Состояние адаптивного иммунитета слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки при неонатальном сепсисе
- Авторы: Хаертынов Х.С.1, Анохин В.А.1, Бурганова Г.Р.2, Певнев Г.О.2, Мавликеев М.О.1, Киясов А.П.2, Ризванов А.А.2, Гильманов А.А.3, Любин С.А.3, Михеева Е.Г.1, Пшеничный П.В.2
-
Учреждения:
- Казанский государственный медицинский университет
- Казанский (Приволжский) федеральный университет
- Городская детская больница №1
- Выпуск: Том 101, № 1 (2020)
- Страницы: 31-39
- Тип: Теоретическая и клиническая медицина
- Статья получена: 07.02.2020
- Статья одобрена: 07.02.2020
- Статья опубликована: 11.02.2020
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/19427
- DOI: https://doi.org/10.17816/KMJ2020-31
- ID: 19427
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Цель. Оценка показателей адаптивного иммунитета слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки у детей с неонатальным сепсисом.
Методы. Проведено исследование биоптатов слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, полученных при проведении дуоденоскопии новорождённых, имевших признаки эрозивно-язвенного поражения пищеварительного тракта. 5 из них были получены от детей с клинико-лабораторными признаками неонатального сепсиса, 2 — от детей группы сравнения. Проведено иммуногистохимическое окрашивание биоптатов с использованием системы визуализации Novolink Polymer Detection System с коммерческими антителами к CD4, CD8, CD20 и Bcl-2 и системы визуализации CSAII Biotin-free Tyramide Signal Amplification System с коммерческими антителами к каспазе-3 и каспазе-9 в соответствии с инструкциями производителя.
Результаты. Было установлено, что количество Т-лимфоцитов CD4+ слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки в группе новорождённых с сепсисом в 4 из 5 случаев не отличалось от показателей контрольной группы. Количество лимфоцитов CD8+ у детей с сепсисом в 3 из 5 случаев было даже бόльшим, чем в группе контроля. Количество B-лимфоцитов CD20+ у 4 детей с сепсисом было значительно меньше по сравнению с контролем. Установлена активация апоптоза в клетках слизистой оболочки у детей с сепсисом, что проявлялось бόльшим количеством каспаза-3-позитивных клеток (в 4 из 5 случаев) по сравнению с показателями контрольной группы. Количество каспаза-9-позитивных клеток в исследуемых группах было практически одинаковым. Отмечено значительное уменьшение количества Bcl-2-позитивных клеток слизистой оболочки у всех 5 детей с сепсисом по сравнению с показателями контрольной группы.
Вывод. Проведённое исследование выявило умеренно выраженную иммуносупрессию в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки у детей с неонатальным сепсисом, проявившуюся низкими значениями В-лимфоцитов CD20+ на фоне отсутствия значимого снижения количества Т-лимфоцитов CD4+ и CD8+; установлена умеренно выраженная активация процессов апоптоза на фоне сниженного антиапоптотического потенциала, что создаёт условия возможной транслокации кишечной микробиоты в кровоток.
Ключевые слова
Полный текст
Сепсис — наиболее актуальная инфекционная патология детей периода новорождённости, что обусловлено значительной её распространённостью в этой возрастной группе и высокой летальностью [1]. Результаты исследований адаптивного иммунитета при сепсисе показали значимое снижение количества В- и Т-эффекторных клеток крови [2]. В большей мере это касается субпопуляции лимфоцитов CD4+ [2]. Основной причиной такого снижения считают активацию апоптоза [3]. Результатом сепсис-индуцированного апоптоза лимфоцитов становятся иммуносупрессия и неэффективность противоинфекционного ответа, что ассоциируется с неблагоприятным исходом заболевания. У пациентов, погибших от сепсиса, подобного рода снижение зарегистрировано не только в крови, но и в селезёнке, и в лимфатических узлах [3–5].
