Контроль за качеством фосфабензида

Аннотация

Фосфабензид (гидразид дифенилфосфинилуксусной кислоты) — оригинальное отечественное лекарственное средство, рекомендуемое для лечения нервно-психических и других заболеваний [1]. Синтез фосфабензида осуществлен на основе реакции этилового эфира дифенилфосфинилуксусной кислоты с гидразин гидратом [4].

Полный текст

В настоящей работе представлены результаты исследования свойств фосфабензида с помощью комплекса физических, физико-химических и химических методов, позволяющих оценить его доброкачественность как фармакопейного препарата.

Разработка методов анализа для определения качества фосфабензида с последующим исследованием его физико-химических свойств проводилась по образцам препарата опытного промышленного изготовления. Контроль за качеством осуществлялся в соответствии с требованиями нормативно-технической документации. Подлинность фосфабензида устанавливали с помощью ПК- и УФ-спектроскопии.

ИК-спектр фосфабензида, снятый в вазелиновом масле на спектрометре UR-20, содержит интенсивные полосы при 1184—1190 и 1684—1736 см⁻¹, обусловленные валентными колебаниями фосфиноксидной и карбонильной групп. Деформационные и валентные колебания остатка гидразина в молекуле фосфабензида характеризуются соответственно полосами средней интенсивности в области 3245— 3420 см⁻¹.

УФ-спектр 0,01% водного или спиртового раствора фосфабензида в области от 240 до 300 нм имеет максимумы поглощения при 260±1 нм, 265±1 нм, 272±1 нм и минимумы поглощения при 262±1 нм и 269±1 нм, плечо в области 253—255 нм. УФ-спектр характеризует наличие дифенилфосфиновой группы в молекуле фосфабензида [8].

Присутствие функциональных групп в фосфабензиде дополнительно подтверждали с помощью следующих качественных реакций:

— около 0,02 г фосфабензида сплавляют в тигле с 0,1 г кальция оксида до прекращения выделения паров. К полученному остатку добавляют 3 мл азотной разведенной кислоты и фильтруют, а к фильтрату приливают 1 мл 5% водного раствора аммония молибдата, в результате появляется интенсивное желтое окрашивание (фосфор);

— около 0,01 г. фосфабензида в 2 мл воды вносят в пробирку и прибавляют 1 мл аммиачного раствора серебра нитрата — на стенках пробирки образуется серебряное зеркало (гидразин);

— к 0,01 г фосфабензида в 2 мл воды добавляют 4 капли свежеприготовленного 1% водного раствора пентацианоамминоферроата натрия; через 1—2 минуты возникает вишневое окрашивание, переходящее в оранжевое от добавления 1—2 капель раствора натрия гидроксида (гидразид кислоты);

— к 0,01 г фосфабензида в 2 мл спирта добавляют 1—2 капли 3% раствора железа (III) хлорида; появившееся фиолетовое окрашивание исчезает при добавлении минеральной кислоты (фосфабензид).

Одним из побочных продуктов синтеза фосфабензида является тетрафенилэтилендифосфина диоксид, который очень мало растворим в воде. Содержание его в препарате около 0,05% обусловливает образование мутных растворов. Контроль за качеством фосфабензида по показателю «прозрачность растворов» основан на том, что 1% водные растворы препарата по мутности должны выдержать сравнение с эталоном 1 по ГФ XI издания [3].

В процессе получения и очистки фосфабензида конечный продукт может загрязняться микроколичествами железа, которое образует окрашенный комплекс с дигидразидом железа [2, 5]. Для оценки качества фосфабензида по показателю «цветность раствора» в качестве растворителя был выбран 95% этанол, в котором интенсивнее, чем в воде, проявляются оттенки окраски исследуемых образцов. Испытанию подвергнуты 2% спиртовые растворы фосфабензида. Установлено, что растворы указанной концентрации по интенсивности окраски не превышают эталон цветности № 7а ГФ XI издания.

Наличие хлоридов в фосфабензиде вызвано синтезом. В образцах препарата их содержится не более 0,05%.

Примесь железа в фосфабензиде находится в виде комплексного соединения — дигидразида железа [2, 5]. Свойство последнего разрушаться до ионов железа в кислой среде при нагревании позволило разработать метод колориметрического определения примеси железа в фосфабензиде на основе реакции с сульфосалициловой кислотой, исключающую предварительную минерализацию препарата. В образцах фосфабензида оказалось не более 0,005% примеси.

В качестве посторонних примесей в соответствии со схемой синтеза фосфабензида в целевом продукте присутствуют тетрафенилэтилендифосфина диоксид и гидразина гидрохлорид. Для их селективного выявления в фосфабензиде нами разработан метод с использованием хроматографии в тонких слоях сорбента [3]. Сорбент — пластинки Силуфол УФ-254, подвижная фаза — хлороформ—ацетон—спирт этиловый абсолютированный (6:6:1) при хроматографировании в парах аммиака, растворитель фосфабензида — 95% этанол. Реагент для обнаружения тетрафенилэтилендифосфина диоксида — реактив Драгендорфа, модифицированный по Мюнье, а для гидразина гидрохлорида — реактив Эрлиха. На хроматограммах фосфабензид проявляется обоими реактивами. Чувствительность обнаружения тетрафенилэтилендифосфина диоксида — 0,5 мкг, величина Rf — около 0,58. В качестве свидетеля для обнаружения примеси тетрафенилэтилендифосфина диоксида рекомендуем использовать сам фосфабензид в количестве 10 мкг. Величина Rf фосфабензида — около 0,4. На хроматограммах интенсивность окраски пятна-маркера сравнима с таковой пятна от 1,5 мкг примеси тетрафенилэтилендифосфина диоксида, что соответствует ее содержанию в фосфабензиде около 0,75%.

Для определения примеси гидразина в фосфабензиде рекомендуем использовать 0,1 мкг гидразина гидрохлорида (Rf около 0,65). Чувствительность обнаружения примеси — около 0,02 мкг, что соответствует ее содержанию в фосфабензиде около 0,1%.

На основании полученных данных рекомендован следующий показатель качества — не менее 98,5% C₁₄H₁₅N₂O₂P в фосфабензиде в пересчете на сухое вещество.