A simple way to quantify arsenic in blood

Abstract

Although there is considerable literature on the issue of quantitative determination of As in the blood (Strizhevsky, Bang, etc.), but the complexity of manipulations in determining this element, the low stability of standards in colorimetric determinations by Marsch'y and other methods, the need to prepare these standards ex tempore and the inability titration determination of very small amounts of As has made the As determination not so widely used in clinical laboratory practice, as it seemed necessary in some cases of arsenic therapy.

Full Text

Хотя по вопросу о количественном определении As в крови и существует значительная литература (Стрижевский, Bang и др.), но сложность манипуляций при определении этого элемента, малая стойкость штандартов при колориметрических определениях по Marsch’y и др. способам, необходимость готовить эти штандарты ex tempore и невозможность титрирного определения весьма малых количеств As—сделали то, что определение As не так широко распространено в лабораторной практике клиник, как это, казалось бы, нужно в некоторых случаях мышьяковой терапии.

Нужда в простом и удобном способе определения количеств As в крови,—способе, не требующем сложной аппаратуры, послужила поводом для нас искать такой способ, причем мы, естественно, должны были прежде всего остановиться на весьма простой и чувствительной реакции, предложенной Feigl’ем в 1923 году.

Действительно, простота производства реакции Feigl’я, ее большая чувствительность (1:1.000.000), главное же—возможность применять ее для колориметрического определения As в крови и др. биологических жидкостях, а равно тканях и органах,—все это говорит в пользу данной реакции. Способ Feigl’я состоит в том, что к исследуемой на As пробе приливается несколько капель насыщенного на холоду раствора (NH₄)₂ М_оО₄ и затем избыток солянокислого раствора SnCl₂. Если мышьяк отсутствует, то появляющееся сначала синее окрашивание при нагревании исчезает, и раствор становится желтым или бурым. Напротив, в присутствии As это синее окрашивание сохраняется, причем его интенсивность зависит от количества As; последнее и дает возможность применить эту реакцию для колориметрического определения As.

При очень малых количествах As посинение может маскироваться бурыми продуктами восстановления Mo до его низших окислов. В этом случае рекомендуется взбалтывание с амиловым алкоголем, который извлекает синий окисел Mo, окрашиваясь в синий цвет. Открытие As удается в растворе, когда в 1 литре находится 0,001 грм. As.

Для этой реакции необходимо, далее, чтобы As находился в виде мышьяковой кислоты.

По чувствительности реакция эта превосходит реакции Marsch’a, Nutzent’a, Reinsch’a, Flückiger’a и Lehmann’a; превосходит их она и по простоте производства и стойкости штандарта. Втечение 2 месяцев при стоянии на рассеянном дневном свете (на столе) штандарт не изменяет, как мы убедились, интенсивности своей окраски.

Путем многочисленных проб мы убедились, затем, в полной возможности путем этой реакции определять количества As колориметрически.

Для примера приведем в нижеследующей таблице результаты определения As в растворе, содержавшем 0,070% As₂O₅ (штандартным раствором был 0,01% раствор AS₂0₅; испытуемого раствора было взято 1 куб. с., 0,8 куб. с., 0,6 куб. с., 0,4 куб. с. и 0,2 куб. с.).

Дальнейшей нашей задачей было —путем этой реакции открыть As в крови и попытаться его количественно определить. Кровь бралась от больных сифилисом до и после введения сальварсана. Уже ориентировочные опыты убедили нас в том, что кровь (сыворотка) до введения арсенопрепаратов этой реакции не дает, тогда как после введения их в кровь или интрамускулярно получается положительная реакция.

Методика исследования, которой мы пользовались, следующая: 2 куб. с. сыворотки выпаривалось с 1 куб. с. царской водки на кипящей водяной бане досуха, сюда снова добавлялось 1 или 2 куб. с. царской водки и снова выпаривалось досуха; проделав такое выпаривание с царской водкой несколько раз, мы обрабатывали остаток водой и еще раз досуха выпаривали, после чего растворяли сухой остаток в 20 куб. с. воды и этот раствор исследовали на содержание As. Для этого к 5 куб с. испытуемого раствора прибавлялось 3—5 кап. насыщенного на холоду раствора (NH₄)₂M_oO₄ и солянокислого раствора SnCl₂ до появления серого оттенка в синеокрашенной мутной жидкости, раствор кипятился, причем при кипячении просветлялся, а вместе с тем исчезала и синяя окраска (количества As в пробах были очень малые), и жидкость принимала буровато-зеленый или желтовато-зеленый цвет. После охлаждения прибавлялось 3 куб. с. амилового алкоголя, и жидкость сильно встряхивалась, чтобы амиловый алкоголь лучше извлек синюю окраску, после чего поверх водного раствора всплывал слой амилового алкоголя, окрашенный в синий цвет той или иной интенсивности в зависимости от количеств As. Этот амилоалкогольный слой и колориметрировался со штандартом в компараторе Miсhаelis’a.

В подтверждение возможности этим путем определить количество As в крови после арсенотерапии приводим следующий пример, где больному было введено 0,6 грм. неосальварсана.

Таким образом реакция Feigl’я, по нашему мнению, является весьма простым и удобным способом как качественного, так и количественного определения As в крови—способом, легко выполнимым по своей простоте и несложности не только в клинической, но и простой больничной обстановке.

Нам кажется, что реакция эта, позволяя определять As в крови и выделения организма (последняя работа, а равно подбор постоянного красочного штандарта для колориметра Authenrith’a ведутся одним из нас) дает возможность вместе с тем следить как за поступлением в кровь, так и за выделением из организма As, а это, в свою очередь, позволяет учитывать как терапевтический эффект, так и перегрузку организма мышьяком.