The value of the immunofluorescence method in the diagnosis of respiratory viral infections

Abstract

Immunofluorescence according to Koons is one of the highly reliable methods for early diagnosis of respiratory viral infections [2, etc.].

Full Text

Иммунофлуоресценция по Кунсу является одним из высокодостоверных способов ранней диагностики респираторных вирусных инфекций [2 и др.]. Задачей нашего исследования являлась детальная разработка данного метода применительно к кли­нической практике. Мы использовали прямой способ иммунофлуоресценции для этио­логической расшифровки аденовирусной инфекции, гриппа и парагриппа. Обследова­ние больных выполняли по методике, разработанной в Институте вирусологии АМН СССР им. Д. И. Ивановского проф. Е. С. Кетиладзе и сотр. (1964). Для окраски пре­паратов применяли флуоресцирующие гаммаглобулины: противогриппозные (полива­лентные типов А-2, В и к вирусу гриппа А-2), противопарагриппозные (2 и 3-го типов) и к аденовирусам (2, 3, 4, 7-го типов), которые получали из Каунасского предприятия бактериологических препаратов Научно-исследовательского института эпидемиологии, микробиологии и гигиены, а также из Института эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи АМН СССР.

Проведено клинико-лабораторное обследование 967 детей, госпитализированных во 2-ю детскую больницу г. Казани с диагнозами: острое респираторное заболевание, пневмония, бронхит. Мазки из носа брали в первые три дня поступления в клинику и у 270 детей — повторно на следующий день. Всего исследовано 3846 препаратов, ок­рашенных флуоресцирующими антителами.

812 (83%) обследованных детей были моложе 3 лет (из них 254 — новорожден­ные). Вирусная этиология заболевания органов дыхания была расшифрована у 43% больных. Наиболее часто диагностировалась аденовирусная инфекция — у 27,6% де­тей, причем у новорожденных она была выявлена в 34,2% (у 87 из 254); грипп был установлен у 11,1% больных и парагрипп — у 4,3%.

Следует отметить, что из 458 детей с пневмонией вирусная природа заболевания констатирована у 222 (48,5%). Эти данные ставят под сомнение целесообразность госпитализации больных с диагнозом пневмонии в соматические отделения. Наши наблюдения показали, что такие дети могут быть источником внутрибольничных вспышек респираторных заболеваний. В связи с этим следует подчеркнуть высокую диагностическую ценность метода иммунофлуоресценции. Он обладает высокой чув­ствительностью у детей всех возрастных групп, в том числе у новорожденных, недо­ношенных и ослабленных. Комплексное иммунофлуоресцентное и серологическое обсле­дование 157 детей показало, что на первом году жизни этот метод позволял устано­вить точный этиологический диагноз в 61+5% (у 58 из 95 больных), в то время как серологический 4-кратный прирост антител к вирусным антигенам в парных сыворот­ках крови был получен у 24 больных, т. е. почти в 2,5 раза реже.

Чрезвычайно важно, как мы могли убедиться, применение метода иммунофлу­оресценции для определения длительности вирусовыделения. В литературе подобных работ мы не нашли, за исключением исследований, проведенных А. А. Алексеевой и сотр. (1972) у взрослых. В динамике прямым методом иммунофлуоресценции нами обследовано 102 ребенка, из которых 64 страдали аденовирусным заболеванием и 38 — гриппом. Материал от больных брали от 2 до 9 раз как в разгаре болезни, так и в периоде реконвалесценции до получения 2 отрицательных результатов анализа.

Длительность свечения аденовирусного антигена составляла от 11 до 37 дней (в среднем у всех обследованных—19,7+0,7 дня). Выявленные нами сроки вирусоноси­тельства (до 37 дней) более продолжительны, чем указываемые некоторыми авторами по результатам вирусологических исследований [4 и др.]. Кроме того, у 8 детей из 64 мы констатировали свечение аденовирусного антигена и в периоде клинического выздоровления еще в течение 3—10 дней. Среди них 7 больных первого года жизни родились недоношенными, а 2 страдали гипотрофией 1 и 2-й степени. Средняя дли-- дельность персистирования аденовирусов в организме составляла у них 25,7+2 дня (от 17 до 32), тогда как болезнь длилась значительно меньше времени (20,6+1,7 дня).

Свечение гриппозного антигена в клетках цилиндрического эпителия носа продол­жалось от 4 до 14 дней, в среднем 8,8+0,4 дня, причем из 25 больных с осложнен­ным течением гриппа у 15 сроки вирусовыделения были наиболее продолжительными — от 10 до 14 дней. Однако, в отличие от аденовирусной инфекции, носительства виру­сов гриппа в периоде выздоровления не было выявлено ни у одного из наблюдав­шихся детей.

Исследования показали, что метод иммунофлуоресценции является весьма ценным в распознавании этиологической природы респираторных вирусных инфекций в усло­виях детского стационара. Он позволяет установить точный клинический диагноз: через 3— 4 часа после взятия материала от больного, что имеет важное значение при осуществлении противоэпидемических мероприятий в отделении и в проведении свое­временного, целенаправленного лечения детей. Данный метод экспресс-диагностика обладает высокой чувствительностью, независимо от иммунологической реактивности больных. Кроме того, он может быть использован для определения длительности сохранения вирусного антигена в организме и дает возможность выявить случаи носительства аденовирусов реконвалесцентами.