Поскольку лимфатический аппарат кишечника служит самой мощной составляющей периферического отдела иммунной системы, мы попытались выяснить его возможное участие в реакциях на инфекционную агрессию. В первую очередь нас интересовали изменения в слизистой оболочке кишки, фактически в зоне потенциальной реакции на микрофлору, заселяющую в этот период кишечник ребёнка. Приступая к исследованию, мы отдавали себе отчёт и в том, что фенотипически кишечник формирует (либо должен формировать) определённый комплекс или стереотип реагирования на разнообразные внешние воздействия, в том числе и на стресс. По нашему мнению, он может характеризовать или, по крайней мере, описывать общую реакцию организма при сепсисе. Именно это и стало побудительной основой настоящего исследования.
Цель исследования — оценка показателей адаптивного иммунитета слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки у детей с неонатальным сепсисом (НС).
Дизайн исследования представлен как серия клинических случаев. Проведено исследование биоптатов двенадцатиперстной кишки, полученных во время эндоскопической фиброгастродуоденоскопии (ФГДС) у детей, имевших признаки эрозивно-язвенного поражения пищеварительного тракта: 5 из них были получены от детей с клинико-лабораторными признаками НС, 2 образца — от детей группы сравнения. Эндоскопические исследования детям как опытной, так и контрольной групп проводили строго по показаниям, которыми были рвота с прожилками крови, наличие крови в содержимом назогастрального зонда.
Исследование проведено в период 2016–2017 гг. на базе ГАУЗ «Городская детская больница №1» г. Казани. ФГДС и забор образцов проводили после получения добровольного информированного согласия на проведение этого исследования от одного из родителей ребёнка. Исследование было одобрено локальным этическим комитетом Казанского государственного медицинского университета (протокол №2 от 21.02.2017).
Диагноз НС был установлен на основании клинико-лабораторных данных: развитие синдрома системного воспалительного ответа, повышение в крови концентрации С-реактивного белка более 1 мг/дл, наличие одного или нескольких очагов инфекции, признаки полиорганной недостаточности и выделение микроорганизма из венозной крови. Клинико-лабораторная характеристика пациентов, включённых в исследование, представлена в табл. 1.
Таблица 1. Клинико-лабораторная характеристика детей, которым была проведена фиброгастродуоденоскопия
Данные | Группа детей с неонатальным сепсисом (n=5) | Контрольная группа (n=2) | |||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 1 | 2 | |
Диагноз | Поздний неонатальный сепсис, некротический энтероколит, синдром диссеминированного внутрисосудистого свёртывания, полиорганная недостаточность | Ранний неонатальный сепсис, септический шок, пневмония, полиорганная недостаточность | Ранний неонатальный сепсис, септический шок, пневмония, некротический энтероколит, полиорганная недостаточность | Поздний неонатальный сепсис, некротический энтероколит, полиорганная недостаточность | Ранний неонатальный сепсис, пневмония | Внутриутробная пневмония | Геморрагическая болезнь новорождённого |
Гемокультура | K. pneunmoniae, БЛРС | — | — | S. epidermidis | — | — | — |
Гестационный возраст, нед | 36 | 39 | 40 | 39 | 37 | 39 | 39 |
Масса тела при рождении, г | 2150 | 3630 | 3400 | 3470 | 3350 | 3780 | 3490 |
Пол | ж | ж | м | м | ж | м | м |
Возраст при проведении эндоскопии, дни | 12 | 7 | 9 | 19 | 3 | 4 | 10 |
С-реактивный белок, мг/дл | 9,6 | 2,4 | 1 | 19,2 | 9,6 | 0,9 | 0 |
Лейкоциты в крови, ×109/л | 14,8 | 27,2 | 20,2 | 19 | 40,4 | 14,9 | 11,4 |
Лимфоциты в крови, % | 28 | 13 | 15 | 24 | 6 | 23 | 46 |
Лимфоциты в крови, ×109/л | 4,144 | 3,536 | 3,030 | 4,560 | 2,424 | 3,427 | 5,244 |
Лактат в крови, ммоль/л | 2,3 | 12,5 | 11 | 4,9 | 3,9 | 2,2 | 2,4 |
Примечание: БЛРС — β-лактамазы расширенного спектра; ж — женский, м — мужской.
