To the technique of microphotography

Abstract

In our profession, the need very often arises, especially when developing a scientific topic, or even just in practical activity, to fix and save the microscopic picture of interest to us. Sketching the preparation does not give an accurate representation of the latter, and in this respect the micrograph is irreplaceable. Meanwhile, at present, even in large medical centers, a rare institution has equipment for microphotography, not to mention the province, where they do not even think about it, in view of the complexity and high cost of the apparatus necessary for this purpose.

Full Text

В нашей профессии очень часто возникает нужда, в особенности при разработке какой-либо научной темы, или даже просто в практической деятельности, зафиксировать и сохранить интересующую нас микроскопическую картину. Зарисовка препарата не дает точного отображения последней, и в этом отношении микрофотография является незаменимой. Между тем в настоящее время даже в больших медицинских центрах редкое учреждение имеет оборудование для микрофотографии, не говоря уже о провинции, где об этом и не думают, в виду сложности и дороговизны необходимого для данной цели аппарата.

Работая в хирургическом отделении, я нередко имел дело с патологическими препаратами, микроскопическая картина которых представляла настолько значительный интерес, что ее требовалось зафиксировать. И вот, я попытался упростить оборудование и технику для получения микрофотограмм до таких пределов, чтобы ею мог воспользоваться даже врач провинции, не имеющий для этого никаких специальных приспособлений, кроме простого микроскопа и любительского фотографического аппарата.

Оборудование для получения микрофотограмм состоит обычно из 4 главных частей:

1) микрофотоаппарата,

2) специального микроскопа,

3) вольтовой дуги для освещения объекта

4) столика-штатива для закрепления всей системы.

Взамен всего этого я приспособил имеющийся в нашем распоряжении любительский фотографический аппарат в 9X12: сайт, размерами с объективом-апланат, светосилою 1,8 и фокусным расстоянием в 135 милл., простой лабораторный микроскоп системы Leitz’a и сконструированный мною столик-штатив. В качестве источника освещения взамен вольтовой дуги я приспособил рефлектор от эпидиаскопа системы Токмачева, которым пользуются в настоящее время многие культурно-просветительные организации для целей демонстрации картин во время лекций. Рефлектор этой системы имеет особую конструкцию, а именно, поверхность его представляет комбинацию эллипсоида вращение с шаром, благодаря чему maximum лучей, идущих от источника света, собирается в одном фокусе и дает возможность сильно осветить препарат.

Назначение всякого рефлектора, как известно,—увеличить полезное действие источника света. Если освещать предмет без рефлектора, то только самая незначительная часть лучей попадет на предмет, а остальная,, большая останется неиспользованной; рефлектор же Токмачева¹⁾ усиливает освещение в 20 раз по сравнению с лампой без рефлектора,, т. е., если в фокусе его поставить электрическую лампу в 100 свечей, то результат освещения будет равен 100X20=2000 свечам, что вполне заменит вольтову дугу. Второе свойство рефлектора,—собирать лучи- в один точный фокус,—позволяет обходиться без целой системы линз, которые требуются для концентрации света при фотографировании с вольтовой дугой. При неимении этого источника света, требующего электрической энергии, можно пользоваться и простой карбидной горелкой от проэкционного или велосипедного фонаря с простым вогнутым рефлектором, с которыми я получал также хорошие результаты. В общем вся установка будет иметь тот вид как это показано на рис. 1.

