Leading markers of clinical strains of Staphylococcus aureus circulating in obstetric institutions

Full Text

Внутрибольничные инфекции (ВБИ) представляют серьезную проблему для здравоохранения. По данным В.Т. Соколовского [6], ежегодно они регистрируются более чем у 5 млн. человек, 200 тыс. из которых умирают, а экономический ущерб оценивается на сумму более 500 млн. рублей. «Стационарами риска» возникновения нозокомиальных инфекций являются родовспомогательные и хирургические учреждения. При выписке из родильного дома у 60% рожениц и 60 — 97% новорожденных обнаруживаются госпитальные штаммы S. aureus [2, 5]. В структуре ВБИ у матерей преобладают маститы, тромбофлебиты, пиелоциститы, у детей — пиодермии и абсцессы. У 81% новорожденных и 89% родильниц возбудителем выступает золотистый стафилококк [3, 7].

Цель работы — выявить маркеры госпитальных штаммов S. aureus, циркулирующих в родовспомогательных стационарах, с помощью методов комплексного типирования.

Объектом исследования были штаммы S. aureus, изолированные от персонала акушерских стационаров, здоровых новорожденных и больных гнойно-воспалительными заболеваниями (ГВЗ), а также объектов окружающей среды.

Комплексное маркирование выделенных культур провели с помощью методов антибиотико-, фаго-, биотипирования. Лекарственную чувствительность к 11 препаратам определяли на MS-2 («Abbott Laboratories», США) и MIC-2000 («Dynatech», ФРГ). Фаготипирование стафилококков осуществляли с помощью международного набора диагностических типовых бактериофагов производства НИИЭиМ имени Н.Ф. Гамалеи. Наличие 13 факторов патогенности изучали по методикам, описанным в отечественных руководствах [1, 4].

Анализ антибиотикочувствительности S. aureus, выделенных в акушерских стационарах из различных источников, показал, что штаммы, изолированные от детей с гнойно-воспалительными заболеваниями (ГВЗ), резистентны к используемому набору антибиотиков в 100% случаев; в остальных группах этот показатель статистически достоверно ниже. Стафилококки, полученные от медперсонала, были устойчивы в 87% случаев, выделенные от здоровых новорожденных и объектов окружающей среды — соответственно в 94,6% и 93,2%. Выявлены различия и по количеству по- лирезистентных штаммов. S. aureus, выделенные от больных детей, были устойчивы к 2 и более препаратам в 73,5% случаев, изолированные от персонала — в 40,2% (Т = 4,0), полученные от объектов внешней среды — в 36,6% (Т = 3,1), выделенные от здоровых новорожденных — в 27,2% (Т = 5,0).

Стафилококки, выделенные от больных ГВЗ и объектов окружающей среды, были устойчивы к хлорамфениколу соответственно в 41,2% и 34% случаев, что статистически достоверно выше, чем в остальных группах (табл. 1).

К эритромицину были устойчивы 41,2% штаммов, выделенных от больных детей, 20,2%—от медперсонала (Т = 2,4), 13,6% —из объектов окружающей среды (Т = 2,8), 10,8% — от здоровых новорожденных (Т = 3,3). S. aureus, изолированные от здоровых детей, были устойчивы к оксациллину, метициллину и канамицину соответственно в 16,2%, 16,2% и 17,6% случаев, что статистически достоверно превышало аналогичные показатели среди стафилококков, полученных у носителей, где процент устойчивых к этим антибиотикам штаммов был в пределах 6,2%. Устойчивые к гентамицину и рифампицину стафилококки были выделены только от больных и здоровых новорожденных, причем к гентамицину были резистентны 14,9% штаммов, полученных от детей-носителей, и только 2,9%, выделенных от больных. Устойчивые к рифампицину стафилококки встречались с одинаковой частотой. К тетрациклину были устойчивы 52,9% штаммов, выделенных от больных детей, 13,6% — от объектов окружающей среды (Т = 3,9)), 12,9% —от персонала (Т = 4,5), 12,2% —от здоровых новорожденных (Т = 4,3). Культуры, устойчивые к линкомицину (10%) были получены только от детей-носителей.

 

Таблица 1. Частота выделения устойчивых к антибиотикам штаммов S. aureus, изолированных в акушерских стационарах у различных источников

Источники

Всего изучено штаммов (абс.)

