Dynamic assessment of the enzyme immunoassay composition of the oral fluid in children with physiological occlusion and anomalies of the dentition

Full Text

Актуальность

Иммунная система слизистой оболочки служит одним из наиболее важных факторов защитной реакции полости рта. Иммуноглобулины представляют собой специфические факторы местного иммунного ответа, главный представитель которых в ротовой жидкости — секреторный иммуноглобулин A (sIgА), другие классы общих иммуноглобулинов G, А, M (IgG, IgА, IgM) встречаются значительно реже.

Период сменного прикуса — этап активной перестройки функциональных параметров челюстно-лицевой области, которые могут отражаться на изменении иммунной системы слизистой оболочки полости рта, однако подобных динамических исследований на настоящий момент недостаточно [1].

Особый интерес представляет изменение содержания иммуноглобулинов ротовой жидкости у детей с аномалиями зубочелюстной системы в период ортодонтической коррекции. Она в большинстве случаев представляет собой применение съёмной и несъёмной аппаратуры для устранения возникших окклюзионных нарушений. Ортодонтическая конструкция воспринимаемся иммунной системой полости рта как инородный объект, что приводит к изменению иммуноферментного состава ротовой жидкости [2, 3]. Понимание динамики изменения иммуноферментного состава ротовой жидкости на различных этапах лечения позволит врачу грамотно выстроить план лечения, спрогнозировать его сроки, своевременно предупредить развитие осложнений. Однако подобных исследований на настоящий момент крайне мало [4, 5].

Цель

Цель исследования — динамическая оценка иммуноферментного состава ротовой жидкости у детей с физиологической окклюзией и аномалиями зубочелюстной системы.

Материал и методы исследования

Группы исследования составили 125 пациентов детской клинической стоматологической поликлиники №2 г. Воронежа в возрасте 6–12 лет с аномалиями зубочелюстной системы, получающих лечение пластиночным (первая группа) и капповым (вторая группа) ортодонтическими аппаратами. Контрольную группу составили 42 ребёнка с физиологической окклюзией зубных рядов. Проведено когортное продольное проспективное исследование в 2018–2020 гг. Программа исследований одобрена этическим комитетом Воронежского государственного медицинского университета им. Н.Н. Бурденко (протокол №2 от 30 октября 2018 г.).

На подготовительном этапе пациенты и их родители были ознакомлены с целью и детальным описанием процедуры исследования. Динамическое наблюдение пациентов проводили каждые 3 мес: до начала лечения, через 3 и через 6 мес. На всех этапах у пациентов натощак в утренние часы осуществляли сбор ротовой жидкости в одноразовые пробирки. Количественное определение IgG, IgА, IgM и sIgА ротовой жидкости выполняли методом «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа на анализаторе Multiskan Go (Thermo Fisher Scientific, Финляндия).

Статистический анализ осуществлён с использованием программ IBM SPSS Statistics 20, StatTech v. 1.2.0 (разработчик ООО «Статтех», Россия). Количественные показатели оценивали на предмет соответствия нормальному распределению с помощью критерия Шапиро–Уилка (при числе исследуемых менее 50) или критерия Колмогорова–Смирнова (при числе исследуемых более 50). Необходимое количество исследуемых было определено по формуле Лера для относительных величин (при заданной мощности исследования 80%). В случае отсутствия нормального распределения количественные данные описывали с помощью медианы (Me) и нижнего и верхнего квартилей (Q1–Q3). Сравнение трёх и более групп по количественному показателю, распределение которого отличалось от нормального, выполняли с помощью критерия Краскела–Уоллиса, апостериорные сравнения — с помощью критерия Данна с поправкой Холма. При сравнении трёх и более зависимых совокупностей, распределение которых отличалось от нормального, использовали непараметрический критерий Фридмана с апостериорными сравнениями с помощью критерия Уилкоксона с поправкой Холма.

Результаты и обсуждение

Был проведён анализ динамики изменения концентрации sIgА, IgА, IgM, IgG в ротовой жидкости у детей с аномалиями зубочелюстной системы и с физиологической окклюзией в период сменного прикуса (табл. 1).

