Preparation of human immunoglobulin against hemorrhagic fever virus with renal syndrome

I. N. Gavrilovskaya; Гавриловская И. Н.; S. B. Bogdanova; Богданова С. Б.; E. A. Gorbachkova; Горбачкова Е. А.; M. P. Chumakov; Чумаков М. П.; N. S. Apekina; Апекина Н. С.; M. B. Linev; Линев М. Б.; Yu. A. Myasnikov; Мясников Ю. А.; I. Z. Mukhutdinov; Мухутдинов И. З.; V. S. Potapov; Потапов В. С.; V. A. Boyko; Бойко В. А.; R. G. Mukhutdinova; Мухутдинова Р. Г.; L. V. Yagnova; Ягнова Л. В.; F. Z. Kamalov; Камалов Ф. З.

doi:10.17816/kazmj96991

Получение препарата человеческого иммуноглобулина против вируса геморрагической лихорадки с почечным синдромом

Авторы: Гавриловская И.Н.¹^,2, Богданова С.Б.¹^,2, Горбачкова Е.А.¹^,2, Чумаков М.П.¹^,2, Апекина Н.С.¹^,2, Линев М.Б.¹^,2, Мясников Ю.А.¹^,2, Мухутдинов И.З.¹^,2, Потапов В.С.¹^,2, Бойко В.А.¹^,2, Мухутдинова Р.Г.¹^,2, Ягнова Л.В.¹^,2, Камалов Ф.З.¹^,2
Учреждения:
1. Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии МЗ РСФСР
2. Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР
Выпуск: Том 69, № 1 (1988)
Страницы: 22-23
Тип: Статьи
Статья получена: 19.01.2022
Статья одобрена: 19.01.2022
Статья опубликована: 15.02.1988
URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/96991
DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj96991
ID: 96991

Цитировать

Полный текст

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом (ГЛПС) является вирусным зоонозным природно-очаговым инфекционным заболеванием человека и особенно широко распространена в лесных зонах Приуралья и Среднего Поволжья. В последние годы разработаны и применены на практике методы индикации инфекции у грызунов — хозяев вируса ГЛПС и серодиагностики ГЛПС у человека.

Ключевые слова

Казанский медицинский архив

Полный текст

Непрямой метод флюоресцирующих антител (МФА) оказался наиболее удобным для определения антител к вирусу ГЛПС в крови больных. С помощью этого метода антитела выявляли начиная со второго дня болезни и до 20 лет после перенесенной инфекции (срок наблюдения). Эти данные послужили предпосылкой для разработки методов получения препаратов иммуноглобулина против ГЛПС из сывороток крови реконвалесцентов. Поиски эффективных препаратов иммуноглобулина весьма актуальны, так как до настоящего времени нет методов специфической профилактики и лечения ГЛПС. Специфический иммуноглобулин может быть использован для профилактики лабораторных случаев заболевания и групповых вспышек, а также как лечебное средство при ГЛПС в первые дни (1—5) от начала клинических проявлений болезни.

Целью данной работы являлось получение препарата человеческого иммуноглобулина против ГЛПС, изучение его некоторых физико-химических свойств и специфической активности.

В работе использовали вирус ГЛПС, штамм «Кровь Б» в титре 10^7,0 ИД₅₀/мл. В качестве антигенов вируса ГЛПС применяли инфицированные клетки Vero Е-6, фиксированные ацетоном на предметных стеклах. Препараты антигенов были приготовлены из нескольких штаммов вируса ГЛПС: штамм «Кровь Б», выделенный из крови больного, 1113 С. g., 1115 С. g. и 1122 С. g., от рыжих полевок Clethrionornys glareolus в Удмуртской АССР, Hantaan 76-118 (HNT) от Apodemus agrarius в Южной Корее, Tchoupitoulas (ТСН) от Rattus norvegicus в США и Prospect Hill (PHV) от Microtus pennsylvanicus в США. Сыворотки реконвалесцентов ГЛПС из европейских очагов СССР (Удмуртия, Татария) и очагов на Дальнем Востоке были использованы в качестве референс- положительных сывороток и как сырье для получения иммуноглобулина. Протективные свойства препарата изучали на лабораторной линии рыжих полевок [1].

Антитела в крови выявляли с помощью непрямого МФА [5], для индикации антигена вируса ГЛПС применяли прямой иммуноферментный метод [6]. Реакцию нейтрализации вируса ГЛПС in vivo проводили по обычной методике [41 путем внутримышечного введения пяти рыжим полевкам 0,3 мл смеси вируса с иммунной сывороткой или иммуноглобулином. На 20-е сутки полевок умерщвляли и исследовали кровь, легкие и селезенку на наличие антигена, а сыворотки крови — на наличие антител. Инфицированными считали тех животных, у которых были обнаружены антиген и/или антитела к вирусу ГЛПС. Для определения протективных свойств препарат иммуноглобулина ГЛПС в разведениях 1 : 10 и 1 : 100 вводили по 0,3 мл внутримышечно восьмидесяти рыжим полевкам спустя 1 ч, 24 ч и 7 сут после инфицирования животных 10, 100, 1000 и 10 000 ИДзо/мл вирусом ГЛПС, штаммом «Кровь Б».

