To the doctrine of rickettsioses

Abstract

Recently, there has been a significant increase in interest in the study of ricketzioses in humans and domestic animals. New types of rickettsia have been found, their role as causative agents of certain disease processes has been studied, and the role of various insects as transmitters of rickettsiosis has been clarified.

Full Text

1. Риккетции и их роль в патологии

В последнее время значительно повысился интерес к изучению риккетциозов человека и домашних животных. Найдены новые виды риккетций, изучена их роль в качестве возбудителей тех или иных болезненных процессов и выяснена роль различных насекомых как передатчиков риккетциозов.

До последнего времени в Советском Союзе мы изучали только „вшивые риккетциозы (сыпной тиф). Доклады, сделанные на недавно прошедшей Всесоюзной конференции микробиологов и инфекционистоз, указывают на то, что в некоторых местах нашего Союза в самые последние годы констатированы и „к’ещевые⁸ риккетциозы. Это обязывает нас мобилизовать научные силы на самое тщательное изучение риккетциозмых заболеваний, их передатчиков и добавочных резервуаров инфекции в природе.

1)Общие свойства риккетций

Под названием риккетциозов известна в настоящее время обширная группа заболеваний человека и животных, вызываемых микробами, принадлежащими к роду Rickettsia, выделенному в 1916 году да Роша-Лима. Риккетциозы могут протекать эндемически или энзоотически, эпидемически или в форме эпизоотии.

Все риккетциозы, за исключением трахомы человека и инфекционного конъюнктивита жвачных, являются заболеваниями всего организма, передающимися от больного индивидуума здоровому при помощи кусающих членистоногих.

Первую риккетцию наблюдал Риккетс в 1909 г., в крови человека, больного пятнистой лихорадкой (spotted fever). Годом позже, в 1910 г., Вильдер видел риккетции в крови человека, больного европейским сыпным тифом, а также у вшей, снятых с сыпнотифозных.

Первая из изученных риккетций была Rickettsia Prowazeki, названная так да РошаЛима в честь погибших от сыпного тифа Риккетса и Провачека.

Большинством современных микробиологов R. Prowazeki считается возбудителем европейского (исторического) сыпного тифа. Первая из патогенных для животных риккетций, возбудитель болезни, именуемой „сердечная вода^", Heart-water, была описана у жвачных и изучена в 1926 г. Коудри. Интересно отметить, что некоторые риккетциозы животных, по своей патолого-анатомической картине и отчасти по клиническому симцтомокомплексу, напоминают нам тот общий синдром, который мы привыкли считать характерньш для сыпного тифа и родственных ему заболеваний.

Rickettsia принадлежат к полиморфным протистам, отчасти схожи с бактериями, но отличаются от последних морфологией, способами окраски и местом своего пребывания в организме животных и человека. Согласно да Роша-Лима и др. на окрашенных препаратах риккетции не легко отличить от кокковых и коротких палочковидных форм бактерий и разных зерен. Основная форма риккетции  это овальное, ланцетовидное или круглое образование. В период роста риккетции удлиняются и делятся. Перетяжка, образующаяся у палочковидных особей перед делением, придает двумя молодым дочерним элементам форму гимнастической гири. Наблюдаются и другие формы кольцевидные, диплококковые, стрептококковые и собранные в маленькие кучки. Величина риккетций незначительна и обычно колеблется между 0,2—0,4 микрона для молодых форм и доходит по Донасиену и Лестокарду в период деления до 0,9—2,5 микрона. Обычными способами, применяемыми для окраски бактерий, риккетции окрашиваются с трудом; несколько удовлетворительнее воспринимают окраску по способу Лефлера, применяемому для окраски жгутиков. По Граму отрицательны. Лучшим способом нужно считать окраску Гимза или Май-Гимза. Донасиен и Лесюкард рекомендуют модифицированный способ окраски по МайГимза, состоящий в следующем: 1) фиксация препарата иодированным алкоголем; 2) окрашивание растворами Май-Грюнвальд и Гимза (равные части), прибавленными к дестиллированной воде. Для некоторых риккетций, в частности д я R. Prowazeki, Кастаньеда считает сп цифичным предложенный им способ окраски, согласно которому микробы окрашиваются смесью буферного формалинизированного раствора натриум-фосфата и лефлеровской метиленовой синьки.

Рик ещии не обладают собственным движением, но будучи суспендированы в жидкости, обнаруживают иногда оживленное броуновское движение.

