Shelf life of serum for serological reactions

Abstract

By involving the general medical network in the fight against sexually transmitted diseases, we will inevitably experience certain difficulties for some time in providing local doctors with the opportunity to widely use seroreactions to syphilis. This is especially true in medical districts of those remote areas, where, in the absence of a serologist on site, the doctor is forced to send sera by mail to the regional or district laboratory. In these cases, the possibility of a seroreaction with sera whose expiration date has already expired cannot be excluded.

Full Text

Вовлекая общемедицинскую сеть в дело борьбы с венерическими болезнями мы неизбежно будем еще некоторое время испытывать известные затрудненна при обеспечении участковым врачам возможности широко использовать серореакции на сифилис. В особенности это касается медучастков тех глубинных районов, где при отсутствии на месте серолога врач вынужден пересылать сыворотки почтой в областную или районную лабораторию. В этих случаях не исключена возможность постановки серореакции с сыворотками, срок годности которых уже истек.

Как известно, одним из непременных условий правильной техники серореакции при сифилисе является взятие крови у больных не ранее, чем за сутки до постановки реакции. Проф. Григорьев указывает, что реакция по методу его и Рапопорта должна производиться не ранее 8 и не позднее 36 часов с момента взятия крови у больного. Ширвиндт допускает возможность удлинения срока годности сыворотки до 48 часов. Калинин и Гинзбург высказываются за необходимость постановки реакции в первые 24 часа. По активному методу Вайнштейна реакция должна ставиться с сывороткой не позднее 24 часов после ее взятия у больного.

Столь жесткие требования в отношении сроков годности сыворотки могут в ряде случаев оказаться для участковых врачей невыполнймыми. Поэтому перед серологами выдвигается практически важная задача—разрешить вопрос об удлинении сроков хранения сывороток и разработать метод их консервации, что несомненно устранит ряд затруднений для периферии и значительно облегчит возможность широкого применения серореакций на медучастке.

Наши наблюдения за последние годы показали, что сроки годности сывороток, общепринятые в настоящее время в серологии, отнюдь не являются абсолютными и что они без ущерба для точности реакции могут быть несколько удлинены. Мы подвергли тщательной разработке лабораторные записи серологического отделения нашего Института за 1937 г. и первый квартал 1938 г., касающиеся 3500 параллельных исследований по Вассерману и Григорьеву — Рапопорту сывороток различной давности, от 1 до 5 и в отдельных случаях даже до 7 суток. Совпадение результатов обеих реакций в постановках с сыворотками давности от 1 до 3 суток (3121 иссл.) констатировано нами в 97%, задержку в контроле мы имели при р. Г—Р в 3%, при р. В. в 1,3%. Совпадение результатов реакций с сыворотками давности от 3 до 5 суток (303 иссл.) имело место в 92%, задержка в контроле при р. Г—Р—5,9%, при р. В—в 4,2%. Наконец.

при давности сывороток от 5 до 7 суток (76 иссл.) совпадение результатов было только в 87%, задержка в контроле при р. Г — Р 26,3%, при р. В—11,8%.

Следовательно, с удлинением срока хранения сыворотки уменьшается процент совпадений в результатах обеих реакций и одновременно увеличивается процент задержки в контроле. Эти данные побудили нас специально заняться изучением вопроса о действительных сроках годности сывороток для р. В. и р. Г—Р.

Наши опыты были поставлены на 134 сыворотках, из которых 74 были по р. В и Г—Р отрицательные и 60—положительные. Обе реакции ставились параллельно через 24, 36, 48, 72, 96, 120, 144, 168, 192 и т. д. часов после взятия крови у больных, до получения полной задержки в контроле. Отделение сыворотки от сгустков крови производилось спустя 24 часа после взятия крови, отстаивание—при комнатной температуре (16—18°С); сыворотки сохранялись для повторных реакций при 8—14°С. Постановка реакций производилась с двумя антигенами: специфическим и неспецифическим.

Результаты наших опытов показывают, что заведомо отрицательные сыворотки, сохраняемые при температуре 8—14°С, могут быть использованы для постановки р. Г—Р в течение первых 4 суток, для р. В—даже 7 суток. Заведомо положительные сыворотки сохраняют свою годность для р. Г—Р в течение 5 суток, для р. В—7 суток при тех же условиях хранения.

Весьма существенным обстоятельством, имеющим значение для врачей участковой сети, является выработка определенной методики хранения и упаковки сыворотки для транспортировки в лабораторию. Как показывает опыт серологического отделения нашего Института, обслуживающего на протяжении ряд лет периферические лечебные учреждения, наиболее целесообразной следует признать следующую методику: 1) взятие крови не должно производиться при помощи шприца, так как многократное кипячение шприца технически затруднительно при массовых взятиях крови, промывание же стерильным физиологическим раствором не гарантирует абсолютной чистоты шприца; мы рекомендуем пользоваться иглой.

• 2) Отстаивание сыворотки должно происходить при температуре 16—18°С в течение 6 — 12 часов.
• 3) Полученная сыворотка сливается в стерильные, сухие флаконы, емкостью 5—10 см³. Не рекомендуется запаивать сыворотку в ампулы, так как нагревание меняет качества сыворотки, разрушая комплемент и делая ее непригодной для постановки не только активных реакций, но и р. В.
• 4) Наиболее подходящей температурой для хранения сыворотки мы считаем 6—14°С. Более высокая и более низкая температура сокращает срок ее годности.

Таким образом, врачи общемедицинской сети располагают возможностью широко использовать серореакции, даже при отсутствии в их распоряжении серологической лаборатории, как для диагностики и контроля за лечением, так и при массовых обследованиях, пересылая сыворотки в ближайшую лабораторию почтой.