Chromatographic study of heparin preparations

Abstract

Heparin preparations used in clinics of our country (produced in Minsk, Kaunass, Baku, Hungary and Czechoslovakia) differ in their biological activity. Heparin is a variable molecular weight polymer of about 17,000 daltons. Its monomer unit consists of a-glucuronic acid esterified with another sulfuric acid at carbon 2, glucoseamine esterified with sulfuric acid at carbon 6 and at the amino group of carbon 2, and L-iduronic acid. The remains of glucuronic acid and glucosamine, iduronic acid and glucosamine are linked by glycosidic a (1 -> 4) bonds.

Full Text

Препараты гепарина, применяемые в клиниках нашей страны (производство Минска, Каунасса, Баку, ВНР и ЧССР),, отличаются по своей биологической активности.
Гепарин — полимер переменной молекулярной массы величиной около 17000 дальтон. Мономерная единица его состоит из а-глюкуроновой кислоты, этерифициров а иной серной кислотой по углероду 2, глюкоза мина, этерифицированного серной кислотой по углероду 6 и по аминогруппе углерода 2, и L-идуроновой кислоты. Остатки глюкуроновой жислоты и глюкозамина, идуроновой кислоты и глюкозамина соединены гликозидными а (1—>4) связями.
Мы поставили цель установить, как связана активность различных препаратов гепарина с их молекулярными массами, имея в виду, что гепарин не имеет единой химической структуры, и как по признаку чередования углеводных единиц и функциональных групп объединяется ряд соединений с различной длиной цепи и неодинаковой молекулярной массой.
Препараты гепарина подвергали гель-хроматографии на сефадексе G-50 «medium»: колонка 550Х.15 мм, элюция 0,3 М раствором хлористого натрия. Во фракциях (1 мл) определяли гепарин реакцией с карбазолом в присутствии концентрированной серной кислоты, выдерживающей пробу Саваля. После определения оптической плотности растворов при 549 нм строили график зависимости оптической плотности от объема выхода элюата (рис.).
Как видно из рисунка, препараты гепарина разного производства элюировались в пределах 10—26 мл. Молекулярные массы всех изученных препаратов гепарина колеблются в одних пределах. Однако в отечественных препаратах содержится относительно более высокая концентрация низкомолекулярных фракций гепарина.