Хроматографическое исследование препаратов гепарина

Аннотация

Препараты гепарина, применяемые в клиниках нашей страны (производство Минска, Каунасса, Баку, ВНР и ЧССР),, отличаются по своей биологической активности.
Гепарин — полимер переменной молекулярной массы величиной около 17000 дальтон. Мономерная единица его состоит из а-глюкуроновой кислоты, этерифициров а иной серной кислотой по углероду 2, глюкоза мина, этерифицированного серной кислотой по углероду 6 и по аминогруппе углерода 2, и L-идуроновой кислоты. Остатки глюкуроновой жислоты и глюкозамина, идуроновой кислоты и глюкозамина соединены гликозидными а (1—>4) связями.

Полный текст

Препараты гепарина, применяемые в клиниках нашей страны (производство Минска, Каунасса, Баку, ВНР и ЧССР),, отличаются по своей биологической активности.
Гепарин — полимер переменной молекулярной массы величиной около 17000 дальтон. Мономерная единица его состоит из а-глюкуроновой кислоты, этерифициров а иной серной кислотой по углероду 2, глюкоза мина, этерифицированного серной кислотой по углероду 6 и по аминогруппе углерода 2, и L-идуроновой кислоты. Остатки глюкуроновой жислоты и глюкозамина, идуроновой кислоты и глюкозамина соединены гликозидными а (1—>4) связями.
Мы поставили цель установить, как связана активность различных препаратов гепарина с их молекулярными массами, имея в виду, что гепарин не имеет единой химической структуры, и как по признаку чередования углеводных единиц и функциональных групп объединяется ряд соединений с различной длиной цепи и неодинаковой молекулярной массой.
Препараты гепарина подвергали гель-хроматографии на сефадексе G-50 «medium»: колонка 550Х.15 мм, элюция 0,3 М раствором хлористого натрия. Во фракциях (1 мл) определяли гепарин реакцией с карбазолом в присутствии концентрированной серной кислоты, выдерживающей пробу Саваля. После определения оптической плотности растворов при 549 нм строили график зависимости оптической плотности от объема выхода элюата (рис.).
Как видно из рисунка, препараты гепарина разного производства элюировались в пределах 10—26 мл. Молекулярные массы всех изученных препаратов гепарина колеблются в одних пределах. Однако в отечественных препаратах содержится относительно более высокая концентрация низкомолекулярных фракций гепарина.