 

Таблица 1. Анализ динамики изменения концентрации sIgА, IgА, IgM, IgG в ротовой жидкости у детей с аномалиями зубочелюстной системы и с физиологической окклюзией (Me, Q1–Q3)

Параметр	Группа	Этапы наблюдения
		До лечения	Через 3 мес	Через 6 мес
sIgА, мкг/мл	Контрольная	14,3 [13, 1–26, 6]	11,4 [10, 2–16]	10,2 [10–24]*#
	Первая	15,7 [13, 6–22, 2]	25,3 [21, 6–26, 5]*^	18,5 [12, 2–18, 9]#^
	Вторая	19,7 [18, 1–27, 8]	71,8 [70, 3–72, 8]*^&	33,9 [32, 8–37, 1]*#&
IgА, мкг/мл	Контрольная	65,7 [60–144, 9]	73,4 [97–245, 6]	76 [65–78]
	Первая	64,8 [63, 6–104, 7]	151 [65, 4–161]*^	70,8 [70, 6–70, 9]#^
	Вторая	69,3 [62, 1–99, 1]	298,5 [293, 3–299, 8]*^&	117,3 [111, 1–127, 2]*#^&
IgM, мкг/мл	Контрольная	12,9 [7, 9–35, 9]	10,4 [8, 6–19, 2]	18,3 [15–20]
	Первая	10,7 [7, 3–14, 1]	13,8 [9, 6–18, 1]*^	29,3 [28, 1–31, 4]*#^
	Вторая	9,9 [9, 1–12, 9]	21,5 [20, 3–22, 6]*&	14,4 [11, 4–15, 9]*#^&
IgG, мкг/мл	Контрольная	10,1 [9–16, 8]	13 [11, 3–16, 4]	11,1 [10, 1–19, 3]
	Первая	13,4 [12, 5–24, 9]	13,5 [11, 7–16, 8]^	12,1 [9, 1–17, 2]^
	Вторая	13,5 [12, 6–13, 9]	31,7 [29, 2–34, 5]*^&	43,1 [31, 6–44, 8]*#&

Примечание: *р<0,05 — по сравнению с показателями до лечения; #р<0,05 — по сравнению с показателями через 3 мес; ^р<0,05 — по сравнению с показателями контрольной группы; &р<0,05 — по сравнению с показателями первой группы; Ig — иммуноглобулин; sIg — секреторный Ig.

 

Проведённый анализ показал, что при оценке динамики изменения концентрации sIgА среди пациентов с аномалиями зубочелюстной системы через 3 мес обнаружено статистически значимое увеличение содержания sIgА у пациентов первой и второй групп (p=0,023 и p=0,008 соответственно) с развитием через 6 мес компенсаторной реакции и статистически значимое (p=0,009 и p=0,011) снижение концентрации sIgА в обеих группах.

Такая динамика может быть связана с основными функциями sIgА: при ухудшении гигиенического состояния полости рта происходят его внедрение в зубную бляшку и пелликулу, уменьшение фиксации микроорганизмов и ускорение их фагоцитоза нейтрофилами [6–8]. Вследствие применения ортодонтических конструкций ухудшается гигиеническое состояние полости рта, и активируется местная иммунная реакция ротовой полости. Для развития адаптационных механизмов и гигиенических навыков ухода за полостью рта в новых условиях необходимо время. Их формирование происходит через 6 мес лечения.

У пациентов контрольной группы обнаружено статистически значимое (p=0,017) уменьшение количества sIgА через 6 мес, что может быть связано с усилением воспалительных процессов слизистой оболочки вследствие смены прикуса [9] и требует наблюдения со стороны родителей и врача.

Значение количественного содержания sIgА при изначально сопоставимых показателях через 3 мес у пациентов первой и второй групп достоверно выше (p=0,027; p=0,016), чем у контрольной группы; через 6 мес у пациентов первой группы — достоверно выше (p=0,006), чем у контрольной группы. Это свидетельствует об ухудшении гигиенического состояния полости рта в период пользования ортодонтическими конструкциями и активации местного иммунитета полости рта.

В результате анализа динамики изменения концентрации IgА среди пациентов с аномалиями зубочелюстной системы через 3 мес обнаружено статистически значимое (p=0,018) увеличение содержания IgА у пациентов первой и второй групп с последующим статистически значимым (p=0,031) снижением через 6 мес.

Согласно литературным данным, IgA поступает в ротовую жидкость из сыворотки крови в результате транссудации через воспалённую или повреждённую слизистую оболочку [10]. Мы предполагаем причину обнаруженной динамики в высокой степени травматизации слизистой оболочки элементами ортодонтических конструкций, которая была частично устранена в результате коррекции протеза на контрольных посещениях стоматолога. Статистически значимое (p=0,019) более высокое содержание IgА через 3 мес у пациентов второй группы по сравнению с первой мы связываем с более высокой защитной реакцией полости рта и особенностями адаптации слизистой оболочки полости рта к капповому аппарату. У пациентов контрольной группы нами не были выявлены статистически значимые изменения (p=0,131) общего IgА, что может быть связано с отсутствием систематического повреждения слизистой оболочки полости рта.

