Autoantibodies to activated blood coagulation factors in patients with ischemic heart disease

Full Text

В настоящий момент не вызывает сомнения факт наличия антител к факторам свёртывания крови как в норме, так и при патологии [6]. Есть сведения об участии этих молекул в регуляции системы гемостаза, однако отсутствуют чёткие клиникопатофизиологические данные, характеризующие эти взаимодействия [1]. Существуют немногочисленные работы, посвящённые вопросам выяснения роли аутоантител (аАт) при первичных геморрагических расстройствах, системных аутоиммунных заболеваниях, патологических состояниях, связанных с приёмом некоторых лекарственных препаратов [5]. Несмотря на выраженные гиперкоагуляционные сдвиги, сопровождающие ишемическую болезнь сердца (ИБС), сведения о динамике аАт к факторам свёртывания крови при этом заболевании практически отсутствуют в литературе. Исходя из концепции иммунной регуляции системы гемостаза [3], актуальным представляется изучение роли аАт к факторам свёртывания крови при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, так как некроз миокарда и эндотелия при ИБС приводит к чрезмерному образованию тканевого фактора и появлению активированных факторов свёртывания крови. На активность последних могут влиять соответствующие натуральные аАт. Целью исследования стало изучение содержания аАт к активированным факторам свёртывания крови у больных ИБС. Для определения содержания аАт к тромбину (IIa), факторам VIIa и IXa была исследована сыворотка крови 31 больного ИБС, находившегося на лечении в кардиологическом отделении и блоке интенсивной терапии. Средний возраст пациентов составил 57,6±7,8 лет, соотношение мужчин и женщин 4:1. Больные были разделены на три группы: первая - больные инфарктом миокарда в острую стадию (9 человек); вторая - пациенты с инфарктом миокарда в подострую стадию (9 человек), третья - со стабильной стенокардией II функционального класса (13 человек). Группу контроля составили 18 практически здоровых человек, сопоставимых по полу и возрасту. В исследование не включали больных с тяжёлой сопутствующей/фоновой патологией: заболеваниями крови, эндокринной системы, алкоголизмом, злокачественными новообразованиями, воспалительными заболеваниями. Кровь забирали в стерильные вакуумные пробирки с натрия цитратом, центрифугировали при 3000 об/мин. Определение аАт к факторам свёртывания крови проводили по оригинальной методике Цыбикова Н.Н. с соавт. [4]. Лунки интактных полистироловых планшетов сенсибилизировали активированными факторами свёртывания крови по общепринятой технологии. Свободные реактивно-способные участки полистирола блокировали забуференным раствором глицина с водородным показателем (pH) 7,4. Цитратную плазму разводили 1:100 изотоническим забуференным раствором натрия хлорида и инкубировали в лунках в течение 3 ч при комнатной температуре. Выявляли аАт [иммуноглобулины (Ig) классов М и G] с помощью моноклональных антител, меченных пероксидазой хрена, обычным способом (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск). Результаты выражали в единицах оптической плотности (∆OD для длины волны 450 нм). Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью пакета статистических программ «Statistica 6.1». Применяли методы непараметрической статистики. Для оценки достоверности сравниваемых групп использовали U-критерий Манна-Уитни. Статистически значимыми считали различия при р <0,05. В острую стадию инфаркта миокарда по сравнению с контролем выявлено статистически значимое снижение количества аАт класса IgM к факторам VIIa и IXa (табл. 1). Такая же закономерность обнаружена в отношении аАт класса IgG к факторам VIIa (р=0,006) и IXa (р=0,023). При сравнении групп с острой стадией инфаркта миокарда и со стабильной стенокардией выявлена следующая закономерность: большинство показателей (аАт класса IgM к IIa, VIIa, IXa и аАт класса IgG к VIIa, IXa) в первой группе имели более высокие значения, чем в третьей, но достоверная разница отмечена только по содержанию IgG к фактору IXa. Несмотря на отсутствие статистической значимости, уровни аАт к факторам