Некоторые из видов Rickettsia могут проходить через различные мелкипористые фильтры; но большинство видов не фильтруется.

2) Культивирование риккетций.

Риккетции не культивируются на питательных средах, применяемых для выращивания бактерий, но многие из них весьма удовлетворится! но размножаются в тканевых кулыурах. Впервые Кронтовский и Гах в 1923 г. и затем Кучинский показали, что им удалось понудить вирус сыпного тифа размножаться в тканевых культурах. Метод Карреля был использован с большим успехом Вольбихом, Пинкертоном и Шлезингером для выращивания риккетций, причем по данным указанных авторов, риккетции сохраняются в первой генерации тканевых культур 15-20 дней, а при пассировании в субкультурах—до 4 недель. По Ногайя, Тамизя и Митамура R. Prowazeki хорошо размножается в эндотелии десцеметовой оболочки. С прекрасными результатами метод Ногайя и его сотрудников был использован Сато, которому удалось поддерживать сыпнотифозный вирус в тканевых культурах в течение 6 месяцев, обновляя его за это время в 13 генерциях.

Важным этапом культивирования риккетций необходимо считать работы Музера, установившего, что возбудитель мексиканского сыпного тифа „Tabardillo" при введении морским свинкам, вызывает у них геморрагии — один из характерных признаков заболевания риккещиозами. При впрыскивании морским свинкам самцам в брюшную полость вируса Tabardillo, обнаружено избирательное действие этого микроба на testes (орхиты и периорхиты). Характерным при этом является поражение tunicae vaginalis, в особенности париетального листка ее, что сопровождается выделением эксудата (феномен Нейль-Моозера). При таком внутрибрюшинном заражении морских свинок (и крыс) в эндотелии брюшины, а в особенности в эндотелии tunica vaginalis propriae и в эксудате мошонки констатированы Rickettsia Prowazeki. Доказана идентичность „телец Мозера“ из мошоночного эксудата с риккетциями; удалось заразить вшей, вводя им скротальный эксудат. Цинсер. и Кастаньеда заразили морских свинок отмытыми риккетциями из то о же скротального эксудата. Пинкертот (192) установил, что при внутрибрюшинном введении вируса эпидемического (европейского) сыпного тифа морским свинкам-самцам, нет анатомических изменений в мошонке, но в мазках из нее можно констатировать тельца Моозера. Пинкертон и Гесс, внося кусочек оболочки яичка или небольшой сгусток фибрина из скротального эксудата в смесь из селезеночного экстракта с соком из эмбрионов морской свинки и гепариновой плазмой, получили культуры и субкультуры риккетций. Значительное накопление риккетций наблюдалось особенно в четвертой и пятой субкультурах, т. е. после 16—21-го дня пребывания in vitro. Ниг и Ландштейнер выращивали этих микробов в среде, состоящей из смеси гепариновой плазмы морской свинки, раствора Рингера и селезеночного экстракта; к эюй смеси прибавлялась измельченная tunica vaginalis *самца морской свинки, взвешенная в растворе Тироде (2:1). Такая среда позволила авторам получить в течение 6 месяцев 20 генераций культур сыпнотифозных риккетций, без потери вирусом его вирулентное и. Клиглер и Ашнер успешно культивировали риккетции из кишечника инфицированной вши в среде, состоящей из 2,5 см³ раствора Тироде плюс 0,5 см³ сыворотки морской свинки. Накопление риккетций в клетках культуры и около них констатировано через 8—9 дней (при 30° С). Субкультурами удалось осуществить заражение морской свинки и пассировать вирус на этих животных, а от них — на вшах. Вирус пятнистой лихорадки Скалистых гор (Spotted fever) был культивирован Брайнлем на среде, состоящей из смеси сыворотки морской свинки и раствора Тироде со взвешенными в ней эмбриональными клетками куриного зародыша. В ¹/₃ части всех опытов получены культуры, которые удалось сохранить в течение 7 пассажей, но бесспорное обнаружение риккетций в культурах не было доказано. Сузуки культивировал Rick, orientalis в той же питательной среде, которой пользовался Брайнль; успех при этом зависел от ряда факторов, из которых необходимо отметить в первую очередь возраст зародыша (он должен быть 8—11-дневным). Конституциональные особенности породы кур, от которых берут яйца, также не остаются без влияния, на успех выращиваний реккетций. Кимура, Огата и Нишибе успешно культивировали Rick. Ргоwazeki на среде, приготовленной из легочной ткани. Методом Гудпастера (культивирование на хорион-алантоисе куриного зародыша) воспользовались Цинсер и Кастаньеда при выращивании вируса как мексиканского, так и европейского сыпного тифа.

