Морфофункциональное состояние тромбоцитов в их концентратах в зависимости от срока хранения

Обложка


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Актуальность. Оценка функционального состояния тромбоцитов в составе концентратов необходима для совершенствования методики их получения, оптимизации условий и сроков хранения, повышения лечебной эффективности, а также снижения риска осложнений трансфузии.

Цель. Комплексное изучение морфофункционального состояния тромбоцитов в процессе хранения их концентратов.

Материал и методы исследования. Исследовали 202 образца аферезных концентратов тромбоцитов человека на сроках хранения до 1–7 дней при температуре 22–24 °C. Функциональное состояние тромбоцитов оценивали с помощью проточной цитометрии по экспрессии Р-селектина, активного интегрина αIIbβ3 и фосфатидилсеринов до и после биохимической стимуляции. Кроме того, изучали митохондриальный потенциал тромбоцитов, концентрацию внутриклеточного аденозинтрифосфата, контрактильные свойства, индуцированную агрегацию, а также морфологические характеристики по данным сканирующей электронной микроскопии. Статистический анализ выполняли методами дисперсионного анализа (ANOVA или Краскела–Уоллиса).

Результаты. В неактивированных тромбоцитах в процессе хранения спонтанная экспрессия P-селектина возрастала в среднем в 7 раз, а фосфатидилсеринов — в 3 раза. Индуцированная экспрессия Р-селектина, интегрина αIIbβ3 и фосфатидилсеринов была самой высокой в день получения концентрата и постепенно снижалась в процессе хранения до 1/2 исходного уровня. Агрегационная активность тромбоцитов в ответ на стимуляцию коллагеном прогрессивно снижалась в среднем в 100 раз, в ответ на пептид TRAP — в 1,5 раза. В отличие от экспрессии маркёров активации, способность тромбоцитов сжимать сгустки плазмы в большинстве образцов менялась незначительно, в пределах нескольких процентов; в единичных образцах сократительная функция к 4–7 дням хранения падала до нуля, что сочеталось с гиперактивацией и истощением тромбоцитов. Митохондриальный потенциал тромбоцитов и содержание аденозинтрифосфата были относительно постоянными. Морфологически преобладали дисковидные тромбоциты, однако, начиная с 1-го дня хранения, накапливались веретенообразные, а с 3-го дня — сферические формы и микроагрегаты ¬тромбоцитов.

Вывод. Тромбоциты в составе концентратов изначально обладают высоким функциональным потенциалом, который постепенно снижается вследствие прогрессирующей спонтанной активации при одновременном снижении реактивности и изменениях структуры.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Алина Ильшатовна Хабирова

Институт фундаментальной медицины и биологии Казанского (Приволжского) федерального университета

Автор, ответственный за переписку.
Email: alina.urussu.95@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-7243-8832
ResearcherId: AAO-3282-2021

магистр биологии, м.н.с., НИЛ «Белково-клеточные взаимодействия», Институт фундаментальной медицины и биологии

Россия, г. Казань, Россия

Люция Суляймановна Фатхуллина

Межрегиональный клинико-диагностический центр

Email: Lusik65@rambler.ru
ORCID iD: 0000-0001-8303-7455

врач-трансфузиолог, зав. отд. заготовки крови и её компонентов

Россия, г. Казань, Россия

Изабелла Александровна Андрианова

Институт фундаментальной медицины и биологии Казанского (Приволжского) федерального университета,

Email: izabella2d@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-3973-3183

канд. биол. наук, c.н.с., НИЛ «Белково-клеточные взаимодействия», Институт фундаментальной медицины и биологии

Россия, г. Казань, Россия

Наталья Геннадьевна Евтюгина

Институт фундаментальной медицины и биологии Казанского (Приволжского) федерального университета

Email: natalja.evtugyna@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4950-3691

аспирант, каф. биохимии, биотехнологии и фармакологии, Институт фундаментальной медицины и биологии

Россия, г. Казань, Россия

Рустем Игоревич Литвинов

Институт фундаментальной медицины и биологии Казанского (Приволжского) федерального университета

Email: rustempa@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-0643-1496

докт. мед. наук, проф., г.н.с., НИЛ «Белково-клеточные взаимодействия», Институт фундаментальной медицины и биологии