При оценке динамики изменения концентрации IgM среди пациентов с аномалиями зубочелюстной системы через 3 и 6 мес обнаружено статистически значимое (p=0,016; p=0,023) увеличение содержания IgM в ротовой жидкости у пациентов первой группы; достоверное (p=0,031) увеличение через 3 мес, а затем статистически значимое (p=0,036) снижение через 6 мес содержания IgM у пациентов второй группы.

Известно, что IgM в наименьшей степени способны проникать в ротовую жидкость, но могут попадать в полость рта с током крови [10]. Обнаруженную динамику мы также связываем с фактом травматизации слизистой оболочки полости рта и попаданием IgM в полость рта с током крови. У пациентов контрольной группы не были выявлены статистически значимые изменения (p=0,233) при оценке динамики концентрации общего IgM, что может быть связано с отсутствием систематического повреждения слизистой оболочки полости рта.

При оценке изменения концентрации общего IgG обнаружено статистически значимое (p=0,015) увеличение его содержания в ротовой жидкости у пациентов второй группы. Согласно литературным данным, обнаружение IgG в ротовой жидкости связано с поступлением в полость рта полиморфноядерных лейкоцитов. Их основным источником служит десневая жидкость, и установлено, что их количество резко увеличивается при воспалении пародонта, что характерно для патогенеза пародонтита [11]. Обнаруженная динамика может быть связана с воздействием каппового аппарата и началом развития пародонтопатии, что требует особого внимания со стороны стоматолога. У пациентов контрольной группы при оценке концентрации общего IgM не были выявлены статистически значимые изменения (p=0,122).

Полученные нами данные согласуются с исследованием O.I. Godovantes и соавт., в котором авторы выявили повышение уровня sIgA у пациентов с аномалиями зубочелюстной системы и объяснили это защитно-компенсаторным механизмом специфического иммунного ответа полости рта [12].

Кроме того, наши результаты частично согласуются с исследованием Е.А. Киселёвой, обнаружившей снижение sIgА в нестимулированной смешанной слюне у пациентов с воспалительным процессом пародонта и увеличение содержания общих IgА и IgG, что автор связывает с компенсаторной иммунологической реакцией [13].

Таким образом, необходимость наблюдения за динамикой изменения концентрации sIgА, IgА, IgM и IgG в ротовой жидкости у детей с аномалиями зубочелюстной системы и физиологической окклюзией не вызывает сомнений. Новизной обладает сравнение изменения концентрации иммуноферментного состава ротовой жидкости у детей с аномалиями зубочелюстной во время лечения различными ортодонтическими аппаратами.

Перспективное направление дальнейших исследований — определение иммунологической реакции полости рта на более поздних этапах ортодонтической коррекции, а также на другие виды лечебных конструкций, что позволит врачу грамотно выстроить план лечения и спрогнозировать его срок. Нарушение местного иммунитета полости рта может негативно сказаться на результатах и сроках ортодонтического лечения.

Выводы

1. В результате динамической оценки иммуноферментного состава ротовой жидкости у детей с физиологической окклюзией выявлено уменьшение содержания секреторного иммуноглобулина A.
2. У детей с аномалиями зубочелюстной системы обнаружено изменение содержания секреторного иммуноглобулина A, общих иммуноглобулинов А и M.

 

Участие авторов. И.В.К. — сбор и обработка материалов, написание текста; Е.В.Д. — дизайн исследования, написание текста; Р.В.Л. — анализ полученных данных, написание текста.
Источник финансирования. Исследование выполнено при финансовой поддержке Фонда содействия развитию малых форм предприятий в научно-технической сфере в рамках предоставления гранта на выполнение научно-исследовательских работ программой «УМНИК».
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов по представленной статье.

About the authors

Irina V Kosolapova

Voronezh State Medical University named after N.N. Burdenko

Author for correspondence.
Email: irenecherry@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-9779-7882
SPIN-code: 7244-4620

Assistant, Depart. of normal Physiology

Russian Federation, Voronezh, Russia

Evgenij V Dorohov

Voronezh State Medical University named after N.N. Burdenko

Email: dorofov@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2096-411X
SPIN-code: 7464-1264

Cand.Sci. (Med.), Assoc. Prof., Head, Depart. of Physiology

Russian Federation, Voronezh, Russia

Roman V Lesnikov

Voronezh Children's Clinical Dental Clinic No. 2

Email: sop@vsmaburdenko.ru
ORCID iD: 0000-0002-8296-107X

Cand.Sci. (Med.), Chief Medical Officer

Russian Federation, Voronezh, Russia

References

Supplementary files