Из всего сказанного следует, что риккетции являются микроорганизмами с исключительной тенденцией к паразитарному существованию., В организме человека и живогных риккетции расположены в клетках ретикуло-эндотелиальной системы (эндотелий, моноциты); в организме членистоногих передатчиков они находятся в клетках эпителия. О।сюда — невозможность культивирования этого вида микроорганизмов на искусственных питательных субстратах без прибавления живых клеток. Только в клетках животного организма риккетции находят необходимые условия для своего существования и размножения.

Место риккетций в системе организмов совершенно не выяснено. Что представляют собою эти микроорганизмы — бактерии или простейшие? Можно привести достаточно аргументов в пользу обеих теорий. Однако, большинства исследователей, работавших с риккетциями, склоняются в пользу признания риккетции простейшими.

3)Передатчики риккетциозов.

Еще в 1876 г. д-р Минх, прозектор Одесской городской больницы, высказал мысль о возможности передачи сыпного и возвратного тифа от человека к человеку при помощи насекомых. К сожалению, это предположение не обратило на себя внимания его современников.

В 1892-93 гг. Неттер и Туано указали на возможное распространение сыпного тифа вшами, но экспериментальных доказательств такому предположению не дали. В 1А)9 г. тунисский ученый Шарль Николь и его сотрудники доказали, что у обезьян можно вызвать сыпной тиф, сажая им на кожу платяных вшей, инфицированных вирусом сыпного тифа. Впоследствии роль вши, как передатчика сыпного тифа, была подтверждена многими авторами. Дальнейшими многочисленными исследованиями в разных странах, установлено, что и другие насекомые как кровососущие, так и некровососущие, могут быть носителями и передатчиками риккетциозов человека и животных.

Риккетции широко распространены среди различных насекомых, у части которых они вызывают своеобразные заболевания; у иных же риккетции могут пребывать в полусапрофитном или сапрофитном состоянии в просвете кишечника, в его эпителии или иногда в других органах. Ряд насекомых, в частности клещей, может быть носителем и передатчиком одновременно риккетций и некоторых гемопаразитов человека и животных. Таким образом, один и тот же клещ, например, может одновременно (при укусе) инокулировать два, а в некоторых случаях и три заболевания.

4)Классификация риккетциозов человека и животных.

А. Классификация риккетциозов человека.

Громадное большинство риккетциозов человека принадлежит к заболеваниям группы сыпного тифа и его разновидностей. Для всех заболеваний группы сыпного тифа характерно: I) Выраженное циклическое течение инфекции, представляющей заболевание общебактериемического типа (кровяная инфекция). 2) Наличие характерной макулезной сыпи на коже и энантем слизистых в определенной стадии процесса. При тяжелых формах болезни эффлоресценции могут принимать геморрагический характер. 3) Наличие поражений центральной нервной системы, особенно при тяжелых формах данного процесса. 4) Положительная реакция Вейль-Феликса, наступающая с .5—9-го дня заболевания (агглютинация сывороткой больного В. Proteus Х₁₉ или вида, близкого ему). 5) Наступление ясно выраженного постинфекционного иммунитета. Передача заболевания кровососущими и кусающими насекомыми — вшами, блохами.

В группе инфекций, клинически схожих с сыпным тифом реакция Вейль-Феликса может быть нехарактерной и часто отсутствует. Передатчиками этих инфекций являются различные клещи. Директор Тунисского пастеровского института Э. Борнэ в докладе о риккетциозах человека, сделанном VIII научному конгрессу врачей северной Африки, предлагает такую классификацию заболеваний человека:

I. Риккетциозы, протекающие с наличием экзантем.

А. Группа тифа: а) подгруппа эпидемического тифа, включая сюда и болезнь Брилля. Возбудитель Rickettsia Prowazeki, переносчик заболеваний — вошь. Болезнь Брилля, т. н. Typhus minor, протекает при сходной с сыпным тифом клинике и при положительной реакции Вейль-Феликса, если для постановки его употреблять рассы Proteus не европейского типа, в) Подгруппа крысиного тифа ил и „Tabardillo“ (мексиканский или эндемический сыпной тиф). Возбудитель Rickettsia mooseri; передается человеку укусами крысиных блох—резервуар вируса—крысы; от человека к человеку передается укусами вшей. Реакция Вейль-Феликса положительная, с) Подгруппа крысиного тифа — вобудитель Rickettsia muricola; в нее входят „морская лихорадка" и „тропический" городской тиф Малезии (Shop typhus).. Передается укусами блох. Положительная реакция Вейль-Феликса.