4 (80%) детей родились доношенными, 1 — недоношенным на сроке 36 нед гестации. У 3 (60%) диагностирован ранний НС, у 2 (40%) — поздний НС. Очаги инфекции установлены у всех 5 детей. У 2 (40%) из них была диагностирована пневмония, ещё у 2 (40%) произошло развитие некротического энтероколита, у 1 (20%) — пневмонии и некротического энтероколита. В 2 случаях диагностирован септический шок. Признаки полиорганной недостаточности установлены у 4 из 5 детей.
Этиология НС была определена только у двоих (40%): у одного ребёнка из крови была выделена Klebsiella pneumoniae, продуцент β-лактамаз расширенного спектра действия, у второго — Staphylococcus epidermidis.
Воспалительные изменения в крови в виде лейкоцитоза зарегистрированы у 3 (60%) детей. Абсолютной лимфопении (<2×109/л) не было выявлено ни у одного из пациентов. У 3 (60%) отмечена тромбоцитопения, причём в 2 случаях число тромбоцитов было менее 100×109/л.
Все дети получили антибактериальную, инфузионную терапию, респираторную поддержку в виде искусственной вентиляции лёгких (ИВЛ), иммунотерапию (введение IgM-обогащённого иммуноглобулина). Во всех случаях НС завершился выздоровлением.
В контрольной группе оба ребёнка родились доношенными. В одном случае была диагностирована врождённая пневмония, в другом — геморрагическая болезнь новорождённого.
Эндоскопическое исследование. Эндоскопию верхних отделов пищеварительного тракта выполняли детским гастрофиброскопом (Pentax FG-16V, Япония) диаметром 5,3 мм, что достаточно для проведения эндоскопии у новорождённых с массой тела 500 г и более. Угол поля зрения составлял 120°, диапазон движения наконечника вверх и вниз — 180°, вправо и влево — 160°. Осмотр детей проводили в стабильном клиническом состоянии.
Получение материала и заливка в парафин. Забор биоптатов двенадцатиперстной кишки проводили во время эндоскопического исследования. Полученный материал фиксировали в 10% нейтральном формалине и в течение нескольких часов доставляли на кафедру морфологии и общей патологии Института фундаментальной медицины и биологии Казанского федерального университета (ИФМиБ КФУ) для дальнейшего процессинга.
Заливку образцов в парафин проводили по стандартной методике на базе гистологической лаборатории Центра биомедицинской микроскопии при кафедре морфологии и общей патологии ИФМиБ КФУ. С каждого парафинового блока на ротационном микротоме НМ 355S (Thermo Scientific, США) были получены срезы биопсийных материалов толщиной 4–5 мкм.
Окраска гематоксилином и эозином. Для визуализации структур тканей один срез от каждого образца был окрашен гематоксилином Майера и 1% водным раствором эозина (ЭргоПродакшн, Россия) по стандартному протоколу [6].
Иммуногистохимические методы окрашивания. Иммуногистохимическое окрашивание было проведено с использованием визуализационной системы Novolink Polymer Detection System (Leica Biosystems, Великобритания) с коммерческими антителами к CD4 (клон EPR6855, Abcam, разв. 1:100), CD8 (клон sp239, Sigma-Aldrich, разв. 1:100), CD20 (клон L26, Abcam, разв. 1:50) и Bcl-2 (клон 124, Dako, разв. 1:20), а также визуализационной системы CSAII Biotin-free Tyramide Signal Amplification System (Dako, США) с коммерческими антителами к каспазе-3 (Abcam, разв. 1:200) и каспазе-9 (клон E23, Abcam, разв. 1:250) в соответствии с инструкциями производителя.
Антитела к CD4 были использованы в качестве маркёров Т-лимфоцитов-хелперов, антитела к CD8 — маркёров цитотоксических Т-лимфоцитов и NK-клеток, антитела к CD20 — маркёров B-клеток. Положительным контролем иммуногистохимических реакций служили срезы тканей, содержащие исследуемые антигены [7].
