Экспрессия молекулярных маркёров в аспирате больных с BRAF-отрицательной меланомой кожи: исследование случай — контроль

Обоснование. Меланома кожи является одной из наиболее распространённых злокачественных опухолей кожи.

Цель исследования. Изучить клинико-морфологические особенности и экспрессию транскрипционных, ростовых факторов и компонентов сигнального пути AKT/m-TOR у пациентов с меланомой кожи и слизистых оболочек в аспиратах, полученных после тонкоигольной биопсии опухолевой ткани.

Методы. В исследование включён 41 пациент с верифицированной меланомой кожи различных локализаций и слизистых оболочек полости носа стадий Т1а–4вN0M0 (I–IV), а также 18 пациентов с невусами кожи различных локализаций. Возраст больных составил 45–72 года: мужчин — 25 (62%), женщин — 16 (38%). Экспрессию компонентов сигнальных каскадов исследовали методом полимеразной цепной реакции в реальном времени. Статус мутации BRAF определяли методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Статистический анализ выполняли с применением непараметрических методов (критерий Манна–Уитни, критерий Краскела–Уоллиса). Уровень статистической значимости принимали равным p <0,05.

Результаты. В аспиратах опухолевой ткани при меланоме наблюдалось увеличение экспрессии: AKT — в 13,47 раза, c-RAF — в 16,86 раза, m-TOR — в 90,25 раза, PDK1 — в 63,2 раза, VEGFR2 — в 7,28 раза, CAIX — в 801,69 раза, VHL — в 398 раз, PD-L1 — в 28,18 раза, AMPK — в 67,36 раза и LC3B — в 97 раз. При изъязвлении опухоли обнаружено снижение экспрессии ряда важных молекулярных маркёров: 4EBP1 — в 13,39 раза (р=0,0048), NF-kB p50 — в 19,38 раза (p=0,0015), а VHL — в 6,15 раза (p=0,004). При сравнении экспрессии молекулярных факторов в зависимости от глубины инвазии по Кларку (от эпидермиса до подкожной жировой клетчатки) выявлено, что уровень AKT возрастал с 5,94 раза в 3-й группе до в 56,96 раза в 5-й группе по сравнению со 2-й (p=0,0387). В 3-й группе также наблюдалось многократное повышение экспрессии GSK-3β (в 30,49 раза) и PD-1 (в 90,8 раза; p=0,0216), сопровождавшееся снижением экспрессии HIF-1 (в 891,44 раза; p=0,004).

Заключение. В аспиратах BRAF-негативных опухолей выявлены признаки активации аутофагии и усиления иммуногенности опухоли. В частности, зафиксировано повышение киназы AKT, сопровождавшееся увеличением экспрессии белка аутофагосом и рецептора PD-1.