В. Группа пятнистой лихорадки.

1) Пятнистая лихорадка Скалистых гор (Rocky Mountain spotted fever —англ. La fievre pourpuree des Montagnes wcheuse — фрлнц.). Клинически данное заболевание сходно с сыпным тифом; экзантема макулезно-папулезного характера. Реакция Вейль-Феликса — отрица ельная. Возбудитель — Dennacentroxenus rickettsii с двумя разновидностями — Rickettsia orientals и Rickettsia occidentalis. Передается укусами клещей—Dermacentor Andersoni и Derm, variabilis.

2) Тиф Sao-Paulo, передающийся клещом Amb’yomma cayenense

3) Болезнь Кардуччи-Ольмера или la fievre boutoneuse — переносчик заболев ния — собачий клещ Rhipicephalus sanguineus. Сыпь при данном заболевании мак)лезно папулезного характера; на месте укуса клеща чсто бывает струп; констатированы (не всегда) регионарные лимфадениты. За весьма редкими исключениями реакция Вейль-Феликса отрицательная.

4) Южно-африканское заболевание (Мозамбик) от укуса клещей Ticke bite-fever. Заболевание напоминает болезнь К; рдучч-Сльмера. На месте укуса появляется прыщ или фурункул при наличии региойарных лимфангоитов и болезненных бубонов. Генерализация высыпаний может быть не во всех случаях. Передается укусами клеща Amblyomma hebraeum. Реакция Вейль-Феликса — отрицательная.

С. Группа тсутсугамуши или японской речной лихорадки.

1) Болезнь „тсутсугамуши" характеризуется наличием кожной макуло-папулезной сыпи, некротического сгрупика на месте укуса клеща — передатчика заболевания и регионарным лимфаденитом. Реакция Вейль-Феликса отрицательная. Клещ-переносчик— Trombicula Akamushi.

2. Тиф сельских местностей (scrub typhus) Малезии и ticke-lite-fever других местностей Африки, протекает пр i наличии макулезной сыпи; возможна положительная реакция Вейль-Феликса при употреблении протея из Кингсбери. Передается клещами (вит?).

 II.Риккетциозы, протекающие по типу лихорадки возвратного тифа.

1) Траншейная (или Волынская — М. Р.) лихорадка, называемая иначе пятидневной. Возбудитель — Rickettsia guintuna. (R. Wolhynica).

2) Болезнь Вейгля — возбудитель R. Weigh (Mosing). Оба заболевания передаются укусами вшей.

III. Трахома — возбудитель Rickettsia trachoniae.

В. Классификация риккетциозов домашних животных.

Из предыдущего изложения видно, что риккетциозы человека могут быть заболеваниями общими (генерализованная инфекция) и поражениями локального характера.

Те же проявления инфекции в виде общего и местного риккетциоза наблюдаются и у животных.

Риккетцич, вызывающие местные поражения, паразитируют в эпителиальных клетках. При генерализованных риккетциозных инфекциях мы видим поражение тех или иных элементов ретикуло-эндотелиальной системы. Риккетции могут паразитировать или в клетках сосудистого эндотелия или вообще в любых эндотелиальных клетках, или же они включены в подвижные элементы этой системы — моноцитах. Таким образом общие риккетциозы можно считать по сути ретикуло-эчдотелиозами.

Донасиен и Лестокард в соответствии с вышеуказанным предлагают такую классификацию риккетциозов:

I. Местные риккетциозы или риккетциозы эпителиальных клеток:

Rickettsia conjunctivae (Ssp. Rickettsia conjunctivae bovis (Возбудитель инфекционного конъюнктивита жвачных)

II.Общие риккетциозы или риккетциозы ретикуло-эндотелиальной системы:

A. Риккетциозы эндотелиальных клеток: Rick, ruminantium, возбудитель генерализованного риккетциоза жвачных — болезни, именуемой — „сердечная вода"; Rick avium — возбудитель общего риккетциоза снегирей.

