Простой способ количественного определения мышьяка в крови

Аннотация

Хотя по вопросу о количественном определении As в крови и существует значительная литература (Стрижевский, Bang и др.), но сложность манипуляций при определении этого элемента, малая стойкость штандартов при колориметрических определениях по Marsch’y и др. способам, необходимость готовить эти штандарты ex tempore и невозможность титрирного определения весьма малых количеств As—сделали то, что определение As не так широко распространено в лабораторной практике клиник, как это, казалось бы, нужно в некоторых случаях мышьяковой терапии.

Полный текст

Нужда в простом и удобном способе определения количеств As в крови,—способе, не требующем сложной аппаратуры, послужила поводом для нас искать такой способ, причем мы, естественно, должны были прежде всего остановиться на весьма простой и чувствительной реакции, предложенной Feigl’ем в 1923 году.

Действительно, простота производства реакции Feigl’я, ее большая чувствительность (1:1.000.000), главное же—возможность применять ее для колориметрического определения As в крови и др. биологических жидкостях, а равно тканях и органах,—все это говорит в пользу данной реакции. Способ Feigl’я состоит в том, что к исследуемой на As пробе приливается несколько капель насыщенного на холоду раствора (NH₄)₂ М_оО₄ и затем избыток солянокислого раствора SnCl₂. Если мышьяк отсутствует, то появляющееся сначала синее окрашивание при нагревании исчезает, и раствор становится желтым или бурым. Напротив, в присутствии As это синее окрашивание сохраняется, причем его интенсивность зависит от количества As; последнее и дает возможность применить эту реакцию для колориметрического определения As.

При очень малых количествах As посинение может маскироваться бурыми продуктами восстановления Mo до его низших окислов. В этом случае рекомендуется взбалтывание с амиловым алкоголем, который извлекает синий окисел Mo, окрашиваясь в синий цвет. Открытие As удается в растворе, когда в 1 литре находится 0,001 грм. As.

Для этой реакции необходимо, далее, чтобы As находился в виде мышьяковой кислоты.

По чувствительности реакция эта превосходит реакции Marsch’a, Nutzent’a, Reinsch’a, Flückiger’a и Lehmann’a; превосходит их она и по простоте производства и стойкости штандарта. Втечение 2 месяцев при стоянии на рассеянном дневном свете (на столе) штандарт не изменяет, как мы убедились, интенсивности своей окраски.

Путем многочисленных проб мы убедились, затем, в полной возможности путем этой реакции определять количества As колориметрически.

Для примера приведем в нижеследующей таблице результаты определения As в растворе, содержавшем 0,070% As₂O₅ (штандартным раствором был 0,01% раствор AS₂0₅; испытуемого раствора было взято 1 куб. с., 0,8 куб. с., 0,6 куб. с., 0,4 куб. с. и 0,2 куб. с.).

Дальнейшей нашей задачей было —путем этой реакции открыть As в крови и попытаться его количественно определить. Кровь бралась от больных сифилисом до и после введения сальварсана. Уже ориентировочные опыты убедили нас в том, что кровь (сыворотка) до введения арсенопрепаратов этой реакции не дает, тогда как после введения их в кровь или интрамускулярно получается положительная реакция.

Методика исследования, которой мы пользовались, следующая: 2 куб. с. сыворотки выпаривалось с 1 куб. с. царской водки на кипящей водяной бане досуха, сюда снова добавлялось 1 или 2 куб. с. царской водки и снова выпаривалось досуха; проделав такое выпаривание с царской водкой несколько раз, мы обрабатывали остаток водой и еще раз досуха выпаривали, после чего растворяли сухой остаток в 20 куб. с. воды и этот раствор исследовали на содержание As. Для этого к 5 куб с. испытуемого раствора прибавлялось 3—5 кап. насыщенного на холоду раствора (NH₄)₂M_oO₄ и солянокислого раствора SnCl₂ до появления серого оттенка в синеокрашенной мутной жидкости, раствор кипятился, причем при кипячении просветлялся, а вместе с тем исчезала и синяя окраска (количества As в пробах были очень малые), и жидкость принимала буровато-зеленый или желтовато-зеленый цвет. После охлаждения прибавлялось 3 куб. с. амилового алкоголя, и жидкость сильно встряхивалась, чтобы амиловый алкоголь лучше извлек синюю окраску, после чего поверх водного раствора всплывал слой амилового алкоголя, окрашенный в синий цвет той или иной интенсивности в зависимости от количеств As. Этот амилоалкогольный слой и колориметрировался со штандартом в компараторе Miсhаelis’a.

В подтверждение возможности этим путем определить количество As в крови после арсенотерапии приводим следующий пример, где больному было введено 0,6 грм. неосальварсана.

Таким образом реакция Feigl’я, по нашему мнению, является весьма простым и удобным способом как качественного, так и количественного определения As в крови—способом, легко выполнимым по своей простоте и несложности не только в клинической, но и простой больничной обстановке.

Нам кажется, что реакция эта, позволяя определять As в крови и выделения организма (последняя работа, а равно подбор постоянного красочного штандарта для колориметра Authenrith’a ведутся одним из нас) дает возможность вместе с тем следить как за поступлением в кровь, так и за выделением из организма As, а это, в свою очередь, позволяет учитывать как терапевтический эффект, так и перегрузку организма мышьяком.