Полученные гистологические препараты были изучены на микроскопе Axio Imager (Carl Zeiss, Германия), а также отсканированы на сканере гистологических препаратов Aperio CS2 (Leica Biosystems, Швейцария) при различных увеличениях.
Подсчёт результатов. Количественное определение CD4+-, CD8+- и CD20+-позитивных клеток проводили с помощью программы для анализа и обработки изображений ImageJ (National Institute of Health, США).
Результаты подсчёта CD4+, CD8+ и CD20+ представлены в виде отношения позитивно окрашенной площади поля зрения к общей площади поля зрения при увеличении ×200. C каждого образца было подсчитано по пять случайных полей зрения.
Подсчёт Bcl-2-, каспаза-3- и каспаза-9-позитивных клеток проводили вручную после визуализации окрашенных клеток на полученных образцах при увеличении ×200. C каждого образца было подсчитано по пять случайных полей зрения. Результаты представлены в виде среднего числа клеток на единицу площади изученного образца органа.
Учитывая малую выборку пациентов, дизайн исследования представлял описание серии случаев.
Результаты эндоскопического исследования. У 3 из 5 детей основной группы слизистая оболочка пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки была интактной, у 1 ребёнка отмечена гиперемия слизистой оболочки нижней трети пищевода, ещё у 1 — гиперемия слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки. В контрольной группе у 1 ребёнка выявлена гиперемия слизистой оболочки нижней трети пищевода, у другого — гиперемия слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки.
Результаты морфологического исследования. Морфология стенки двенадцатиперстной кишки у пациентов основной группы (с сепсисом) в целом была неспецифичной, однообразной и характеризовалась умеренно выраженной лимфогистиоцитарной инфильтрацией, отёком и мезенхимозом стромы, гиперплазией бокаловидных клеток. У детей контрольной группы зарегистрирована аналогичная картина, у 1 ребёнка с пневмонией выявлена очаговая выраженная В-лимфоцитарная инфильтрация с формированием фолликулов.
Результаты иммуногистохимического исследования. Установлено, что количество лимфоцитов CD4+ слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки у детей с НС в 4 из 5 случаев не отличалось от показателей контрольной группы (табл. 2, рис. 1). Только у 1 ребёнка с сепсисом количество клеток CD4+ было заметно меньше, чем у детей контрольной группы. Число лимфоцитов CD8+ у детей с НС в 2 из 5 случаев не отличалось от значений группы контроля, а в 3 случаях даже было бо́льшим. Количество CD20+ В-лимфоцитов у 4 из 5 детей с НС было заметно меньше по сравнению с показателями контрольной группы. В 1 случае число клеток CD20+ было таким же, как в контроле.
Таблица 2. Количественный анализ субпопуляций лимфоцитов двенадцатиперстной кишки и показателей апоптоза/антиапоптоза клеток
Пациенты | CD4 | CD8 | CD20 | Каспаза-3 | Каспаза-9 | Bcl-2 |
S1/S2 | М | |||||
Новорождённые с сепсисом | ||||||
1 | 0,012 | 0,008 | 0,003 | 19,4 | 9,2 | 40,4 |
2 | 0,011 | 0,004 | 0,004 | 8,2 | 8,5 | 44,9 |
3 | 0,012 | 0,004 | 0,003 | 10,8 | 10,2 | 23,1 |
4 | 0,018 | 0,008 | 0,008 | 11,5 | 3,9 | 78,4 |
5 | 0,003 | 0,008 | 0,003 | 11,5 | 6,3 | 35,0 |
Контрольная группа | ||||||
1 | 0,011 | 0,005 | 0,05 | 9,6 | 7,2 | 135,5 |
2 | 0,007 | 0,004 | 0,007 | 8,8 | 8,6 | 85,5 |
Примечание: S1/S2 — отношение позитивно окрашенной площади к общей площади поля зрения; М — среднее количество клеток на единицу площади.
