Differential effect of silibokhole and legalone on the antioxidant liver systems in carbon tetrachloride poisoning
- Authors: Batakov E.A.1
-
Affiliations:
- Samara State Medical University
- Issue: Vol 82, No 2 (2001)
- Pages: 105-106
- Section: Theoretical and clinical medicine
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/66605
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj66605
- ID: 66605
Cite item
Full Text
Abstract
The decrease of selenium concentration in liver tissue as well as the decrease of activity of superoxyddismutase and catalase, as well as the increase of peroxide lipid oxidation in carbon tetrachloride toxic lession are shown on rats. Simultaneous injection of legalone prevents the decrease of activity of superoxyddismutase and catalase but doesn’t recover the decreased concentration of selenium and only partially decreases the increased peroxide lipid oxidation in liver tissue.
Keywords
Full Text
В настоящей работе была поставлена цель количественно оценить величину активности супероксидцисмутазы (СОД), каталазы и селена в ткани печени при экспериментальном токсическом поражении четыреххлористым углеродом. Последний вводили крысам внутримышечно в смеси с оливковым маслом в концентрации 50% из расчета 4,0 г/кг массы ежедневно в течение 6 дней. На 7-й день животных под эфирным наркозом умерщвляли и удаляли у них печень. Из ткани печени готовили гомогенат на фосфатном буфере (0,05 М) для анализа на содержание малонового диальдегида (МДА), активность СОД и каталазы. Часть печени высушивали в сушильном шкафу при 100°С и использовали в последующем для определения содержания селена.
Кроме контрольных серий опытов на интактных крысах, были проведены серия опытов с введением четыреххлористого углерода, а также серия опытов с изучением влияния легалона (силимарина) — препарата, содержащего сумму фенилпропаноидов расторопши пятнистой. Летал он вводили внутрижелуд очно в дозе 25 мг/кг силибина — одного из фенилпропаноидов, входящего в его состав, в течение 6 дней одновременно с четыреххлористым углеродом, после этого на 7-й день крыс умерщвляли и их печень исследовали описанным выше методом. Каждая серия была проведена на 9 крысах.
Содержание селена изучали спектрофлуориметрическим методом. [4]. Концентрацию селена рассчитывали по калибровочной линии, построенной с учетом результатов измерения стандартных проб, и выражали в мкг/г сухой почечной ткани. Активность СОД печени определяли с тетразолием нитросиним в гомогенате печени, приготовленном при 0°С [1]; для анализа брали надосадочную жидкость. Активность выражали в АЕД (единицы активности) и пересчитывали на 1 мг белка ткани печени.
Активность каталазы в гомогенате печени крыс рассчитывали по методу [3], основанному на способности перекиси водорода при реакции с молибдатом аммония давать стойкое желтое окрашивание. Разрушение перекиси водорода каталазой снижает интенсивность окрашивания раствора, которое регистрируется фотометрически. Активность каталазы выражали в нмоль Н2О2/ с мг белка гомогената печени.
Перекисное окисление липидов изучали спектрофотометрически по определению концентрации МДА, отражающей степень перекисного окисления липидов, и рассчитывали в нмоль МДА на 1 мг белка гомогената печеночной ткани [2]. Повышение концентрации МДА свидетельствовало об усилении перекисного окисления липидов. Об активности СОД, каталазы и концентрации МДА в гомогенате судили по концентрации белка, определяемой методом Бенедикта. Все материалы были статистически обработаны, достоверными приняты различия при Р<0,05.
При введении четыреххлористого углерода крысам происходит значительное усиление перекисного окисления липидов в ткани печени. Установлено, что уровень МДА в гомогенате печени увеличивается с 0,31 ±0,03 нмоль МДА/мг белка до 0,7±0,05 нМ (Р<0,001). Одновременно происходит снижение активности антиоксидантных ферментов печени: СОД - с 9,61±0,88 до 1,51±0,38 АЕД на мг белка (Р<0,001), каталазы с 5,33±0,39 до 2,38±0,07 нмоль Н2О2/1 мг белка (Р<0,001). Таким образом интоксикация четыреххлористым углеродом снижает активность как СОД, так и каталазы, что и проявляется, очевидно, в повышении перекисного окисления липидов.
В таблице приведены результаты изучения влияния на этот процесс силибохола в сравнении с влиянием легалона. В качестве контроля взяты крысы, получавшие в течение 6 суток лишь четыреххлористый углерод.
Из таблицы следует, что силибохол статистически достоверно снижает перекисное окисление липидов в 2,2 раза, в то время как легалон — в 1,4 раза. Оба препарата — и силибохол, и легалон — повышают активность СОД соответственно в 4,5 и 4,0 раза. Активность каталазы также повышается в 3,5 раза при действии силибохола и в 4,5 раза при действии легалона.
Таблица 1. Влияние силибохола и легалона на перекисное окисление липидов (МДА), активность СОД и каталазы в гомогенате печени крыс при отравлении четыреххлористым углеродом
Воздействующий агент | МДА, нмоль/мг белка | СОД, АЕД/мг белка | Каталаза, нмоль Н2О2/мг белка | |
CC14 | 0,71±0,05 | 1,51±0,38 | 2,38±0,07 | |
Силибохол |
|
|
| |
и CC14 | 0,29±0,01 | 6,79±0,46 | 8,62±1,34 | |
Легалон и |
|
|
| |
CCL4 | 0,4810,03 | 6,17±1,77 | 0,77±0,38 |
Таким образом, силибохол и легалон являются эффективными препаратами, обладающими антиоксидантным действием. Очевидно, этот эффект объясняется гепатопротективным действием силибохола и легалона, препятствующих поражению печени. В то же время опыты проясняют и механизм этого явления, основанный, очевидно, на повышении активности СОД и каталазы. Эти ферменты инактивируют такие формы кислорода, как супероксидный радикал и перекись водорода. При этом не происходит столь интенсивной пероксидации липидов, в том числе липидов мембран клеток, и не нарушается структура печеночной ткани. Отсюда и адекватность термина “гепатопротективное действие” эффекту препаратов, полученных из экстрактов плодов растения расторопши пятнистой.
About the authors
E. A. Batakov
Samara State Medical University
Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Samara