Россия, г. Казань, Россия

Список литературы

  1. Estcourt LJ. Why has demand for platelet components increased? A review. Transfus Med. 2014;24(5):260–268. doi: 10.1111/tme.12155.
  2. Чечеткин А.В., Данильченко В.В., Григорьян М.Ш., Воробей Л.Г., Плоцкий Р.А. Основные показатели деятельности службы крови Российской Федерации в 2017 году. Трансфузиология. 2018;19(3):4–14. EDN: VIQETE.
  3. Ng MSY, Tung JP, Fraser JF. Platelet storage lesions: what more do we know now? Transfus Med Rev. 2018;32(3):144–154. doi: 10.1016/j.tmrv.2018.04.001.
  4. Ignatova AA, Karpova OV, Trakhtman PE, Rumiantsev SA, Panteleev MA. Functional characteristics and clinical effectiveness of platelet concentrates treated with riboflavin and ultraviolet light in plasma and in platelet additive solution. Vox Sanguinis. 2016;110(3):244–252. doi: 10.1111/vox.12364.
  5. Карпова О.В., Образцов И.В., Трахтман П.Е., Игнатова А.А., Пантелеев М.А., Румянцев С.А. Сравнение морфофункциональных свойств тромбоцитов в зависимости от различных способов процессинга. Онкогематология. 2014;(4):37–45. EDN: TMOEEL.
  6. Fritsma GA. Platelet structure and function. Clinical Laboratory Science. 2015;28(2):125–131. doi: 10.29074/ascls.28.2.125.
  7. Литвинов Р.И., Пешкова А.Д. Контракция (ретракция) сгустков крови и тромбов: патогенетическое и клиническое значение. Альманах клинической медицины. 2018;46(7):662–671. doi: 10.18786/2072-0505-2018-46-7-662-671.
  8. Жибурт Е.Б. Трансфузиология. Учебник. СПб.: Питер; 2002. 736 c.
  9. Меликян А.Л., Пустовал Е.И., Цветаева Н.В., Птушкин В.В., Грицаев С.В., Голенков А.К., Давыдкин И.Л., Поспелова Т.И., Иванова В.Л., Шатохин Ю.В., Данишян К.И., Савченко В.Г. Национальные клинические рекомендации по диагностике и лечению идиопатической тромбоцитопенической пурпуры (первичной иммунной тромбоцитопении) у взрослых (редакция 2016 г.). Гематология и трансфузиология. 2017;62(1-S1):1–24. EDN: ZUEHRV.
  10. Протопопова А.И., Гоголев Н.М., Тобохов А.В., Николаев В.Н., Неустроев П.А., Тимирдяев Д.Х. Переливание компонентов, препаратов крови и кровезаменителей. М., Берлин: DirectMEDIA; 2017. 169 с.
  11. Wandt H, Schäfer-Eckart K, Greinacher A. Platelet transfusion in hematology, oncology and surgery. Dtsch Arztebl Int. 2014;111(48):809–815. doi: 10.3238/arztebl.2014.0809.
  12. Schlenke P, Sibrowski W. 2 platelet concentrates. Transfus Med Hemother. 2009;36(6):372–382. doi: 10.1159/000268058.
  13. Постановление Правительства Российской Федерации от 22 июня 2019 г. №797 «Об утверждении правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и её компонентов и признании утратившими силу некоторых актов правительства Российской Федерации». http://publication.pravo.gov.ru/Document/View/0001201907020007 (дата обращения: 07.04.2022).
  14. Van Der Meer PF, de Korte D. Platelet preservation: agitation and containers. Transfus Apher Sci. 2011;44(3):297–304. doi: 10.1016/j.transci.2011.03.005.
  15. Жибурт Е.Б., Мадзаев С.Р. Организация хранения компонентов крови в клинике. Главная медицинская сестра. 2014;(10):33–39. EDN: SOBGEB.
  16. Приказ Минздрава России №1166н от 28 октября 2020 г. «Об утверждении порядка прохождения донорами медицинского обследования и перечня медицинских противопоказаний (временных и постоянных) для сдачи крови и (или) её компонентов и сроков отвода, которому подлежит лицо при наличии временных медицинских показаний, от донорства крови и (или) её компонентов». https://legalacts.ru/doc/prikaz-minzdrava-rossii-ot-28102020-n-1166n-ob-utverzhdenii/ (дата обращения: 07.04.2022).
  17. Reddoch KM, Pidcoke HF, Montgomery RK, Fedyk CG, Aden JK, Ramasubramanian AK, Cap AP. Hemostatic function of apheresis platelets stored at 4 °C and 22 °C. Shock. 2014;41(Suppl 1 (01)):54–61. doi: 10.1097/SHK.0000000000000082.
  18. Sperling S, Vinholt PJ, Sprogoe U, Yazer MH, Frederiksen H, Nielsen C. The effects of storage on platelet function in different blood products. Hematology. 2019;24(1):89–96. doi: 10.1080/10245332.2018.1516599.
  19. Fiedler SA, Boller K, Junker AC, Kamp C, Hilger A, Schwarz W, Seitz R, Salge-Bartels U. Evaluation of the in vitro function of platelet concentrates from pooled buffy coats or apheresis. Transfus Med Hemother. 2020;47(4):314–325. doi: 10.1159/000504917.
  20. Singh S, Hakimi CS, Jeppsson A, Hesse C. Platelet storage lesion in interim platelet unit concentrates: A comparison with buffy-coat and apheresis concentrates. Transfus Apher Sci. 2017;56(6):870–874. doi: 10.1016/j.transci.2017.10.004.
  21. Jain A, Marwaha N, Sharma RR, Kaur J, Thakur M, Dhawan HK. Serial changes in morphology and biochemical markers in platelet preparations with storage. Asian J Transfus Sci. 2015;9(1):41–47. doi: 10.4103/0973-6247.150949.
  22. Zucker-Franklin D, Grusky G. The actin and myosin filaments of human and bovine blood platelets. J Clin Invest. 1972;51(2):419–430. doi: 10.1172/JCI106828.
  23. Perrotta PL, Perrotta CL, Snyder EL. Apoptotic activity in stored human platelets. Transfusion. 2003;43(4):526–535. doi: 10.1046/j.1537-2995.2003.00349.x.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Спонтанная (A) и индуцированная (Б) экспрессия маркёров активации в тромбоцитах на разных сроках хранения концентратов тромбоцитов. Число образцов в дни исследования составило для P-селектина n=33–49; для активного интегрина αIIbβ3 n=23–36; для фосфатидилсерина n=25–37. Результаты представлены как медиана и интер­квартильный интервал; ***p <0,0001, **p <0,001; *p <0,05; тест Краскела–Уоллиса с последующим тестом Данна для парных сравнений