Рис. 1. Иммуногистохимическое окрашивание CD4-, CD8- и CD20-лимфоцитов (коричневая окраска) двенадцатиперстной кишки у ребёнка с сепсисом (А, Б, В) и без сепсиса (Г, Д, Е). Увеличение ×200
Обнаружена активация процессов апоптоза в клетках слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, что проявилось большим количеством каспаза-3-позитивных клеток у 4 из 5 новорождённых с сепсисом в сравнении с показателями контрольной группы (рис. 2, см. табл. 2). Число каспаза-9-позитивных клеток в группе детей с НС было бόльшим относительно значений контрольной группы только в 2 из 5 случаев. Обращало на себя внимание существенное снижение числа Bcl-2-позитивных клеток слизистой оболочки у всех 5 детей с НС по сравнению с показателями контроля (см. табл. 2, см. рис. 2). Их средние значения в группе детей с НС были в 2,5 раза меньше, чем в контроле.
Рис. 2. Иммуногистохимическое окрашивание каспаза-3-, каспаза-8- и Bcl-2-позитивных клеток (коричневая окраска) у ребёнка с сепсисом (А, Б, В) и без сепсиса (Г, Д, Е). Увеличение ×200
Согласно современным представлениям о патофизиологии сепсиса, после сравнительно короткого периода активации клеток врождённого иммунитета и развития синдрома системного воспалительного ответа наступает иммуносупрессия, становящаяся, как показывает современная практика, одной из основных причин неблагоприятного исхода при сепсисе. При этом иммуносупрессии подвержены клетки как врождённого, так и адаптивного иммунитета.
Группой исследователей, возглавляемой K. Wolk (2003), было показано, что первичная стимуляция моноцитов эндотоксином способствует активации этих клеток с выраженным провоспалительным ответом, однако при повторном введении эндотоксина формируется толерантность к нему со снижением экспрессии HLA-DR моноцитов [8]. Данный феномен рассматривают в качестве одного из предикторов неблагоприятного исхода при сепсисе. В исследованиях G. Monneret (2002) было установлено, что 40% снижение экспрессии HLA-DR на поверхности моноцитов в течение 5 дней от начала септического шока ассоциируется со смертельным исходом [9].
Как уже было отмечено, ключевая роль в элиминации возбудителя и формировании последующей невосприимчивости принадлежит факторам адаптивного иммунитета. У пациентов, умерших от сепсиса, в селезёнке, лимфатических узлах, вилочковой железе традиционно регистрируют снижение количества Т-клеток (субпопуляций лимфоцитов CD4+, CD8+) и В-лимфоцитов [3–5]. Количественное уменьшение клеточного пула в Т- и В-зависимых зонах с опустошением реактивных центров рассматривают как один из характерных морфологических признаков сепсиса [10].
Основная причина формирующейся сепсис-индуцированной иммуносупрессии — повышенная активность процессов апоптоза клеток иммунной системы. Активация этого явления была продемонстрирована у пациентов разного возраста — взрослых, детей младшего возраста, новорождённых [3–5]. Ключевую роль в завершающей стадии этого процесса, как показали исследования, играет каспаза-3 [11]. Снижение количества эффективно функционирующих лимфоцитов в слизистой оболочке кишечника способствует транслокации бактерий и их токсинов в системный кровоток с развитием синдрома системного воспалительного ответа и повышением вероятности присоединения вторичных инфекций [12]. Результат сепсис-индуцированного апоптоза — снижение эффективности противоинфекционного иммунного ответа.
Мы предположили, что и в нашем исследовании будет выявлена сходная картина — снижение количества CD4+-, CD8+- и CD20+-клеток, только теперь уже в тканях слизистой оболочки кишечника. В том числе учитывали и возможную активацию процесса апоптоза. Полученные результаты частично подтвердили исходную гипотезу. По-видимому, развивается умеренно выраженная иммуносупрессия в слизистой оболочке кишечника, что видно по низкому количеству В-лимфоцитов CD20+. В то же время, численные показатели CD4+- и CD8+-клеток у большинства детей с НС практически не отличались от показателей контрольной группы. Мы не исключаем, что отсутствие ожидаемого снижения числа этих лимфоцитов в слизистой оболочке было связано с отсутствием выраженной иммуносупрессии у включённых в исследование пациентов.