Из них устойчивы к (в %±)

GMP

ERY

GEN

OXA

MET

PEN

TET

KAN

RYE

CLT

LIN

Носители

медперсонал

240

17,1±2,4

20,4±2,6

—

5,0±1,4

6,2±1,6

86,3±2,2

12,9±2,2

0,8±0,6

—

5,1±1,4

—

дети

74

13,5±4,0

10,8±3,6

14,9±4,1

16,2±4,3

16,2±4,3

93,2±3,0

12,2±3,8

17,6±4,4

4,1±5,3

1,4±1,4

10,0±3,5

Дети с ГВЗ

34

41,2±8,4

41,2±8,4

2,9±2,9

2,9±2,9

2,9±2,9

97,1±2,9

52,9±8,6

5,9±4,0

2,9±2,9

2,9±2,9

—

Объекты окружающей среды

44

34,0±7,1

1З,6±5,2

—

4,5±3,1

4,5±3,1

91,0±4,3

13,6±5,2

4,5±3,1

—

—

—

Итого

392

20,4±2,0

19,6±2,0

3,1±0,9

6,9±1,3

7,6±1,3

89,0±1,6

16,3±1,9

4,8±1,1

1,0±0,5

3,1±0,9

 

Установлены доминирующие спектры детерминант устойчивости S. aureus, изолированных в родовспомогательных стационарах из различных источников: среди стафилококков, выделенных от персонала, преобладали типы PEN, CMP (18%), PEN, ERY (17%), PEN, ERY, OXA, MET, CLT (12%). Среди культур, полученных от объектов окружающей среды, —PEN, CMP (33,3%), PEN, CMP, TET (20%). S. aureus, изолированные из гнойных очагов у новорожденных, чаще имели спектры PEN, CMP, ERY (28%) и PEN, TET (20%). Среди штаммов, выделенных от здоровых новорожденных, доминировали спектры PEN, CMP, ERY, GEN, OXA, MET, TET, KAN, LIN (26%).

Фагомозаика S. aureus, полученных в родовспомогательных учреждениях, была довольно пестрой (табл. 2). Изоляты от медперсонала чаще типировались фагами II группы (25%), а колонизирующие новорожденных— в основном V (28,3%) и I (26,7%). Среди стафилококков, этиологически ответственных за ГВЗ у новорожденных, преобладали штаммы I группы (33,3%). Культуры, полученные из объектов окружающей среды, чаще типировались фагами I и II групп (по 27,3% каждая).

 

Таблица 2. Фагогрупповая характеристика штаммов S. aureus, выделенных в акушерских стационарах из различных источников

Источники

Всего изучено штаммов (абс.)

В том числе типируемых

Из них лизировались бактериофагами следующих групп (в %±m)

абс.

%±m

I

II

III

V

I + III

III + III

I+V

I+II+III

и др.

Носители

медперсонал

232

152

65,0±3,1

17,8±3,1

25,0±3,5

15,8±3,0

19,1±3,2

4,6±1,7

3,3±1,4

4,6±1,7

2,0±1,1

7,8±5,1

дети

72

60

83,0±4,4

26,7±5,7

13,3±4,4

10,0±3,9

28,3±5,8

5,0±2,8

1,7±1,7

10,0±3,9

—

5,0±2,8

Больные ГВЗ

33

21

63,6±8,4

33,3±10,2

14,3±7,6

14,3±7,6

14,3±7,6

4,8±4,7

9,5±6,4

—

—

9,5±6,4

Объекты окружающей среды

39

33

84,6±5,8

27,3±7,7

27,3±7,7

15,1±6,2

6,1±4,2

6,1±4,2

9,0±5,0

—

3,0±3,0

6,1±4,2

Итого

376

266

70,7±2,3

22,2±2,7

21,8±2,5

14,3±2,1

19,1±2,4

4,9±1,3

4,2±1,2

4,9±1,3

1,5±0,7

7,1±2,1

 

Анализ литических спектров S. aureus, циркулирующих в акушерских стационарах, позволил установить, что 45% культур стафилококков относились к трем наиболее часто встречающимся фаговарам: 94/96 (19%), ЗА/ЗС/55/71 (11%), 52/52А/ 80 (15,8%). Среди стафилококков, изолированных от медперсонала, доминировали фаговары 94/96 (19%), ЗА/ЗС/55/71 (11%), 52/52А/80 (9,2%); среди выделенных от здоровых новорожденных — 94/96 (28%),52/52А/80 (22%), ЗА/ЗС/55/71 (12%). Среди стафилококков, полученных из патологического материала от больных ГВЗ и объектов окружающей среды, доминировал фаговар 52/52А/80 (соответственно 33,3% и 24,2%).