Препараты человеческого иммуноглобулина против ГЛПС были изготовлены на предприятии Казанского НИИЭМ. Сырьем для получения иммуноглобулина служили сыворотки переболевших ГЛПС, проживающих на эндемичной территории Татарской АССР. Для получения двух серий препарата были собраны сыворотки от 146 доноров (138 мужчин и 8 женщин), перенесших ГЛПС, через 1 год (18,4%), 2 (45,2%), 3 (13,0%), 4 (12,3%), 5 лет (8,9%) и более этого срока от начала заболевания (2%). 18 человек были в возрасте 20—24 лет, 25 — 20—29, 53 — 30—40, 37 — 40—50, 13 — 50 лет и старше. Антитела к вирусу ГЛ ПС были выявлены в 100% случаев с диапазоном титров от 1 : 40 до 1 : 2560, среднегеометрический титр log₂ составлял 7,44=0,3.

Иммуноглобулин был очищен и сконцентрирован методом фракционирования этиловым спиртом при низких температурах на основе метода Кона (7 этапов). Титр антител в плазме до фракционирования был равен 1 : 80—1 : 320. На всех этапах фракционирования иммуноглобулина определяли специфическую активность.

Концентрация белка в растворе препарата составляла 10,5±1,0%, содержание иммуноглобулиновой фракции — не менее 97% от общего белка. Титр антител к вирусу ГЛПС в готовых препаратах иммуноглобулина варьировал от 1 : 640 до 1 : 10240. Иммуноглобулин против вируса ГЛПС может быть использован для индикации антигенов вирусов, циркулирующих как в европейских очагах ГЛПС («Кровь Б», 1122 С. g.), так и в других регионах мира (PHV, HNT, ТСН). Специфическая активность иммуноглобулина сохраняется в течение 24 мес (срок наблюдения).

Изучение вируснейтрализующей активности иммуноглобулина показало, что он способен нейтрализовать вирус, циркулирующий в европейских очагах ГЛПС (ИН 2,1).

Титр вируснейтрализующих антител в иммуноглобулине ГЛПС был равен 1:417 (8,7±0,3 log₂), титры сыворотки реконвалесцента из очага ГЛПС на Дальнем Востоке — 1:52 (5,7±0,5 log₂, Р<0,005). Титр иммуноглобулина в реакции нейтрализации с гомологичным вирусом однозначен с титром в МФА (Р>0,5).

Изучение протективного действия иммуноглобулина против вируса ГЛПС показало, что введение его через час после заражения 40 рыжим полевкам защитило 100% животных, через сутки — 50%.

Таким образом, человеческий иммуноглобулин против вируса ГЛПС производства КНИИЭМ способен нейтрализовать более 1000 ИД₅₀/мл вируса ГЛПС циркулирующего в европейских очагах инфекции, оказывать протективное действие и может быть использован в пределах европейского региона для профилактических и лечебных целей.

Список литературы

Повалишина Т. П., Бернштейн А. Д., Рыльцева Е. В. и др.//В кн.: Популяционная структура вида у млекопитающих. — М., 1970.
Ткаченко Е. А., Донец М. А., Дзагурова Т. К. и др.//Вопр. вирусол.— 1981.— № 5.— С. 618—620.
Чумаков М. П., Гавриловская И. Н., Захарова М. А. и др.//Там же.— 1981.— № 6.— С. 757—761.
Шубладзе А. К., Гайдамович С. Я.// В кн.: Краткий курс практической вирусологии.— М., Медгиз, 1954.
Coons A. H.//Fluorescent antibody methods in general cytological methods (Ed. J. E. Danielli).—N. Y., Academic Press, 1958.
Gavrilovskaya I. N., Apekina N. S., Gorbachcova E. A. et al.//Lancet.— 1981 — No. 8228.— P. 1050.

Дополнительные файлы

Доп. файлы

Действие

1. JATS XML

Скачать

Имя пользователя
Пароль
Запомнить меня

Забыли пароль?	Регистрация

Имя пользователя
Пароль
Запомнить меня

Забыли пароль?	Регистрация

Получение препарата человеческого иммуноглобулина против вируса геморрагической лихорадки с почечным синдромом

Полный текст

Аннотация

Ключевые слова

Полный текст

Об авторах

И. Н. Гавриловская

С. Б. Богданова

Е. А. Горбачкова

М. П. Чумаков

Н. С. Апекина

М. Б. Линев

Ю. А. Мясников

И. З. Мухутдинов

В. С. Потапов

В. А. Бойко

Р. Г. Мухутдинова

Л. В. Ягнова

Ф. З. Камалов

Список литературы

Дополнительные файлы

Данный сайт использует cookie-файлы