Materials for the teaching of mixed infection in tuberculosis. On acidophilic bacilli

Abstract

The literature on the role of mixed infection in tuberculosis is immense. It suffices, for example, to point out that abstracts on this subject were the subject of special papers at the tuberculosis congresses of 1899, 1900, 1907, 1923, and 1925; and works in this direction continue to appear to this day.

Full Text

Литература, посвященная вопросу о роли смешанной инфекции при туберкулезе необозрима. Достаточно, например, указать, что рефераты на эту тему являлись предметом специальных докладов на туберкулезных конгрессах 1899, 1900, 1907, 1923 и 1925 годов; и до сих пор работы в этом направлении продолжают появляться. Это явление находится в зависимости от целого ряда причин: во 1-х—открытие туберкулезной палочки не внесло ясности в понимание причин многообразия клинического проявления туберкулеза и пришлось сразу же искать какой-то дополнительный фактор, во 2-ых толчок для развития этого учения был дан самим Р. Кохом, который первый описал наличие большого количества микрококков в капиллярах одного случая миллиарного туберкулеза, в 3-х,—в связи с новыми идеями в бактериологии само понятие и значимость симбиоза микробов получает другое значение и для трактовки понятия под новым углом зрения требуется повторная постановка опытов. В 4-х, благодаря росту бактериологической техники и появлению новых приемов возникает надежда найти еще что-нибудь новое, важное на этом поприще, что не могло быть получено до сих пор. В связи с последним необходимо указать, что даже в пределах известных микробов не все при туберкулезе оценены и даже отмечены. К типу последних относятся ацидофильные бактерии.

Открытые Мoro в 1900 г. в детском кале (хотя до него их выделял Heymann) эти ацидофильные бактерии послужили объектом исследований многочисленных авторов. Пока эти бактерии констатировались у детей, их присутствие представляло интерес только определенного характера; с тех же пор как появилась работа Образцова, в которой он отмечает наличие этих палочек у 57 различных животных, начиная от обезьян до моллюсков, не только в кишечнике, но в полости рта, на сосках и т. д.—трудно было отказаться от мысли, что эти бактерии своим постоянным присутствием и распространением не играют какой-» либо полезной роли в организме.

Работы Döderlein‘а об ацидофильных палочках, приспособившихся к жизни во влагалищном секрете и отождествляющих степень чистоты; работы и идеи Мечникова о значении этих бактерий как антагонистов по отношению к возбудителям гниения—делали правдоподобным предположение о присутствии этих бактерий и в воздухоносных путях, если в них развиваются микробы нагноения, всегда участвующие в воспалительных процессах в легких и в частности при туберкулезе. Можно ли их найти при туберкулезе и какова их роль—вот вопросы, которые нас интересовали.

Для выделения этих микробов мы вначале пользовались методом Heymann’a и засевали обработанную мокроту пo Kitasato на сахарный бульон с содержанием ¹/₂—³/₄°/о уксусной кислоты. В дальнейшем мы применяли более дешевую и простую среду (Б. Л. Мазур), которая готовится таким образом: свекла нарезается мелкими кусочками. Несколько таких кусочков (5—6) вкладываются в пробирки и стерилизуются по обычным правилам в автоклаве. Одновременно в колбе стерилизуется жидкость из расчета следующего состава:

После стерилизации горячий раствор разливается по пробиркам со свеклой (слой жидкости над свеклой должен быть равен высоте слоя свеклы) и пробирки ставятся в термостат на сутки—двое. За это время цвет жидкости становится насыщенно малиново-красным и среда готова к употреблению.

Проросших пробирок обычно не бывает.

Всего нами обследована мокрота 100 больных, среди них 92 туберкулезных, 4 случая абсцесса легких, 1 случай гангрены и 2 случая бронхоэктазий. Ацидофильные бактерии получены во всех случаях кроме гангрены. Среди обследованных мокрот было 5 взятых непосредственно из легкого на аутопсии с применением обычных предосторожностей в смысле загрязнений извне. В значительном проценте случаев (43%) мы одновременно с ацидофильными палочками выделяли и дрожжи. Совместный их рост обнаруживался еще до микроскопирования обильным выделением пузырьков газа на поверхности среды и сильным обесцвечиванием самой среды.

Ацидофильные палочки получались 2-х типов, которые вполне укладываются в типы Moro и Мережковского. Относительно биологии выделенных палочек мы, на основании наших исследований, ничего не можем добавить или изменить к тому, что о них известно.

Так как выделение этих палочек основано на выносливости их к кислоте, которая убивает остальные микробы, то мы задались целью выяснить—не окажутся ли ацидофильные палочки, выделенные в случаях доброкачественных форм туберкулеза, более кислотоустойчивыми, чем таковые же, выделенные в случаях с плохим прогнозом. Для этого мы часть нашего материала сеяли одновременно на нашей среде с содержанием ¹/₂%, 1% и 1¹/₂% указанной к-ты, надеясь, следовательно, в первом случае (доброкачествен, туберкулез) получить более высокий процент штаммов, растущих на средах с 1%% укусной к-ты, чем в случаях второго ряда.

На основании наших данных мы такого рода закономерности отметить не смогли.

Далее нами были поставлены опыты для выяснения влияния ацидофильных палочек на палочки Koch’a в условиях пробирки. В качестве туберкулезных штаммов мы употребляли гомогенные штаммы типа Аrlaing’a. Мы остановились на этих штаммах потому, что мы могли обнаружить их присутствие на мокроте целого ряда больных, и потому, что ' ими манипулировать нам казалось легче, тем более, что опыт в пробирке есть вообще только принципиальное отображение вопроса без того, чтобы такого рода взаимодействие имело место в условиях естественных.

Для этого мы засевали в мясопептонный бульон с содержанием виноградного сахара и ¹/₂% глицерина. одновременно Вас. acidophilus и В. Коch‘a;—через сутки бульон заметно мутнел—происходил быстрый рост ацидофильных палочек. Через 3—4 суток бульон начинал проясняться и на дне образовывался осадок. Еще через 2—3 дня на поверхности бульона появлялась пленка, которая принимала характер классической культуры tbc, а не гомогенного штамма.

В контрольных пробирках—(без ацидофильных палочек)—мы имели сплошное помутнение и такого характера пленка не образовывалась.

Нами были проделаны также опыты с подсевом туберкулезных палочек в бульон, в котором раньше росли в течение того или иного времени ацидофильные палочки. Для этой цели мы фильтровали бульонные культуры ацидофильных палочек различной давности через свечи Шамберлана L₃, фильтрат разливали стерильно по пробиркам и туда подсевали туб. палочки.

Отмеченный нами раньше при совместном выращивании обеих микробов характер влияния ацидофильных палочек на туб. культуру мы могли отметить и здесь при последовательных посевах, но в значительно меньшем проценте случаев—биологический факт, который согласуется с данными других авторов, изучающих различные феномены в смешанных культурах.

Таким образом, мы, на основании наших данных, можем сделать следующие выводы:

1) ацидофильные палочки постоянно встречаются при туберкулезе легких;

2) в условиях пробирки можно обнаружить влияние ацидофильных палочек на биологию туберкулезной культуры.