Peripheral blood lymphocytes of patients with cervical cancer during radiation therapy

Abstract

Tumor growth is accompanied by a change in the immunological background of patients [1]. One of the indicators of suppression of immunological reactivity in this pathology is a decrease in the number of circulating T- and B-lymphocytes (3).

Full Text

Опухолевый рост сопровождается изменением иммунологического фона больных [1]. Одним из показателей подавления иммунологической реактивности при данной патологии является снижение числа циркулирующих Т- и В-лимфоцитов (3).
Ведущим методом лечения больных раком шейки матки выступает лучевая терапия. В процессе лечения в зону облучения попадают до 40% объема костного мозга и важные группы лимфатических узлов, что может привести к добавочному подавлению иммунологической реактивности. Особый интерес представляет сравнительное изучение степени подавления Т- и В-лимфоцитарных популяций. Получение сравнительных данных о глубине угнетения дифференцировки лимфатических популяций на различных стадиях заболевания при лучевой терапии может иметь значение для характеристики уровня клеточного и гуморального иммунитета.

Под наблюдением находились 32 больные раком шейки матки в возрасте от 40 ДО 70 лет. По классификации TNM. у 9 больных установлено Т1NоМо, у 16 – Т2NoМо, у 7 — T3N0M0. Преобладала эндофитная форма рака шейки матки (25). У I женщин опухоль имела экзофитный тип роста. Больные получали сочетанную лучевую терапию, включавшую в себя внутриполостное облучение с суммарной дозой от 50 до 75 Дж/кг и дистанционную гамма-терапию на область малого таза с 4 полей с суммарной дозой от 30 до 40 Дж/кг.
Обследование проводили в динамике до начала лечения, через 10, 20, 30 и 40 — 45 дней от его начала. Контрольную группу составляли 20 здоровых женщин в возрасте от 30 до 50 лет.

Содержание Т-лимфоцитов определяли методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана. В-лимфоциты идентифицировали по наличию на их поверхности рецепторов для третьего компонента комплемента 12]. Активные лимфоциты учитывали по Уэсту и др. (1977). Нулевые лимфоциты составляли группу клеток, не имевших ни Т-, ни В-маркеров. Анализ популяционного лимфоцитарного состава периферической крови больных раком шейки матки в исходном состоянии до начала лучевой терапии показал снижение содержания Т-лимфоцитов. При этом в I стадии заболевания отмечалось незначительное падение их количества с 1230+1,25-109 до 716+74,8*10_ в х л. С утяжелением патологического процесса и переходом заболевания во II и III стадии количество циркулирующих Т-лимфоцитов снижалось более значительно и достигало 604+57*109 и 618+181*109 в 1 л крови соответственно (P<0,05).

Снижение количества Т-лимфоцитов было представлено в I стадии заболевания преимущественно уменьшением содержания циркулирующих высокоаффинных 1-лимфоцитов с 441 + 53-109 до 214+83-109 в 1 л периферической крови.
Содержание В-лимфоцитов изменялось менее значимо. В I стадии заболевания оно практически было идентично контрольным цифрам (332+45*10 в 1 л). Во II и I стадиях процесса отмечалось снижение В-лимфоцитов до 224+30-10 в 1 л и 253 ±75*109 в 1 л соответственно.

Лучевая терапия приводила к быстро наступающим изменениям в лимфоцитарном популяционном составе периферической крови. Выраженное снижение содержа ния лимфоцитов обнаруживалось через 10 дней от начала лечения после внутрипо постного облучения с суммарной дозой 44,1 Дж/кг и гамма-терапии на точку В по 25 Дж/кг с 716+75-109 в 1 л до 391+93 109 в 1 л крови (см. табл.).
Падение уровня Т-лимфоцитов прогрессировало до конечных сроков наблюдения. После достижения суммарной дозы 75,8 Дж/кг и на точку В по 29 Дж/кг к 20-му дню наблюдения их содержание упало до 285+39,8 10 в 1л (P<0,05), а на конечных сроках составляло 156+22-109 в 1 л (P<0,05). Полученные данные свидетельствовали что даже после достижения доз лучевой терапии, вызывающих «разрушение большей части радиочувствительных Т-лимфоцитов, происходило дальнейшее снижение числа циркулирующих Т-лимфоцитов. На преимущественное снижение популяции Т-лимфоцитов по сравнению с другими лимфоцитарными популяциями указывало прогрессирующее падение уровня Т-лимфоцитов, особенно отчетливое на поздних сроках лечения.

Влияние сочетанно-лучевого лечения на популяционный состав лимфоцитов периферической крови больных раком шейки матки (М±m)

Время обследования	Лимфоциты • 109 в 1 л	Т-лимфоциты		В-лимфоциты		Активные Т-клетки		О-клетки
		%	абс.• 109 в 1 л	%	абс.• 109 в 1 л	%	абс.• 109 в 1 л	%	абс.• 109 в 1 л
До начала лечения	1670±263	50.3-1±3,5*	716±75*	17,7±1,4	267±34	17,1±2,5	253±56*	32,7±5,0*	481±80
В процессе лечения через 10 дней	846±147**	44,9 ±4.5	391±93**	19,9±2,7	130±28**	18,0±6,1	178 ±17	33,8±5,3	211±40**
20 дней	680±112**	33,4±2,7**	285±39**	13,6±1,3**	82±14*"	12,6±1,8	89±21**	53,0±3,3	328±40
30—32 дня	598±68**	41,2±4,8	234±35**	15,8±3,0	77±15,6**	14,7±2,8	110±38	43,9±6,1	279±45**
К концу лечения	609±88**	28,3±3,8**	156±20**	14,3±1.9**	126±33**	8,0±1,5*:	83,0±20**	56,0±4,4**	384±68
Контроль	1990±168	59,8±2,7	1230±125	18,3±1,7	332±45,1	20,1±1,5	441±53	21,8±2,8	379±57

*Величины достоверно различаются по сравнению с контролем.
** Величины достоверно различаются по сравнению со сроками лечения и с исходными результатами.

При исследовании популяции В-лимфоцитов в динамике лечения мы обнаружили снижение их количества уже на 10-е сутки с достижением минимальных значений к 20-му дню наблюдения. В дальнейшем при продолжении лучевой терапии нами не отмечено колебаний абсолютного и процентного их содержания.

Анализ содержания нулевой популяции лимфоцитов периферической крови показал, что после кратковременного снижения их количество в первые 10 сут восстанавливалось. При этом отмечено резкое увеличение их процентного содержания среди группы лимфоидных клеток. В группу нулевых клеток входит большая группа предшественников зрелых популяций Т- и В-лимфоцитов. В связи с этим следует предположить, что на ранних сроках лучевой терапии из популяции удаляется также и часть нулевых радиочувствительных клеток. Однако продолжение лечения не приводит к полному подавлению лимфопоэза. В циркуляцию входят незрелые популяции лимфоцитов, не имеющие ни Т-, ни В-маркеров.

Таким образом, лучевая терапия при раке шейки матки сопровождается подавлением образования как Т-, так и В-лимфоцитов. Наиболее выраженное снижение наблюдается со стороны Т-популяций лимфоцитов, обеспечивающих уровень клеточного иммунитета. По механизмам развития лимфоцитопения при облучении связана с разрушением радиочувствительных популяций клеток и нарушением дифференцировки их предшественников. К концу курса лучевой терапии группу радиорезистентных лимфоцитов периферической крови составляют в основном недифференцированные предшественники Т- и В-лимфоцитов.