Study of the toxin and antitoxin of hemolytic streptococcus V. Titration by means of the flocculation reaction

Abstract

The authors have developed a method for titrating the toxin and antitoxin of hemolytic (scarlet) streptococcus. This reaction is analogous to the Ramon reaction used in the titration of diphtheria toxin and antitoxin, and its technique is essentially the same. The use of a concentrated streptococcal toxin has great advantages in terms of a significant acceleration of the reaction compared to the untreated toxin.

Full Text

Авторы разработали метод титрования токсина и антитоксина гемолитического (скарлатинозного) стрептококка. Реакция эта аналогична реакции Рамона, применяемой при титровании дифтерийного токсина и антитоксина, и техника ее по существу такая же. Применение кон­центрированного стрептококкового токсина дает большие преимущества в смы­сле значительного ускорения реакции по сравнению с токсином необработанным.

Для приготовления концентрата токсина аа. Предлагают следующий метод: 438 г твердого сернокислого аммония растворяется в литре разведенного и хорошо охлажденного токсина и выдерживается в течение ночи при 4°. На следующее утро преципитат, собранный центрифугированием, диализируется при помощи водопроводной воды до освобождения от следов серы. Диализи­рованный раствор охлаждается и pH его устанавливается при помощи ледяной уксусной кислоты 4,0—4,2. После получасового стояния на холоде преципитат устраняется центрифугированием. Затем реакция жидкого слоя, содержащего токсин, прибавлением крепкого NaOH доводится до pH =7,0. Порученный таким методом концентрат содержит 40—60 единиц флокулина в 1 см³.

Флокулирующая способность стрептококкового токсина и антитоксина под­вержена индивидуальным колебаниям, но в общем под влиянием различных факторов реакция дает изменения, аналогичные дифтерийному токсину и анти­токсину.

Иммунизация лошадей показала, что флокулины продуцируются этим живот­ным параллельно антителам против гемолитического токсина; это дает авторам право считать эти антитела идентичными.