B. Моноцитарные риккетциозы: Rickettsia canis, Rickettsia ovina, Rickettsia bovis— возбудители моноцитарных (общих) риккетциозов собак, овец и крупного рогатого скота.

II. Активная иммунизация против риккетциозов человека.

Проблема активной иммунизации против сыпного тифт и некоторых других риккетциоов человека является одной из трудных задач современной эпидемиологии. С одной стороны известно, что ва цинация убитыми риккетциямй, даже при наличии значительной концентрации их (риккетций) в в кцине—не дает более или менее выраженного и длительного иммунитета. С другой стороны—вакцинация живым, ситьно разведенным и даже ослабленным вирусом является чрезвычайно опасной во вшивой среде. Отсюда—столь длительные попытки применения всевозможных вакцин в разнообразной эпидемической обстановке. Несмотря на то, что вопрос о создании активного иммунитета при риккетци очных заболеваниях в большинстве стран не вышел еще из рамок узко-лабораторного эксперимента, можно считать, что накопив-, шийся до сего времени экспериментальный материал дает нам определенную ориентировку для дальнейшего более глубокого изучения всей проблемы борьбы с риккетциоз 1-ми.

Характер противориккетциозной вакцины и способ ее применения должны быть изучены в отношении каждого вида риккетций в отдельности. Тип иммунитета при „вшивых" риккетциозах, отличающийся значительной устойчивостью и продолжительностью, не может быть сравниваем с иммунитетом при ..клещевых" риккетциозах. Последние з болевания обычно ведут к установлению „премуниции", но не истинного иммунитета. Отсюла—возможная разница в методике всей работы по изучению вопроса профилактической вакцинации при риккетциозах.

Постараемся вкратце дать очерк основных направлений и методов активной иммунизации, предлагавшихся прежде и предложенных в самое последнее время Мы не будем остан (вливаться на всех этапах разви ия вопроса о в кцинациях при риккетциозах человека. Отметимте и методов, кои завоевали себе наибольшую ц пулярность.

1. Микробные вакцины имеют лишь исторический интерес. Петые суспензии из бакерий Плотца и Рабиновича (Харьков, многочисленные попытки вакцинировать лабораторных грызунов и людей убитыми культурами В. Proteus не дали никаких положительных результатов

2. Кровь больных сыпным тифом, взятая в период лихорадки (инактивированная при б). по Хамди и Сал и ми также оказалась не эффективной в качестве препарата для профилактической вакцинации.

3. Сыво ротка больных сыпным тифо ч. Ш. Николь констатировал, что центрифугированная сыворотка больного, не содержащая форменных, элементов, лишена вирулентности и может вакцинировать животных, Но э ому же методу были вакцинированы сербские солдаты во время империалистической войны; этот же метод применен другими авторами (Ле'айл и Пуарсон в Тунисе, Бланк и Каминопетрос в Греции) дал удовлетворительные результаты. Но этот метод, как упоминает Бланк, в действительности не прост. Если сыворотка не содержит живого вируса, она и не обладает ясными предохранительными свойствами Если же в сыворотке имеется живой вирус—она может дать хороший иммунитет, но введение ее сопряжено с риском инфекции, могущей быть тяжелой.

4. Вакцинация убитым сыпнотифозным вирусом, содержащим риккетции. Методика приготовления этой вакцины сделалась возможной только после опытов Музера (см. выше), указавшего на способ накопления риккетций мексиканского сыпного тифа в организме морских свинок ¹ внутрибрюшинное вв-дение вируса самцам). Морские свинки (вирусники) инфицируются крысиным вир сом (вирус эндемического сыпного тифа) по методу Музера. В рчзгар температурной и тестикулярной реакций вирусники убиваются и от них берут тестикулы и влагалищные оболочки, помещая этот материал в флаконы с 10 см³ физиологического раствора. После встряхивания со стек янными бусами удостоверяются, что в жидкости содержатся в изобилии риккетции. Этот материал впрыскивают в количестве 3—4 см³ белым крысам самцам. Для понижения естественной резистентности крыс к риккетциям, им за 48 часов до введения риккетциозного материала впрыскивают 2 см³ смеси бензола с оливковым маслом или же подвергают их воздействию Х-лучей. Через 4—5 суток с момента заражения крысы убиваются; перитонеальный эксуд т, содержащий значительное количество риккетций, смывается форм .типизованным (0.2^J/o формалина) физиологическим р створом и взбалтывается в флаконе с измельченными тестикулами и влагалищными оболочками этих же животных; вся суспензия остается во флаконах при комнатной температуре в течение 24 часов, после чего фильтруется через стерильную марлю, проверяется на стерильность и разливается по ампулам. От каждой крысы получают приблизительно 10 см³ вакцины. Согласно Цинссеру и

