chesney, а затем Brown и Pearce указали на возможность бессимптомной сифилитической инфекции у таких живот­ных которые после прививки остаются свободными от всяких явлений (нулеры). Все же вопрос о „немой“ инфекции при экспериментальном сифилисе был разрешен Коllе совместно с его сотрудницей Evers. Для этого они воспользовались методом перевивки желез, который пред­ложили Brown и Pearce. Эти последние доказали, что в поплитеальных железах нелеченных сифилитических кроликов в течение всей жизни находятся вирулетные спирохеты. Установление этого факта приобрело огромнейшее значение в проблеме изучения патологии экспериментально­го сифилиса, ибо доказать наличие спирохет в неизмененных паховых же­лезах микроскопически являлось очень трудным. Uhlenhuth и Muizer сообщают только об отдельных положительных результатах в этом направлении. Tomasczewski отмечает, что из 21 случая он только 7 раз нашел в скудном количестве спирохеты.

Данные американских авторов о наличии вирулентных спирохет в лимфатических железах были подтверждены многими исследователями. Chesney и Kemp нашли, что лимфатические железы сифилитических кроликов всегда хранят в себе вирулентных спирохет; с перевивкой моз­га в мускулов сердца они получали только отрицательный результат; прививка костного мозга, селезенки, печени, яичек и крови не всегда приводила к положительному результату. Коllе пришел к выводу, что поплитеальные железы, с определенного времени после заражения кроли­ков, инфецированы в 100% животных.

Manteufel и Worms тоже отмечают вирулентность лимфа­тических желез, несмотря на полное отсутствие в них каких-либо видимых, наружных изменений. Как мы уже указали, Ко1le и Evers, применив метод прививки поплитеальных желез, установили, что нулеры путь латентные сифилитики.

На эти исследования над животными, которые не реагируют мест­ным заболеванием на прививку в яичко, натолкнули Kolle его наблю­дения над действием висмута у кроликов, экспериментально зараженных сифилисом.

Кролики, у которых посредством инъекции нерастворимых препаратов вис­мута образовывается внутримышечное депо висмута, не реагируют на последующую прививку сифилитической инфекции образованием первичных аффектов и опуханием желез. Это действие висмута продолжается до тех пор, пока сущест­вует депо висмута и висмут поступает в кровь. Чтобы разрешить вопрос уничто­жаются ли полностью под влиянием висмута те спирохеты, которые проникают в организм кролика после произведенной прививки, или же, что несмотря на от­сутствие первичных аффектов и припухания желез, сифилитическая инфекция все же имеет место, Коllе поступил двояким образом. Прежде всего у большого числа животных посредством инъекций висмута было получено депо висмута в му­скулах уха и под кожей бедра. После этого через четыре недели животные под­вергались заражению сифилисом посредством прививки кусочков шанкра под ко­жу яичка. Через 2—3 месяца со дня заражения животных депо висмута удалялось: у кроликов срезались уши, а частички висмута, находящиеся в депо ножек удалялись хирургическим путем, причем в этом последнем случае контролирова­лось посредством рентгеновских лучей, зкстирпировано ли депо висмута полностью. Через 1½—2 месяца после удаления депо у тех животных, в организме ко­торых, как казалось, спирохеты погибли, образовались типичные первичные аффек­ты. -Это же самое Коllе доказал путем перевивки поплитеальных желез по ме­тоду Brown и Pearce. Во многих случаях Коllе и Evers получили твердые шанкры, перевив на яички нормальных кроликов железы от таких животных, ко­торые вследствие наличия в их организме депо висмута не обнаруживали ника­ких симптомов сифилитической инфекции.

