К методике микрофотографии

Аннотация

В нашей профессии очень часто возникает нужда, в особенности при разработке какой-либо научной темы, или даже просто в практической деятельности, зафиксировать и сохранить интересующую нас микроскопическую картину. Зарисовка препарата не дает точного отображения последней, и в этом отношении микрофотография является незаменимой. Между тем в настоящее время даже в больших медицинских центрах редкое учреждение имеет оборудование для микрофотографии, не говоря уже о провинции, где об этом и не думают, в виду сложности и дороговизны необходимого для данной цели аппарата.

Полный текст

Работая в хирургическом отделении, я нередко имел дело с патологическими препаратами, микроскопическая картина которых представляла настолько значительный интерес, что ее требовалось зафиксировать. И вот, я попытался упростить оборудование и технику для получения микрофотограмм до таких пределов, чтобы ею мог воспользоваться даже врач провинции, не имеющий для этого никаких специальных приспособлений, кроме простого микроскопа и любительского фотографического аппарата.

Оборудование для получения микрофотограмм состоит обычно из 4 главных частей:

1) микрофотоаппарата,

2) специального микроскопа,

3) вольтовой дуги для освещения объекта

4) столика-штатива для закрепления всей системы.

Взамен всего этого я приспособил имеющийся в нашем распоряжении любительский фотографический аппарат в 9X12: сайт, размерами с объективом-апланат, светосилою 1,8 и фокусным расстоянием в 135 милл., простой лабораторный микроскоп системы Leitz’a и сконструированный мною столик-штатив. В качестве источника освещения взамен вольтовой дуги я приспособил рефлектор от эпидиаскопа системы Токмачева, которым пользуются в настоящее время многие культурно-просветительные организации для целей демонстрации картин во время лекций. Рефлектор этой системы имеет особую конструкцию, а именно, поверхность его представляет комбинацию эллипсоида вращение с шаром, благодаря чему maximum лучей, идущих от источника света, собирается в одном фокусе и дает возможность сильно осветить препарат.

Назначение всякого рефлектора, как известно,—увеличить полезное действие источника света. Если освещать предмет без рефлектора, то только самая незначительная часть лучей попадет на предмет, а остальная,, большая останется неиспользованной; рефлектор же Токмачева¹⁾ усиливает освещение в 20 раз по сравнению с лампой без рефлектора,, т. е., если в фокусе его поставить электрическую лампу в 100 свечей, то результат освещения будет равен 100X20=2000 свечам, что вполне заменит вольтову дугу. Второе свойство рефлектора,—собирать лучи- в один точный фокус,—позволяет обходиться без целой системы линз, которые требуются для концентрации света при фотографировании с вольтовой дугой. При неимении этого источника света, требующего электрической энергии, можно пользоваться и простой карбидной горелкой от проэкционного или велосипедного фонаря с простым вогнутым рефлектором, с которыми я получал также хорошие результаты. В общем вся установка будет иметь тот вид как это показано на рис. 1.

Рис.1

Всю установку необходимо утвердить на каком-либо штативе так чтобы оптические оси фотографического аппарата и микроскопа совпадали и в таком положении были прочно фиксированы,—в противни случае фотографировать будет очень трудно. Я предлагаю следующий очень простой, удобный и дешевый штатив (рис. 2):

Рис. 2

Берется продолговатая, квадратной формы доска, на которой вделывается винт от фотографического штатива, или специально заказанный, и на нем укрепляется фотографический аппарат. Для установки микроскопа к доске привинчиваются или прибиваются гвоздями скобки b, соответствующие подставке последнего. Прежде, чем укреплять винт и скобки, предварительно всю систему необходимо, конечно, установить в таком положении, при котором препарат даст изображение на матовом стекле, а это будет тогда, когда центры всех отверстий—объектива фотографического аппарата, окуляра и объектива микроскопа - будут совпадать, т. е. лежать на одной горизонтальной линии. Установить аппараты в таком положении можно при помощи нитки, которую протягивают через отверстия револьвера микроскопа, окуляра и объектива аппарата, затем фиксируют и устанавливают все части так, чтобы нитка приходилась в центре всех отверстий, а на доске отмечают данное положение для фотографического аппарата и ножек микроскопа и после этого врезывают винт и скобки. Для источника освещения фиксирующих приспособлений можно не делать, а очертить на доске место, с которого получается наилучшее освещение.

Снимки производятся в горизонтальном положении всей системы. При употреблении рефлектора Токмачева его устанавливают так, чтобы фокус лучей приходился в области предметного стекла. Если же пользуются карбидной горелкой, то здесь дело несколько усложняется тем, что нужно иметь двояковыпуклую линзу с длинным фокусным расстоянием (10—20 см.), которую ставят между объектом и источником света для того, чтобы лучи имели сходящееся направление. Передвигая эту линзу, можно добиться такого положения ее, при котором фокус лучей будет лежать в области препарата. Затем одновременно нужно пользоваться и осветительным приспособлением, имеющимся у микроскопа.

Установив все, как указано выше, можно приступить и к фотографированию. Вращая кремальер фотографического аппарата и микрометрический внит микроскопа, добиваются того, чтобы на матовом стекле получилось резкое изображение препарата. Затем манипулируют осветительным прибором, а диафрагмами усиливают резкость изображения и при получении нужной картины фотографируют обычным путем. Для того, чтобы на пластинку не попадал посторонний свет, щель между объективом и окуляром (а на рис. 1) закрывают черной материей.

Рис.3. Клетки печени, сфотографированные при увеличении в 420 раз.

Рис. 4. Коллоидный зоб при увеличении в 420 раз.

Что касается времени экспозиции, то каких-либо точных указаний: в этом отношении дать невозможно—все зависит от окраски препарата,, силы освещения и т. д. Лучшие результаты дают хорошо приготовленные и окрашенные срезы. Самый подходящей окраской для микрофотографии является окраска по V. Gieson’y, затем—окраска гэматоксилпном в сочетании с эозином и комбинации других красок. Препараты, окрашенные в яркий красный цвет, нужно фотографировать со светофильтрами, так как красные лучи не действуют на фотографическую пластинку. Пластинки лучше всего употреблять фабрики Red-Star, в зависимости от препарата— простые или ортохроматические. Для контрастности негативов рекомендуем проявитель с преобладанием гидрохинона, именно, метоло-гидрохинонный, по следующей прописи:

Фиксажная ванна—кислая, обыкновенная.

Воды дестиллированной	500,0
Метола	1,5
Гидрохинона	2,0
Сернисто-кислого натра	25,0
Соды кристаллической	25,0
Бромистого калия	2,5

Прилагаемые при сем микрофотограммы могут свидетельствовать, о том, что при этой комбинации сравнительно простых приспособлений можно получить удовлетворительные результаты, и всякий врач, имея этот несложный инструментарий может, при желании, заняться микрофотографией. Микрофотограммы исполнены на русской бромо-серебряной бумаге невысокого качества; имея заграничную бумагу, лучшего качества, можно получить отпечатки гораздо контрастнее. Снимки получены: с помощью сухих систем микроскопа, но хорошие результаты получаются при фотографировании бактериологических препаратов и иммерзионными системами.

¹ Желающим познакомиться с системой этой рефлектора указываю адрес для получения проекта: Ленинград, Проспект 25 октября, № 78, мастерские- «Рефлектор».