Кастаньеда, их вакцина не иммунизирует против эпидемического сыпного тифа, но морские свинки, предохраненные ею, проявляют oi ределенную устойчивость в отношении мексиканского (эндемического) сыпнотифозного вируса. Ио Коско вакцинация ведется в форме серийных впрыскиваний 1, 2, 4 и 5 см³. Альмацан (1936 предлагает такую методику: 1-е впрыскивание—0,5 см³, через 7 дней —1 см³ и через 14 дней — 1,5 см³. Так как вакцина Цинссера и Кастаньеда сообщает морским свинкам слабый иммунитет против европейского сыпного тифа, то очевидно, она не дает иммунизирующего эффекта у человека. Ввиду этого Цинссер и Макиавелло приготовили вакцину из тканевых культур европейского сыпного тифа. Для предохранения морской свиньи от заражения при контрольном введении сыпнотифозного вируса (мозговая суспензия) необходимо вводить животному трехкратно по 1 см³ вакцины с интервалом в 5 дней, или же однократно2 см³.

5. Вакцины из содержимого кишечника вшей. Вакцина Вейгля. Вейгль использовал предложение да Роша —Лима —применять для приготовления вакцины инфицированных вшей. Но ввиду невозможности вне эпидемического времени получить объект для кормления вшей, Вейгль заражал их при помощи введения (из капиллярной пипетки) в прямую кишку риккетций крысиного тифа (методика клизм). Через 8 дней после такой операции кишечник вшей обогащается риккегциями; вынутый, он тонко растирался в карболизованном физиологическом растворе (о,5% фенола). Вейгль констатировал, что кишечника одной вши, содержащего от 10 до 100 миллионов риккетций, достаточно для того, чтобы предохранить морскую свинку против многих инфекционных доз. Вакцина по Вейглю сохраняет свои иммунизирующие свойства в течение трех лет.

Применение этого метода вакцинации у людей было проведено в форме трехкратных инъекций с интервалом’ от 3 до 6 дней. Первая вакцина представляла собой содержимое кишечника 25 вшей, что соответствовало приблизительно 1250000000 риккетций; вторая вакцина 50 вшей—250OOOOOOO риккетций; третья вакцина —1С0 вшей—500000000 риккетций.

Вейгль с успехом вакцинировал этой вакциной своих сотрудников. По методу Вейгля Ходзко провел в 1931—32 гг вакцинацию 2794 человек. Инъекция переносилась хорошо. Реакция была подобно той, которую наблюдают при введении бактерийных вакцин. Вывод относительно действия этой вакцины в общем благоприятен. В бельгийских миссионерских поселениях, в Китае (цит. по Бланку) в течение двух лет не было констатировано ни одного случая сыпного тифа среди вакцинированных людей; в то же время среди не подвергшихся вакцинации тиф производил опустошения.

Чрезвычайно интересные экспериментальные данные о применении Вейглевской вакцины у детей сообщают Николль и Спарроу. Они иммунизировали двух детей большими дозами вакцины, причем один ребенок получил суспензию кишечника 225 вшей, другой—375 вшей Первый ребенок 3-летний, через месяц после вакцинации был заражен суспензией головного мозга инфицированной морской свинки. Ребенок не реагировал. В то же время контрольная морская свинка, зараженная вместе с ребенком одним и тем же материалом, проделала характерный сыпной тиф. Другой ребенок, 6 лет, зараженный через месяц после окончания вакцинации введением мозга инфицированной морской свинки, также не реагировал. Вейгль сообщает о 3 вакцинированных женщинах из его лаборатории, не показавших заражения после укусов инфицированных вшей. По поводу опытов Николля и Спарроу Бланк указывает, что они проведены на тунисских детях, мало чувствительных к сыпнотифозному вирусу.

Видоизменением методики Вейгля нужно считать прием Хржановского и Моссинга (1933), приготовивших вакцину из испражнений сыпнотифозных вшей, растертых в карболизованном физиологическом растворе фенола). Как и вакцина Вейгля, вакцина указанных авторов сообщала морским свинкам выр женный иммунитет против экспериментальной инфекции. Авторы предлагают применять смесь их вакцины с вакциной Вейгля в отношении 1 : 1,5. Это предложение, принимая во внимание богатство кала вшей риккетциями, нужно считать заслуживающим внимания.