Напомним, что ни один из детей не погиб. Ни в одном случае не было абсолютной лимфопении. Даже при септическом шоке, наиболее тяжёлой форме сепсиса (мы наблюдали его у 2 детей), протекавшем с гемодинамическими нарушениями и уровнем лактата крови более 10 ммоль/л, общее количество лимфоцитов в венозной крови и CD4+-клеток в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки не отличалось от выбранного нами контроля. Шок же удалось достаточно быстро купировать. Кроме того, нужно учесть, что иммуносупрессия характерна для поздних сроков заболевания. В исследовании, проведённом R.S. Hotchkiss (2001) и уже ставшем классическим, выраженность снижения количества CD4+- и CD20+-клеток в органах иммунной системы прямо коррелировала со сроками заболевания: иммуносупрессия была наиболее выраженной после 7-го дня болезни [13]. В нашем исследовании только у 1 (20%) ребёнка продолжительность НС в день проведения эндоскопического исследования превышала 7 дней.
Как уже было отмечено выше, основная причина лимфопении при сепсисе — активация апоптоза. Более того, апоптозу при сепсисе также подвержены эпителиальные клетки различных органов. Этот процесс чаще проявляется в кишечнике, лёгких, печени и способен привести к органной дисфункции [14]. В нашем исследовании это было заметно по увеличению числа каспаза-3-позитивных клеток слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки. Только у 1 из детей количество такого рода клеток не отличалось от показателей контроля.
Активация апоптоза клеток пищеварительного тракта может стать причиной нарушений целостности кишечной стенки, снижения её барьерной функции и транслокации бактерий в кровоток. Нередко пищеварительный тракт становится входными воротами инфекции при позднем НС. R.S. Hotchkiss и соавт. показали, что в образцах тканей, полученных от умерших пациентов, доля подвергшихся апоптозу клеток была наибольшей в толстой кишке — 47,1% [15].
Мы не исключаем, что это связано с наибольшей концентрацией кишечной микрофлоры именно в толстой кишке. У пациентов, включённых в наше исследование, в 3 (60%) случаях был диагностирован некротический энтероколит. Апоптоз клеток пищеварительного тракта — один из ключевых механизмов развития некротического энтероколита [15]. В нашем исследовании во всех случаях отмечено увеличение числа каспаза-3-позитивных клеток по сравнению с контролем. Однако отсутствие заметного снижения количества CD4+-лимфоцитов в слизистой оболочке кишечника, по-видимому, способствовало благоприятному исходу заболевания у всех 5 детей.
Основным компонентом клетки, препятствующим апоптозу, служит митохондриальный белок Bcl-2 [11]. В нашем исследовании был выявлен сравнительно низкий уровень Bcl-2-позитивных клеток в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки у всех 5 детей с НС, что свидетельствует о подавлении активности антиапоптотических механизмов.
Выводы
1. Проведённое исследование выявило умеренно выраженную иммуносупрессию в слизистой оболочке двенадцатиперстной кишки у детей с неонатальным сепсисом, проявившуюся низкими значениями В-лимфоцитов CD20+ на фоне отсутствия значимого снижения количества Т-лимфоцитов CD4+ и CD8+.
2. Установлена умеренно выраженная активация процессов апоптоза на фоне сниженного антиапоптотического потенциала, что создаёт условия возможной транслокации кишечной микробиоты в кровоток.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов по представленной статье.
Об авторах
Халит Саубанович Хаертынов
Казанский государственный медицинский университет
Автор, ответственный за переписку.
