Model of specific diagnostics of ovarian cancer stages

Full Text

Рак яичников (РЯ) - наиболее агрессивная опухоль женских гениталий. Согласно данным исследования Eurocare-3, 5-летняя выживаемость не превышает 29-30%. По данным А. Jemal и соавт. (2007), эта цифра, несмотря на успехи хирургии и химиотерапии, остановилась на уровне 45% [9]. Ежегодно в России регистрируют 11,7 тыс. злокачественных новообразований яичников и 7,3 тыс. летальных исходов в связи с данной нозологией [2]. Распределение больных по стадиям опухолевого процесса, согласно данным популяционного ракового регистра НИИ онкологии им. проф. Н.Н. Петрова: I стадия - 19%, II - 11,1%, III - 32,5%, IV - 23,6%, стадия не указана - 13,8% [5]. Распределение по стадиям по данным ракового регистра Ульяновского областного клинического онкологического диспансера за период 1999-2005 гг. выглядит следующим образом: I стадия - 6,3%, II - 1,6%, III - 33,5%, IV - 58,6%. Низкая выживаемость при РЯ - следствие поздней диагностики, на сегодня в 70% случаев диагностируют распространённую стадию заболевания [7, 8, 10]. Целью исследования была разработка модели уточняющей диагностики прогрессирующих форм РЯ. Были обследованы 404 больных первичным РЯ, находящихся на I-IV клинической стадии заболевания по классификации Международной федерации гинекологии и акушерства (FIGO - International Federation of Gynecology and Obstetrics). Всем больным проведено комплексное обследование, включающее ультразвуковое исследование гениталий, рентгенологическое исследование лёгких с целью выявления отдалённых метастазов, цитологическое, гистологическое и иммуногистохимическое исследование опухоли. Биохимически в опухолевой ткани и плазме крови определяли активность компонентов системы «перекисное окисление липидов - антиоксиданты»: содержание малонового диальдегида (МДА), активность каталазы, супероксиддисмутазы и глутатионредуктазы [3]. Цитохимически в нейтрофилах периферической крови определяли количество катионных белков, активность миелопероксидазы [3]. Результаты выражали в виде среднего цитохимического коэффициента. Также определяли фагоцитарное число и фагоцитарный индекс [6]. Полученные результаты обработаны при помощи компьютерных программ Microsoft Excel и «Statistica 6.0». Бóльшая часть больных относилась к возрастной группе 50-59 лет. В группах младше 30 лет и старше 70 лет было соответственно 3 и 4 пациентки. Овариально-менструальная функция была сохранена у 122 пациенток, в менопаузе находились 282 женщины. Характер сопутствующей генитальной и экстрагенитальной патологии у больных РЯ не различался на различных стадиях заболевания. Важную роль в развитии онкогенной трансформации клеток и опухолевого прогрессирования отводят сегодня свободным радикалам. При этом значима активация под влиянием активных форм кислорода процессов липопероксидации, становящейся источником образования значительного количества вторичных эндогенных свободных радикалов. Антиоксидантные ферменты, контролируя концентрацию радикалов, могут выступать в качестве регуляторов пролиферации [4]. В результате проведённых нами исследований установлено статистически значимое повышение содержания продуктов перекисного окисления липидов в опухолевых клетках, нарастающее с I по III клиническую стадию заболевания, по сравнению с нормой (р <0,05) и предыдущей стадией заболевания (р1 <0,05) (рис. 1). Динамика активности антиоксидантных ферментов в опухолевой ткани представлена на рис. 1 и 2. Считают установленным, что у больных РЯ развивается значительная иммуносупрессия, затрагивающая в основном Т-, NK-клеточное и фагоцитарное звенья иммунитета [1]. Однако не существует единой точки зрения в отношении динамики показателей специфической и неспецифической защиты организма при прогрессировании заболевания. В результате проведённых исследований мы установили, что общее количество лейкоцитов периферической крови статистически значимо снижается на I-III клинических стадиях заболевания [на I стадии - (6,0±0,07)×109/л, на II - (6,05±0,07)×109/л, на III - (6,2±0,04)×109/л против (6,9±0,03)×109/л в норме, р <0,01] и возрастает на IV стадии до (7,1±0,06)×109/л (р <0,05). Однако цитотоксичность нейтрофилов, как кислород-зависимая, так и кислород-независимая, снижается (рис. 3), что на фоне возрастания фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа может свидетельствовать о снижении способности нейтрофилов периферической крови к завершённому фагоцитозу (табл. 1). Также установлен ряд показателей плазмы крови, резко и статистически значимо изменяющихся при переходе от III к IV стадии РЯ, которые могут быть использованы для дифференциальной диагностики. У больных с I клинической стадией РЯ содержание МДА, активность каталазы и глутатионредуктазы статистически достоверно не отличались от показателей доноров (р >0,05). У больных на II стадии отмечено увеличение количества МДА в плазме (8,3±1,02 против 6,9±0,73 мкмоль/л в норме, р <0,05). Активность каталазы также повышалась (0,21±0,039 ммоль/с•л против 0,03±0,003 ммоль/с•л у здоровых женщин, р <0,05). На III клинической стадии заболевания происходило статистически значимое увеличение концентрации МДА по сравнению с донорами (9,94±1,120 мкмоль/л против 6,9±0,73 мкмоль/л в норме, р <0,05). На основании полученных результатов предлагаем алгоритм дополнительных лабораторных исследований для уточнения стадий РЯ по FIGO (рис. 4), а также формулу расчёта дифференцировочного коэффициента. При одновременном определении вышеуказанных лабораторных показателей представляется возможным применение специально разработанной формулы, полученной методом аппроксимации нелинейных функций, для ориентировочной оценки стадии заболевания по FIGO. Дифференцировочный коэффициент: где i - число повторов теста (I ≥1); С1-3 показатели маркёров у больного (содержание катионных белков, активность миелопероксидазы и фагоцитарное число в нейтрофилах периферической крови - при уточнении I-II и III стадий; содержание МДА, активность глутатионредуктазы и каталазы плазмы крови - при уточнении III и IV стадий); СN1-3 - показатели соответствующих маркёров у здоровых. На основании предложенного алгоритма дополнительного обследования было проведено уточнение стадии РЯ у 31 больной, впервые лечившейся в период с января по август 2008 г. в Ульяновском областном клиническом онкологическом диспансере. У 12 из них стадия злокачественного процесса была изменена, в том числе с I на III - у 3 больных, с III на IV - у 9 больных. ВЫВОДЫ 1. Не выявлено статистически значимых различий между клиническими, биохимическими и гематологическими показателями крови больных раком яичников на различных клинических стадиях заболевания. 2. Определение в плазме крови содержания малонового диальдегида, активности каталазы и глутатионредуктазы позволяет рассчитать коэффициент для дифференцирования III и IV стадий рака яичников по FIGO. 3. Определение в нейтрофилах содержания катионных белков, активности миелопероксидазы и фагоцитарного числа позволяет рассчитать коэффициент для дифференцирования II и III стадий рака яичников по FIGO. Работа поддержана грантами ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России на 2009-2013 гг.» и гос. задания МИНОБРНАУКИ РФ. Рис. 1. Содержание малонового диальдегида (МДА) и активность глутатионредуктазы (ГР) в ткани первичного опухолевого узла у больных раком яичников на различных клинических стадиях. АНТОНЕЕВА.tif Таблица 1 Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови больных раком яичников Показатели фагоцитоза Фагоцитарный индекс, % Фагоцитарное число, у.е. Доноры 74,5±1,08 1,70±0,02 I стадия 75,7±1,30 2,2±0,01* II стадия 76,9±1,72 2,07±0,03* III стадия 75,9±1,63 1,9±0,03* IV стадия 73,9±2,40 1,9±0,06* Примечание: *данные статистически значимо отличаются от показателей у доноров. Рис. 2. Активность каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) в ткани первичного опухолевого узла при прогрессировании рака яичников. АНТОНЕЕВА_2.tif АНТОНЕЕВА_1.tif Рис. 3. Активность миелопероксидазы и содержание катионных белков нейтрофилов периферической крови больных раком яичников на различных клинических стадиях заболевания. СЦК - средний цитохимический коэффициент. ан1-7.tif Рис. 4. Алгоритм дополнительных лабораторных исследований для уточнения стадий рака яичников по FIGO. МДА - малоновый диальдегид; ГР - глутатионредуктаза; ДК - дифференцировочный коэффициент; Нф - нейтрофилы; КБ - катионные белки; МПО - миелопероксидаза; ФЧ - фагоцитарное число.

About the authors

I I Antoneeva

Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia

T V Abakumova

Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia

T P Gening

Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia

Email: Naum-53@yandex.ru

S O Gening

Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia

S S Pirmamedova

Ulyanovsk State University, Ulyanovsk, Russia

References

Supplementary files