В 1933 г. Цехновицер и Палант опубликовали свои опыты по иммунизации морских свинок фенолизированным и формалинизированным мозгами сыпнотифозных морских свинок. Вакцина вводилась повторно (4 раза с пятидневными интервалами) в минимальных дозах: 0,0Л—0,005 см³ карболизованной и 0,001—0,С05 см³ разведенной во 100 раз 1О% формалинизированной эмульсии головного мозга морской свинки. При таком способе вакцинации морские свинки не показали температурной реакции ни на одну из вакцин. При испытании иммунитета, месяц спустя, у 5 из серии свинок, получивших прививку карболовой вакциной полный иммунитет, у 2—нетипичная лихорадка, у одной —сыпной тиф. При контрольном (через месяц) заражении морских свинок, иммунизированных формалинизованным вирусом (2,5 см³ эмульсии мозга из органов),—одна свинка дала небольшой подъем температуры, у второй констатирован типичный экспериментальный сыпной тиф, а остальные—совершенно не реагировали на заражение.

Эти исследования Цехновицера и Паланта обратили на себя внимание, так как метод изготовления и применения такой невровакцины открывает интересные перспективы.

Подобно тому, как Цинссеру и Кастаньеда удалось культивировать вирус мексиканского сыпного тифа в тканевых культурах и приготовить из них формолвакциму Клиглер и Ашнер с успехом культивировали вирус европейского (эпидемического) сыпного тифа на средах, содержащих tunica vaginalis тести кул морских свинок. На этой среде констатировано усиленное размножение риккетций. Культуры хорошо перевивались. 11-суточная культура второй генерации послужила авторам материалом для изготовления вакцин. Культура центрифугировалась и, после удаления жидкости, растиралась в ступке, затем прибавлялось О,1о/₀ формалина, и вакцина сохранялась в леднике. Морские свинки иммунизировались трехкратно, по 1,5 см³ вакцины; температурной реакции не было совершенно или же она была стертой. Через 10 дней часть свинок была испробована введением 80 инфекционных доз вируса, а через 16 дней остальные свинки получили 800 инфекционных доз этого же вируса. Вакцинированные животные показали значительный иммунитет, контрольные—все проделали типичную картину сыпного тифа. Подобные же опыты и с такими же благоприятными результатами были проведены со старыми тканевыми культурами сыпнотифозных риккетций—возраста Зэ—55 дней (4—6 генерации). На основании своих исследов ний Клиглер и Ашнер считают, ч$о тканевые культуры риккетций эпидемического сыпного тифа, превращенные в вакцину прибавлением 0,1 а/₀ формалина, дают такой же эффект, как и фрмалинизованная суспензия риккетций из кишечника инфицированных ими вшей (метод Вейгля).

6. Вакцинация живым риккетциозным вирусом. По поводу противосыпнотифозной вакцины Вейгля Николль говорит, что защитные свойства ее недос£ таточны и длительного иммунитета она создать не в состоянии. То же, конечно, необходимо сказать и относительно мозговых эмульсий, обработанных формалином. Цинссер и Кастаньеда считают, что для эффективности вакцинации необходимо делать, по м?ньшей мере, два, но лучше три впрыскивания вакцины, чтобы сообщить морской свинке иммунитет длительностью в несколько недель.

Принимая во внимание вышесказанное, Бланк дает отрицательную оценку вакцинам, приготовленным из убитых риккетций, и считает, что только внесением в организм живого вируса можно создать нужный иммунитет. Таким образом ряд авторов, в том числе Николь и Спарроу и Бланк, приходят к выводу, что иммунитет против сыпного тифа должен базироваться на создании искусственной премуниции.

Первые опыты в этом отношении прин длежат Николю с сотру никами (Николь, Консей, Спарроу). Эти авторы применили метод многократного впрыскивания лю 1ям живого, сильно разбавленного вируса. После того, как в 1921 г. Вейль. Брейкль, Хрушка установили, что мозг инфицированной морской свинки на высоте приступа содержит постоянные количества вируса, Николь с сотрудниками также нашли самым удобным применять для прививок эмульсию головного мозга. Первые опыты были прсведены на 3 добровольцах, получивших в течение 3¹/₂ месяцев 14 инъекций малых доз живого вируса Эти опыты были благоприятны: один из вакцинированных проделал сравнительно короткую термическую реакцию, два других—показали стойкий иммунитет.