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Владимир Алексеевич Анохин
Казанский государственный медицинский университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Гузель Рустамовна Бурганова
Казанский (Приволжский) федеральный университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Георгий Олегович Певнев
Казанский (Приволжский) федеральный университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Михаил Олегович Мавликеев
Казанский государственный медицинский университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Андрей Павлович Киясов
Казанский (Приволжский) федеральный университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Альберт Анатольевич Ризванов
Казанский (Приволжский) федеральный университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Альберт Альфредович Гильманов
Городская детская больница №1
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Сергей Анатольевич Любин
Городская детская больница №1
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Екатерина Геннадьевна Михеева
Казанский государственный медицинский университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Павел Витальевич Пшеничный
Казанский (Приволжский) федеральный университет
Email: khalit65@rambler.ru
Россия, г. Казань, Россия
Список литературы
- Verma P., Berwal P.K., Nagaraj N. et al. Neonatal sepsis: epidemiology, clinical spectrum, recent antimicrobial agents and their antibiotic susceptibility pattern. Int. J. Contemp. Pediatr. 2015; 2: 176–180. doi: 10.18203/2349-3291.ijcp20150523.
- Hotchkiss R.S., Osmon S.B., Chang K.C. et al. Accelerated lymphocyte death in sepsis occurs by both the death receptor and mitochondrial pathways. J. Immunol. 2005; 174: 5110–5118. doi: 10.4049/jimmunol.174.8.5110.
- Boomer J.S., To K., Chang K.C. et al. Immunosuppression in patients who die of sepsis and multiple organ failure. JAMA. 2011; 306 (23): 2594–605. doi: 10.1001/jama.2011.1829.
- Felmet K.A., Hall M.W., Clark R.S. et al. Prolonged lymphopenia, lymphoid depletion, and hypoprolactinemia in children with nosocomial sepsis and multiple organ failure. J. Immunol. 2005; 174: 3765–3772. doi: 10.4049/jimmunol.174.6.3765.
- Toti P., De Felice C., Occhini R. et al. Spleen depletion in neonatal sepsis and chorioamnionitis. Am. J. Clin. Pathol. 2004; 122: 765–771. doi: 10.1309/RV6E-9BMC-9954-A2WU.
- Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. 4-е изд. Л.: Медгиз, ленинградское отделение. 1961; 343 с.
- Петров С.В., Райхлин Н.Т. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека. Казань. 2004; 452 с.
- Wolk K., Kunz S., Crompton N.E. et al. Multiple mechanisms of reduced major histocompatibility complex class II expression in endotoxin tolerance. J. Biol. Chem. 2003; 278 (20): 18 030–18 036. doi: 10.1074/jbc.M207714200.
- Monneret G., Elmenkouri N., Bohe J. et al. Analytical requirements for measuring monocytic HLA-DR by flow cytometry. Clin. Chem. 2002; 48: 1589–1592. PMID: 12194941.
- Цинзерлинг А.В. Современные инфекции. Патологическая анатомия и вопросы патогенеза. СПб.: СОТИС. 1993; 363 с.
- Hotchkiss R.S., Coopersmith C.M., Karl I.E. Prevention of lymphocyte apoptosis — A potential treatment of sepsis? Clin. Inf. Dis. 2005; 41: 465–469. doi: 10.1086/431998.
- Hotchkiss R.S., Monneret G., Payen D. Sepsis-induced immunosuppression: from cellular dysfunctions to immunotherapy. Immunology. 2013; 13: 862–874. doi: 10.1038/nri3552.
- Hotchkiss R.S., Tinsley K.W., Swanson P.E. et al. Sepsis-induced apoptosis causes progressive profound depletion of B and CD4+ T lymphocytes in humans. J. Immunol. 2001; 166: 6952–6963. doi: 10.4049/jimmunol.166.11.6952.
- Da Silva F.P., Nizet V. Cell death during sepsis: integration of disintegration in the inflammatory response to overwhelming infection. Apoptosis. 2009; 14: 509–521. doi: 10.1007/s10495-009-0320-3.
- Hotchkiss R.S., Tinsley K.W., Karl I.E. Role of apoptotic cell death in sepsis. Scand. J. Infect. Dis. 2003; 35: 585–592. doi: 10.1080/00365540310015692.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)