Скачать (56KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Степень агрегации тромбоцитов, индуцированной коллагеном (А) или пептидом TRAP-6 (Б), на разных сроках хранения концентратов тромбоцитов. При агрегации, вызванной коллагеном, число образцов в дни исследования составило n=19–29; при агрегации, вызванной TRAP, n=26–36. Результаты представлены как медиана и интерквартильный интервал; ***p <0,0001, **p <0,001, *p <0,05; тест Краскела–Уоллиса с последующим тестом Данна для парных сравнений

Скачать (25KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Сократительная функция тромбоцитов на разных сроках хранения концентратов тромбоцитов, определённая по способности вызывать сокращение (контракцию) сгустков в плазме крови. Число образцов в дни исследования составило n=12–36. Результаты представлены как медиана и интерквартильный интервал

Скачать (12KB)
Метаданные
5. Рис. 4. А. Митохондриальный потенциал неактивированных тромбоцитов на разных сроках хранения концентратов тромбоцитов. Число образцов в дни исследования составило n=31–41. Б. Содержание внутриклеточного аденозинтрифосфата (АТФ) в концентратах тромбоцитов на разных сроках хранения. Концентрация АТФ нормализована на единицу массы белка в тромбоцитарных лизатах. Число образцов в дни исследования составило n=9–20. Результаты представлены в виде среднего значения и стандартного отклонения (А) и как медиана и интерквартильный интервал (Б)

Скачать (23KB)
Метаданные
6. Рис. 5. Различные морфологические варианты тромбоцитов в составе концентратов тромбоцитов по данным сканирующей электронной микроскопии: А — дисковидные; Б — овальные; В — недеформированные или слегка деформированные с 1–3 филоподиями; Г — сильно деформированные с множественными филоподиями; Д — сферические с шероховатой поверхностью; Е — веретенообразные. Линейки = 1 мкм

Скачать (42KB)
Метаданные

© Эко-Вектор, 2023


СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: ЭЛ № ФС 77 - 75008 от 01.02.2019.