Но первые благоприятные опыты не были в дальнейшем подтверждены. Николь вакцинировал 10 тунисских детей в возрасте от 4 до 10 лет, т. е в наименее чувствительный период. Дети получили 1/5000 мозга инфицированной сыпным тифом морской свинки и после 19-дневной инкуб щии6 из нгх заболело Эти опыты Николя показывают, что вакцинация живым сыпнотифозным вирусом опасна.

Вакцина Ж. Бланка. 'Исходя из того п сложения, что люди, перенесшие эндемический сыпной тиф (крысиный вирус), приобретают иммунитет и против европейского (эпидемического) сыппого тиф, Бланк приготовил вакцину, обработав только мозг морской свинки, инфицированной крысиным вирусом.

Техника приготовления и употребления вакцины Ж. Бланка. Морская свинка (самец), инфицированная крысиным тифом, убивается на высоте лихорадки в тот момент, когда у нее наиболее выражены явения периорхита. Влагалищные оболочки, селезенка и надпочечники, растертые в тонкую массу, оэзводя1ся в 2 литрах физиологического раствора и фильтруются через двойной слой стерильной марти. Это вирулентное разведение 1 :2000 служит для приготовления вакцины. Для .этого в момент употребления к 95 см³ вирулнтного разведения прибавляют 5 см° стерилизованной желчи крупного рогатого скота и оставляют смесь вконтакте в течение 15 минут. После этого впрыскивают вакцинируемым: взрослым 1 см³, детям 8—15 лет—0,5 СхМ³, детям от 1 до 8 лет—0,25 см⁸ (под кожу, в область дельтовидной мышцы). Таким образом одна морская свинка дает 2000 доз вакцины для взрослого человека.

Введение вакцины Ж, Бланка, по его наблюдениям, не сопровождается никакой реакцией со стороны организма и сообщает вакцинированным людям прочный иммунитет в отношении сыпного тифа. В течение 1935—36 гг. Ж. Бланком с сотрудниками было вакцинировано в Африке (Марпоко) 27929 человек желчной вакциной, причем вакцинация проводилась в эпидемических очагах среди туземного населения и без проведения каких бы то ни было санитарно-профилактических мероприятий. Эпидемии сыпного тифа после таких прививок быстро прекращались. Очевидно, что метод Бланка будет иметь большое значение в борьбе с сыпным тифом в эпидемических очагах, где предполагается уже значительное перезаражение и наличие ипапаррантных инфекций, т е. вирусоносительство. Но этот метод непригоден для применения при иной ситуации, так как он может создать массовое вирусоносительство.

Вакцины Ш. Николя и Легрэ. Ш. Николь и Легрэ недавно предложили новый способ приготовления вакцины против риккетциозов человека, в частности сыпного тифа. Они высушивают крысиный вирус и смешивают его с высушенным же яичным желтком; после этого смесь вируса с желтком заключается в оливковое масло (метод создания антигенного депо) Так как вирус плохо переносит высыхание, то вакцину, очевидно, пришлось бы, в случае надобности, готовить ex tempore. Ж. Бланк сомневается в том, чтобы масляная вакцина Николь и Легрэ могла быть использована на больших людских коллективах (военные эпидемии и проч.).

Румынская вакцина. В самое последнее время Комбиеско приготовил вакцину, включая эпидемический вирус сыпного тифа (мозг, надпочечники и селезенка инфицированной морской свинки) в ланолин, а затем в оливковое масло. Свинки и люди, привитые такой вакциной, не реагировали. По этому поводу Бальтеану и Констан7инеско говорят, что масло, в большинстве случаев, разрушает вирус и поэтому вакцина не дает реакции. Но в тех случаях, когда вирус не был убит, прививка масляной вакцины вызывает у животных и человека абортивный тиф. Очевидно, эта вакцина не дает никаких преимуществ перед употреблением вакцины, приготовленной из крысиного (эндемического) вируса, и в ряде случаев может быть опасной.

Приводя здесь материалы, касающиеся воспроизведения активного иммунитета против риккетциозов человека, мы имели в виду отметить тяжелый путь, пройденный экспериментаторами, работавшими в области проблемы иммунитета при риккетциозах. Лицам, которые в ближайшем будущем приступят к опытам практического осуществления иммунитета к риккетциозным заболеваниям, работа будет в значительной мере облегчена.