Все изученные нами S. aureus обладали плазмокоагулазной и ДНК-азной активностью. Выраженность остальных биологических признаков варьировала в широких пределах (от 7,4 до 100%). Способностью продуцировать лизоцим, гиалуронидазу и лецитиназу обладали более 90% стафилококков. Синтез липазы, разрушающей твин-20, обнаружили у 82% культур. Продукцию протеиназы наблюдали у 84% штаммов. Желатиназу разжижали 70% изученных стафилококков. Выраженность перечисленных выше признаков, по нашим данным, не зависела от источника выделения штамма (табл. 3). Частота обнаружения отдельных типов гемолизинов (α, δ) варьировала в зависимости от источника: золотистые стафилококки, этиологически ответственные за ГВЗ у новорожденных, продуцировали α-токсин в 92,9% случаев, штаммы, выделенные от здоровых новорожденных— в 84,3% (Т = 2,9), из объектов окружающей среды — в 55,6% (Т = 3,5). Обратную зависимость наблюдали для δ-гемолизина. Стафилококки, изолированные от больных детей и сотрудников, синтезировали ô-токсин соответственно в 67,9% и 89,6% случаев (Т = 2,3).

 

Таблица 3. Характеристика биологических признаков штаммов S. aureus, выделенных в акушерских стационарах из различных источников

Всего изучено штаммов, в том числе положительного реагирующих культур (в %±m)	Носители		Дети, больные ГВЗ (n = 30)	Объекты окружающей среды (n=29)
	медперсонал (n=71)	Дети (n=53)
α-гемолизин	71,5±5,5	84,3±5,1	92,9±4,8	55,6±9,6
ô-гемолизин	89,6±3,7	76,5±5,9	67,9±8,8	85,2±6,8
ß-гемолизин	20,6±5,0	11,8±4,5	17,9±7,2	7,4±5,0
Фибринолизин	54,9±5,9	37,7±6,7	76,6±7,8	51,7±9,3
Гиалуронидаза	90,1±3,5	92,5±3,6	93,3±4,6	89,7±5,6
Лецитиназа	90,1±3,5	88,7±4,3	93,3±4,6	89,7±5,6
Протеиназа	88,7±3,8	71,7±6,2	90,0±5,4	75,9±7,9
Желатиназа	64,8±5,7	84,1±5,4	73,8±8,1	62,1±9,0
Липаза, разруш.
Твин-20	87,3±3,9	77,3±5,7	83,3±7,0	79,3±7,5
Лизоцим	97,2±2,0	98,1±1,9	96,7±3,3	93,1±4,7

 

Способностью продуцировать фибринолизин обладали 60,8% изученных штаммов. Среди различных групп источников наиболее высокий процент фибринолитической активности выявлен у стафилококков, выделенных от больных новорожденных (76,6%). Частота обнаружения этого признака у штаммов других групп была ниже: для S. aureus, выделенных от персонала, —54,9% (Т= 1,9), для штаммов, изолированных от здоровых новорожденных, —37,7% (Т = 3,8), для штаммов, полученных из внешней среды родильных домов, —51,7% (Т = 2,1).

ВЫВОДЫ

1. Стафилококки, этиологически ответственные за ГВЗ у новорожденных, полирезистентны к антибиотикам в 73,5% случаев, полученные из других источников в акушерских стационарах— не более чем в 30 — 40%. Среди S. aureus, изолированных из гнойных очагов, доминируют спектры детерминант резистентности PEN, CMP, ERV и PEN, TET.
2. Метод фаготипирования выявил 70,7% типируемых культур среди госпитальных S. aureus, циркулирующих в родовспомогательных стационарах, с доминирующими фаговарами 94/96, 52/52А/80 и ЗА/ЗС/55/71.
3. Госпитальные штаммы S. aureus продуцируют широкий спектр факторов патогенности. Культуры, изолированные из очагов поражения, синтезируют а-гемолизин и фибринолизин, чаще чем выделенные из других источников.

About the authors

L. T. Musina

Kazan Medical University; Central Research Institute of Epidemiology of the State Committee for Sanitary and Epidemiology of the Russian Federation

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com

Department of Microbiology, Laboratory of Hospital Infections

Russian Federation, Kazan; Moscow

K. K. Gladkova

Kazan Medical University; Central Research Institute of Epidemiology of the State Committee for Sanitary and Epidemiology of the Russian Federation

Email: info@eco-vector.com

Department of Microbiology, Laboratory of Hospital Infections

Russian Federation, Kazan; Moscow

N. A. Semina

Kazan Medical University; Central Research Institute of Epidemiology of the State Committee for Sanitary and Epidemiology of the Russian Federation

Email: info@eco-vector.com

Department of Microbiology, Laboratory of Hospital Infections

Russian Federation, Kazan; Moscow

References

Supplementary files