Таким образом Коllе и Еѵегs доказали, что депо висмута препятству­ет развитию шанкра и всех симптомов сифилитической инфекции, но не за­щищает нормальное животное от сифилитической инфекции, и животное % получает бессимптомную общую инфекцию, так как висмут являлся толь­ко средством, тормозящим развитие проявлений сифилиса. Такое отсутствие симптомов сифилиса при одновременном наличии в организме вирулент­ных спирохет натолкнуло Kolle на мысль проверить, не наступает ли такая же бессимптомная инфекция также и у нелеченных животных, resp, не являются ли нулеры латентными сифилитиками. С этой целью Коllе в ЕVегs вырезали поплитеальные железы у нулеров и кусочки этих желез прививали нормальным животным; таким способом почти в 100% случаев они получили у нормальных животных типичные твердые шанкры, доказав, что животные, от которых были взяты железы, имели настоящую хроническую инфекцию. Железы у нулеров экстирпировались через 82—199 дней после безрезультатно протекающей прививки в яичко. Редкие случаи, когда прививка поплитеальных желез нулевика нормальному животному дает отрицательный результат, могут рассматриваться в том смысле, что пред нами снова нулер. В пользу этого говорят последования Pгіggе и Rothermund’a, которые показали, что животные, поплитеальные железы которых не дают никакого эффекта при прививке нормальным кроликам, содержат вирулентных Спирохет в других железах, как-то: ингвинальных, пресакральных и субилиакальных. Большая часть нулеров втечение долгого времени остаются свобод­ными от всяких клинических симптомов. Однако, у 20—25% нулеров после многих месяцев наблюдается развитие явлений—появление шанкра  на месте прививки, развитие гуммы или паренхиматозного кератита. Ис­ходя из этого факта, Prigge считает, что Spirocli pallida существует у нулевиков не так, как какой-либо безобидный сапрофит.

Интересно отметить, что ühlеnhиth почти одновременно и не­зависимо от Ко Не доказал, что также и такие животные, которые, бу­дучи инфецированы интравенозно, не обнаруживают никаких манифест­ных явлений, могут оказаться латентными сифилитиками, т. к. прививка органов и желез от этих животных нормальным кроликам дает положи­тельный результат. Он же тоже установил, что и после интравенозной прививки спирохеты могут отсутствовать и в поплитеальных железах, и во внутренних органах, но могут быть в других железах (он брал смесь из ингвинальных, мезентериальных и субмаксиллярных желез). Коllе и Evers также и на морских свинках доказали, путем прививки желез и органов от морских свинок, оставшихся после заражения громад­ными количествами спирохет свободными от всяких явных симптомов, что морские свинки—нулеры на самом деле тоже суть латентные си­филитики. Rolle и Schlossberger установили, по поводу мышей и крыс, что эти животные, которые раньше считались абсолютно невосприимчи­выми к сифилитическому вирусу, на самом деле получают бессимптомную хроническую инфекцию. Они доказали, что бледная спирохета, не утра­чивая своей вирулентности на протяжении месяцев (3—4), может жить в железах крыс и мышей. Schlosserger и Kinksch, прививая мозг мышей кроликам, получили положительный результат. Коllе и Schlossberger методом прививки органов показали, что селезенка, мозг и кровь мышей, зараженных экспериментально сифилисом, могут, давать у кроликов первичные аффекты. Schlossberger установил, что метод перевивки желез оказался вполне пригодным и для передачи сифилитической инфекции от одной мыши к другой.

Коllе и Evers определили время, в течение которого спирохеты по­сле инфекции попадают от места прививки в лимфатические железы. Опыты были поставлены на кроликах и морских свинках. Оказалось, что у кро­ликов через 30 мин. после прививки уже такие количества спирохет содержатся в ингвинальных железах, что эти последние, примененные в ка­честве материала для прививок у нормальных кроликов, вели к образо­ванию типичных первичных аффектов. Пространство от места прививки до ингвинальных желез составляет около 6 см. У морских свинок спиро­хеты проникают от места инфекции в лимфатические железы уже через 5 минут (была применена инфекция кожи). Prigge определил, что спустя две недели после заражения спирохеты уже имеются и в попли­теальных железах.

Переходим к собственным последованиям. Материал наш состоял из 35 кроликов. Мы пользовались штаммом Московского государственно­го венерологического института; штамм этот, по просьбе Б. И. Клей­на,—заведующего Сывороточным отделением Киевского сан-бактериоло­гии. института, был любезно предоставлен нам для наших исследований проф. Ю. А. Финкельштейном, которому мы выражаем глубокую благодарность.

Большинство наших кроликов мы заражали следующим образом. В глубокий карман мошонки мы вводили кусочки плотной, белой части твердого шанкра (спо­соб Tomasczewski-Финкельштейна). Затем эта же мошонка в окруж­ности того места, где были имплантированы кусочки шанкра, подвергалась обка­лыванию с целью интракутанного введения густой спирохетной эмульсии. Для получения последней мы поступали таким образом. Белая часть шанкра разреза­лась ножницами на очень маленькие кусочки до образования кашицы, затем по­степенно по две—три капли прибавлялся стерильный физиологический раствор и ка­шица растиралась стеклянной палочкой. При впрыскивании в кожу спирохетной эмульсии мы пользовались однограммовым рекордовским шприцем и обычно за каж­дым уколом вводили 0,1—0,15 гр.; при этом образуется отечный желвак белесоватого цвета. В кожу мошонки, в окружности имплантированных кусочков первичного аффекта, мы производили пять-шесть интрадермальных инъекций. Несколько кро­ликов было заражено путем втирания очень густой спирохетной эмульсии в ска­рифицированную кожу (способ Тruffi) с одновременным введением сифилити­ческого материала прямо в яичко (Uhlenbuthu. Muizer). Остальные кролики заражались исключительно путем интрадермального и кольцевидного введения спи­рохетной эмульсии. В большинстве наших случаев мы подвергали заражению мо­шонку только с одной стороны.