Рис.1

Всю установку необходимо утвердить на каком-либо штативе так чтобы оптические оси фотографического аппарата и микроскопа совпадали и в таком положении были прочно фиксированы,—в противни случае фотографировать будет очень трудно. Я предлагаю следующий очень простой, удобный и дешевый штатив (рис. 2):

Рис. 2

Берется продолговатая, квадратной формы доска, на которой вделывается винт от фотографического штатива, или специально заказанный, и на нем укрепляется фотографический аппарат. Для установки микроскопа к доске привинчиваются или прибиваются гвоздями скобки b, соответствующие подставке последнего. Прежде, чем укреплять винт и скобки, предварительно всю систему необходимо, конечно, установить в таком положении, при котором препарат даст изображение на матовом стекле, а это будет тогда, когда центры всех отверстий—объектива фотографического аппарата, окуляра и объектива микроскопа - будут совпадать, т. е. лежать на одной горизонтальной линии. Установить аппараты в таком положении можно при помощи нитки, которую протягивают через отверстия револьвера микроскопа, окуляра и объектива аппарата, затем фиксируют и устанавливают все части так, чтобы нитка приходилась в центре всех отверстий, а на доске отмечают данное положение для фотографического аппарата и ножек микроскопа и после этого врезывают винт и скобки. Для источника освещения фиксирующих приспособлений можно не делать, а очертить на доске место, с которого получается наилучшее освещение.

Снимки производятся в горизонтальном положении всей системы. При употреблении рефлектора Токмачева его устанавливают так, чтобы фокус лучей приходился в области предметного стекла. Если же пользуются карбидной горелкой, то здесь дело несколько усложняется тем, что нужно иметь двояковыпуклую линзу с длинным фокусным расстоянием (10—20 см.), которую ставят между объектом и источником света для того, чтобы лучи имели сходящееся направление. Передвигая эту линзу, можно добиться такого положения ее, при котором фокус лучей будет лежать в области препарата. Затем одновременно нужно пользоваться и осветительным приспособлением, имеющимся у микроскопа.

Установив все, как указано выше, можно приступить и к фотографированию. Вращая кремальер фотографического аппарата и микрометрический внит микроскопа, добиваются того, чтобы на матовом стекле получилось резкое изображение препарата. Затем манипулируют осветительным прибором, а диафрагмами усиливают резкость изображения и при получении нужной картины фотографируют обычным путем. Для того, чтобы на пластинку не попадал посторонний свет, щель между объективом и окуляром (а на рис. 1) закрывают черной материей.

Рис.3. Клетки печени, сфотографированные при увеличении в 420 раз.

Рис. 4. Коллоидный зоб при увеличении в 420 раз.

Что касается времени экспозиции, то каких-либо точных указаний: в этом отношении дать невозможно—все зависит от окраски препарата,, силы освещения и т. д. Лучшие результаты дают хорошо приготовленные и окрашенные срезы. Самый подходящей окраской для микрофотографии является окраска по V. Gieson’y, затем—окраска гэматоксилпном в сочетании с эозином и комбинации других красок. Препараты, окрашенные в яркий красный цвет, нужно фотографировать со светофильтрами, так как красные лучи не действуют на фотографическую пластинку. Пластинки лучше всего употреблять фабрики Red-Star, в зависимости от препарата— простые или ортохроматические. Для контрастности негативов рекомендуем проявитель с преобладанием гидрохинона, именно, метоло-гидрохинонный, по следующей прописи:

Фиксажная ванна—кислая, обыкновенная.

Воды дестиллированной	500,0
Метола	1,5
Гидрохинона	2,0
Сернисто-кислого натра	25,0
Соды кристаллической	25,0
Бромистого калия	2,5

Прилагаемые при сем микрофотограммы могут свидетельствовать, о том, что при этой комбинации сравнительно простых приспособлений можно получить удовлетворительные результаты, и всякий врач, имея этот несложный инструментарий может, при желании, заняться микрофотографией. Микрофотограммы исполнены на русской бромо-серебряной бумаге невысокого качества; имея заграничную бумагу, лучшего качества, можно получить отпечатки гораздо контрастнее. Снимки получены: с помощью сухих систем микроскопа, но хорошие результаты получаются при фотографировании бактериологических препаратов и иммерзионными системами.

¹ Желающим познакомиться с системой этой рефлектора указываю адрес для получения проекта: Ленинград, Проспект 25 октября, № 78, мастерские- «Рефлектор».