свёртывания крови в группе со стабильной стенокардией принимали промежуточные значения между группами с острой стадией инфаркта миокарда и контролем. Для подострой стадии инфаркта миокарда по сравнению с контролем было характерно более низкое содержание аАт класса IgM к факторам IIa, VIIa и IXa с параллельным увеличением аАт класса IgG к факторам свёртывания крови IIa и IXa. Вместе с тем, такая тенденция отсутствовала для фактора VIIa. В подострую стадию инфаркта миокарда по сравнению с контрольной группой наблюдали снижение количества аАт как класса IgM, так и IgG. Однако описанные изменения не носили статистически значимого характера. Ранее было показано, что при синдроме диссеминированного внутрисосудистого свёртывания в первые дни заболевания содержание аАт к IIa и Xa резко падает, а по мере выздоровления повышается и превосходит исходный уровень [3]. Можно предположить, что существовавшее нормальное количество аАт к активированным факторам свёртывания крови в острую стадию инфаркта миокарда истощается вследствие потребления их в реакциях антиген-антитело. Таким образом, по механизму отрицательной обратной связи блокируется чрезмерная внутрисосудистая гиперкоагуляция. Снижение уровня аАт к активированным факторам свёртывания крови в острую стадию инфаркта миокарда может быть обусловлено несколькими механизмами [2, 3]: (1) образованием иммунных комплексов (активированный фактор свёртывания + аАт); (2) появлением/увеличением титра антиидиотипических антител, в том числе с энзиматическими свойствами (абзимы), которые или связывают, или ферментативно разрушают аАт, направленные против факторов коагуляции. Вне зависимости от механизмов, подавление ферментативной способности активированных факторов свёртывания соответствующими аАт предположительно имеет физиологическую целесообразность, так как предотвращает чрезмерную гиперкоагуляцию, тем самым происходит разрыв порочного круга (ишемия → эндотелиальная дисфункция → экспрессия тканевого фактора → гиперкоагуляция → тромбоз → ишемия). С другой стороны, иммунные комплексы способны вызывать повреждение эндотелия и по механизму гиперчувствительности III типа инициировать тромбообразование, что может стать патофизиологической основой рецидивирующих инфарктов миокарда. ВЫВОДЫ 1. Выявлено снижение количества аАт класса IgM к факторам VIIa и IXa, а также IgG к VIIa и IXa в острую фазу инфаркта миокарда по сравнению с контролем. 2. Показано, что происходит снижение уровня IgG к фактору IXa в острую стадию инфаркта миокарда по сравнению с подострой стадией, а также стабильной стенокардией. 3. Такое снижение, вероятнее всего, обусловлено потреблением аАт при их связывании с избыточно образуемыми активированными факторами коагуляции. Содержание аутоантител к факторам свёртывания крови у пациентов с ишемической болезнью сердца Аутоантитела к факторам свёртывания Первая группа: ИМ, острая стадия (n=9) Вторая группа: ИМ, подострая стадия (n=9) Третья группа: стабильная стенокардия (n=13) Контрольная группа (n=18) Уровень значимости IgM к IIa 0,01 (0,006-0,016) 0,014 (0,007-0,023) 0,018 (0,010-0,020) 0,022 (0,010-0,048) IgG к IIa 0,021 (0,006-0,039) 0,026 (0,013-0,033) 0,005 (0,001-0,020) 0,018 (0,009-0,023) IgM к VIIa 0 (0-0,003) 0,004 (0,003-0,006) 0,003 (0-0,006) 0,006 (0,003-0,011) рк-1=0,015 IgG к VIIa 0,006 (0,001-0,009) 0,014 (0,007-0,022) 0,014 (0,009-0,018) 0,022 (0,016-0,027) рк-1=0,006 IgM к IXa 0,004 (0,002-0,008) 0,008 (0,004-0,011) 0,005 (0,003-0,015) 0,011 (0,006-0,016) рк-1=0,035 IgG к IXa 0,007 (0,003-0,011) 0,02 (0,013-0,022) 0,014 (0,012-0,018) 0,015 (0,012-0,023) рк-1=0,023; р1-2=0,046; р1-3=0,049 Примечание: ИМ - инфаркт миокарда; Ig - иммуноглобулин; рк-1 - уровень значимости при сравнении контрольной и первой групп; р1-2 - при сравнении первой и второй групп; р1-3 - при сравнении первой и третьей групп.

About the authors

Yu F Gatiyatov

Chita State Medical Academy, Chita, Russia

Email: yu.f.g@mail.ru

N N Tsybikov

Chita State Medical Academy, Chita, Russia

P P Tereshkov

Chita State Medical Academy, Chita, Russia

References

Supplementary files