На нашем материале мы имели два случая „немой“ сифилитической инфекции.

1-й случай. Кролик № 151. Прививка 4. VIII. 1930 года. Был инфецировав методом Tömasczewskі—Ф инкельштейча, а также методом интрадер­мального кольцевидного обкалывания. Этот кролик никогда на протяжении 6Ч2 месяцев не обнаруживал никаких манифестных явлений сифилитической инфек­ции. Кролик № 148, подвергнутый заражению в этот же самый час иодной и той же спирохетной эмульсией, получил после инкубационного периода в 29-дней ти­пичный твердый шанкр с многочисленными спирохетами. Через б1^ месяцев пос­ле прививки у нашего нулера развился левосторонний кератит, а через 15 дней после этого мы заметили такой же кератит и на правом глазу. В соскобе от ро­говой оболочки, мы нашли спирохеты.

2-й случай. Кролик № 192. Прививка 23. IX. 1930 года. Был заражен ме­тодом интрадермального кольцевидного обкалывания кожи левой мошонки. До 16 марта 1931 г, никогда не обнаруживал никаких активных явлений сифилиса. Другой кролик, зараженный в это же самое время, этой же самой эмульсией и этим же методом заболел типичным первичным аффектом после инкубации в шесть недель и может являться в данном случае контролем.

16. III. 1931 у нашего нулевика были экстирпированы поплитеальные желе­зы й перевиты на кролика № 231 по способу Tomasczewski—Финкель­штейн а и методу обкалывания. Кроме того, большая часть кожи левой мошон­ки у нашего нулера была срезана, была приготовлена эмульсия, помощью которой, а также помощью очень мелких кусочков срезанной кожи был заражен кролик № 236 тоже методом обкалывания и методом Tömasczewskі—Финкельштейна. В результате оказалось, что животное, которое было привито кусочками- желез и эмульсией из них, а также то животное, которое было инфецировано пу­тем имплантации кусочков кожи и интрадермального введения кожной эмульсии,— оба заболели типичными твердыми шанкрами, причем инкубация при перевивке поплитеальных желез была 10 дней, а инкубация при прививке кожи—26 дней. Т. е. обнаружилось, что кролик № 192 был латентный сифилитик.

Анализируя наши оба случая „немой“ сифилитической инфекции, мы должны сделать некоторые замечания. В первом нашем случае, где нам пришлось наблюдать развитие специфического кератита, мы, в со­гласии с Ргіggе, должны подтвердить, что spiroch. pallida в организме кроликов-нулевиков не является безобидным сапрофитом. Второй наш нулер представляет, как нам думается, большой интерес в виду положи­тельного результата прививки посредством кожи мошонки. В заграничной литературе по поводу прививки кожи от нулеров нет никаких указаний. Коll е и Evers, которые блестяще разрешили вопрос о „немой инфекции при экспериментальном сифилисе кроликов, не занимались вовсе перевивкой кожи от нулеров на нормальных животных. Как следует из работ Коllе и его сотрудников и от кроликов, с манифестной люэтической инфекцией Коllе тоже не перевивал кожи. Когда Brown и Be­arce опубликовали свои исследования о том, что поплитеалькые железы всех кроликов, когда-либо обнаруживавших манифестные явления сифи­лиса. с определенного времени инфецированы сифилисом, то Коllе, проверив эти данные, пришел к заключению, что перевивка печени, селезенки, костного мозга и т. д. не доставляет таких верных результа­тов, как метод перевивки поплитеальных желез. Uhlеnhuth, который, как уже было нами отмечено, независимо от Коllе доказал, что нулеры суть латентные сифилитики, брал у. этих последних в качестве прививного материала внутренние органы и различные лимфатические железы, но не кожу.   

