Peroxide oxidation and the composition of erythrocytes membranes lipoids in virus hepatites A and В

Full Text

Существенное место в механизме развития вирусных гепатитов А и В (ВГА и ВГВ) занимают нарушение проницаемости клеточных мембран [1], изменение активности многих мембраносвязанных ферментов и состава липидов клеточных оболочек [2]. Выявлена прямая корреляция между изменениями свойств мембран эритроцитов (МЭ) и цитоплазматических мембран клеток внутренних органов, в том числе и печени [5]. Применение комплексного подхода позволяет использовать красные кровяные клетки как тест-объект в изучении структурно-функциональных характеристик биологических мембран при ВГА и ВГВ [3].

Целью нашей работы являлось исследование процессов липопероксидации и состава липидов мембран эритроцитов в зависимости от этиологии поражения печени (ВГА и ВГВ). Обследованы 54 пациента с ВГА и 58 — с ВГВ возрасте от 18 до 63 лет, у которых заболевание протекало в среднетяжелой форме. Существенных различий в половой принадлежности, возрасте и виде сопутствующей патологии в наблюдаемых группах не было. В качестве контроля обследованы 32 донора.

Мембраны эритроцитов выделяли путем гипоосмотического гемолиза и последующего центрифугирования. Липиды из осадка мембран эритроцитов экстрагировали по методу Фолча. Фракции липидов разделяли методом тонкослойной хроматографии. Активность каталазы определяли по методу Бетлера, суперокиддисмутазы (СОД) — по В.Н. Чумакову и М.Ф. Осинской. Продукцию неонового диальдегида (МДА) оценивали согласно а.с. № 1561 034 (СССР). Результаты исследований обрабатывали с помощью методов вариационной статистики (табл. 1—3).

 

Таблица 1. Основные липидные фракции мембран эритроцитов (мг/100 мг сухих МЭ)

Показатели	Здоровые доноры	Больные ВГА	Больные ВГВ
Общие ЛИПИДЫ	21,2±1,0	26,9±2,4*	28,4±2,1*
Общий холестерин	1,5±0,4	4,0±0,2	4,2±0,3*
Общие фосфолипиды	5,1±0,2	4,9±0,3	4,5±0,3
ОХ/ОФ	0,5±0,0	0,8±0,1*	0,9±0,1*

* достоверное отличие по сравнению с нормой.

 

При сравнении уровней общих липидов (табл. 1) обнаружено их значительное повышение в обеих группах (Р < 0,05). Уровень общего холестерина увеличивался как при ВГА, так и при ВГВ (Р > 0,05). Содержание общих фосфолипидов в мембранах эритроцитов существенно не изменялось, однако отношение общего холестерина к общим фосфолипидам (ОХ/ОФ) в обеих группах намного превышало норму (Р< 0,05). Последнее характеризует жесткость мембран эритроцитов и их способность изменять свою форму, что может сказываться при прохождении данных клеток через селезенку и влиять на развитие гиперспленизма при ВГА и ВГВ.

Сравнительный анализ спектра фосфолипидов мембран эритроцитов (табл. 2) показал снижение относительного содержания фосфатидилэтаноламина (ФЭА) в обеих группах (Р < 0,05). Разницы в уровне ФЭА у больных ВГА и ВГВ не обнаружено (Р > 0,05). При ВГА уровень фосфатидилхолина (ФХ) отличался от контрольных значений несущественно, однако при ВГВ значительно превышал норму (Р < 0,05). Относительное содержание сфингомиелита (СМ), лизофосфатидилхолина (ЛФХ), лизофосфатидилэтаноламина (ЛФЭ), фосфатидилинозитола (ФИ) и фосфатидилсерина (ФС) в мембранах эритроцитов не достигало статистически значимых различий как между группами больных ВГА и ВГВ, так и в сравнении с контролем.

 

Таблица 2. Содержание фракций фосфолипидов в мембранах эритроцитов (%)

Группы обследованных |	ФЭА	ФХ	СМ	ЛФЭ	ФС	ЛФХ	ФИ
Здоровые доноры	34,0±1,2	23,2±1,1	16,0±0,7	8,4±0,6	7,7±0,4	7,1±0,6	3,5±0,4
Больные       ВГА	26,2±1,6*	24,0±0,8	14,7±1,4	9,2±0,9	6,1±0,6	7,7±0,9	2,6±0,2
ВГВ	28,1±1,3*	29,1±2,1*	15,8±1,2	9,9±0,5*	6,0±0,5	8,3±0,7	2,8±0,2

* достоверное отличие по сравнению с нормой.

 

Таблица 3. Показатели липопероксидации мембран эритроцитов

Показатели	Здоровые доноры	Больные ВГА	Больные ВГВ
АОА, %	54,41±2,07 32	37,15±1,89* 54	21,40±1,63* 58
Продукция МДА, нмоль/(мл г)	36,92±1,74 32	83,87±3,96* 54	79,15±2,51* 58
Активность СОД, % торможения	38,02±2,4	43,4±2,1*	40,3±1,13
Активность каталазы, ммоль/(с • мл)	166,1±4,3	182,7±5,0*	156,6±8,4

 

При изучении процессов липопероксидации мембран эритроцитов было установлено, что при ВГА антиокислительная активность (АОА) значительно снижена (Р < 0,05), особенно у больных ВГВ, причем разница была достоверной в сравнении и с контролем, и с аналогичными данными в группе ВГА (Р< 0,05). Продукция МДА возрастала и при ВГА, и при ВГВ, но по группам резко не различалась. Активность СОД в периоде разгара ВГА и ВГВ существенно не изменялась, однако каталазная активность при ВГА была значительно выше контрольных значений и показателей у больных ВГВ (Р < 0,05).

Таким образом, как при ВГА, так и при ВГВ в мембранах эритроцитов имеются выраженные изменения в составе липидов и интенсивности процессов липопероксидации, что отражается на выполнении газотранспортной функции данных клеток [4]. Выявленные различия между показателями в обследованных группах (увеличение относительного содержания ФХ и очень низкая АОА при ВГВ, высокая активность каталазы при ВГА) могут быть использованы как дополнительные критерии в дифференциальной диагностике ВГА и ВГВ.

About the authors

E. G. Tikhomolova

St. Petersburg Sanitary and Hygienic Medical Institute

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, St. Petersburg

G. K. Novitsky

St. Petersburg Sanitary and Hygienic Medical Institute

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, St. Petersburg

A. F. Podlevsky

St. Petersburg Sanitary and Hygienic Medical Institute

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, St. Petersburg

References

Supplementary files