Орлов, сотрудник проф. Ю. А. Финкельштейна, показал по­средством способа перевивок, что у нелеченных животных не только же­лезы, но и вся область бывшей локализации первичного аффекта являет­ся, как правило, долгое время носителем спирохет. Интересно отметить, что в отделе экспериментальной венерологии проф. Ю. А. Финкельштейна было два случая бессимптомной сифилитической инфекции у кроликов, когда испробованная перевивка кожи мошонки от этих ну­леров на нормальных животных дала положительный результат. Перехо­дя к нашему случаю, мы отмечаем, что нам удалось доказать методом перевивки, что у нулера на месте бывшей инокуляции существуют в ви­рулентном состоянии спирохеты. Установление этого факта, что спирохе­ты без утраты вирулентности на протяжении месяцев могут жить на ме­сте, где была произведена прививка, уже само по себе интересно. Первичный аффект отсутствует, а возбудители остаются на месте при­вивки. Оставшись в немом состоянии на месте инокуляции, они все же приводят к общей бессимптомной инфекции. Отсутствие первичного аф­фекта на коже, при наличии вирулентных спирохет в ней, ярко и рефлекторно доказывает, что появление твердого шанкра не обуславливается исключительно сифилитическим вирусом, а взаимодействием между спи­рохетами и тем организмом, куда они проникли. Объясняется отсутствие шанкра отсутствием аллергии кожи, resp, отсутствием изменений в реак­тивных взаимоотношениях между кожей и сифилитическим вирусом, дли, вернее, отсутствием тех известных нам реакций, которые изменяют реак­тивное отношение кожи к спирохете. Отсутствие изменений кожи, resp, твердого шанкра в том месте, куда вошли спирохеты, объясняется отсутствием биохимических реакций между кожей и вирусом. Это нисколько не мешает обсеменению организма спирохетами; они направляются, главным образом, лимфатическими путями в кровь, заносятся кровью в различные органы и размножаются там. Наводнение организма спирохетами не находится, по-видимому, ни в какой зависимости от того, на х /у. ступало ли взаимодействие между спирохетами и кожей, или же не наступило. Спирохеты уже через 30 мин. проникают в ингвивальвьи же­лезы кролика после внесения инфекции в кожу мошонки. Если вся область того места кожи, где помещался первичный аффект, как показал Орлов, является носителем спирохет, если и другие места на коже (напр. кожа на лапе) могут тоже давать при перевивках положительный результат (Орлов), то это объясняется, как мы считаем, тем, что спи­рохеты, попавшие в то или иное место кожи, где была сделана иноку­ляция, разносятся от этого места кровью во все органы и оседают там, в том числе и в коже; как известно, спирохеты вызывают в коже бо­лезненные изменения, что клинически выражается в появлении вторичной экзантемы.

Гораздо более интересным является положительный результат при­вивки в нашем случае (и в двух случаях Московского ГВИ), кот спи­рохеты в вирулентном состоянии находятся на месте прививки втечение долгого времени, а ткань кожи не претерпевает при этом никаких изме­нений. Теперь возникает вопрос, как объяснить, что у нулеров иногда, по истечении долгого времени после прививки внезапно появляются ма­нифестные явления, как-то; шанкр, гуммы, кератит. Процесс этот, как нам думается, нужно понимать так: если у нулера, спустя долгое время после инокуляции, внезапно появляется на месте прививки типичный первичный аффект, то это должно объяснять внезапно появившейся ал­лергией кожи, ибо процессы, происходящие в различных органах, глав­ным образом, в коже, изменяют их физико-химические свойства и дела­ют их более чувствительными к данному вирусу, т. е. процессы, делаю­щие органы аллергичными, только теперь начались.

Появление у нулера кератита или гуммы нужно, как мы считаем, понимать в том смысле, что в степени, в силе сопротивляемости различ­ных тканей нужно допустить резкие различия. В то время, как под влия­нием спирохет одни ткани претерпевают изменения, в результате кото­рых происходит усиление защитных реакций, другие не приобрели вовсе никакой аллергичности, а поэтому возможно, что у нулера на месте прививки не будет по-прежнему никакой реакции но в другом месте могут развиться третичные явления.

Коllе и его сотрудники считают, что бессимптомная инфекция при экспериментальном сифилисе кроликов говорит за то, что и у человека сифилитическая инфекция может протекать бессимптомно. Случаи табеса, прогрессивного паралича, аортита, случаи внезапных третичных прояв­лений и другие поздние сифилитические заболевания, когда анамнести­чески нельзя установить причину болезни, так как больные утверждают, что они никогда не имели твердого шанкра, должно рассматривать так, что многие из них представляют собою бессимптомную сифилитическую ин­фекцию.