Immunological studies for chronic gastritis

Full Text

Стремление к интегральной оценке процессов привело к более широкому исполь­зованию иммунологических методик и изучению иммунологической проблематики применительно к физиологии и патофизиологии желудка. Анализ полученных данных можно вести в двух направлениях — по Иммунологическим методикам и по нозологи­ческим формам. Данный обзор посвящен иммунологическому аспекту проблемы хро­нического гастрита в его экспериментальной и клинической проекциях.

1. Экспериментальный гастрит

В ряде работ было показано, что в процессе экспериментальной ауто (изогетеро-)-иммунизации возникают разнообразные морфологические изменения слизистой оболочки желудка, которые можно идентифицировать с гастритом. В опытах Фуджи острый и хронический гастриты возникали как после однократной, так и после повторных инъекций малого количества антигена.

Кафилл (1960) сообщил о работе Уильямса, которому удалось вызвать изменения типа хронического гастрита у морских свинок и кроликов, сенсибилизированных путем инъекций экстракта гомологичной желудочной слизистой. Фикса и соавт. (1964) констатировали у собак, получавших антиген — желудочную слизистую, редукцию желез уже через месяц после иммунизации.

Кондо и соавт. наблюдали за последствиями реакции антиген — антитело в стенке желудка (пассивная анафилаксия) морских свинок и собак, приводившей к почти полному разрушению главных желез желудка, заметной клеточной инфильтрации сли­зистой и вокруг небольших сосудов в подслизистой, повышению сосудистой прони­цаемости. Очевидно, иммунный цитолиз, вазолиз и клеточная инфильтрация участвуют в развитии поражения желудка. Эллиот изучал на электронномикроскопическом уров­не морфологическую картину при местной сверхчувствительности желудка кроликов. Через 30 мин.— 24 часа после разрешающей инъекции лошадиной сыворотки наблюда­лись утолщение стенки желудка, клеточная инфильтрация, расширение и застой в кровеносных сосудах, тромбоз, небольшие кровоизлияния в слизистой. Около расши­ренных сосудов определялся внеклеточный зернистый преципитат, париетальные клет­ки увеличивались и подвергались вакуолизации, эндоплазматический ретикулум их фрагментировался с последующей цитоплазменной вакуолизацией. Через 24 часа все эти изменения исчезали. Автор считает, что париетальные клетки, по-видимому, являются местом связывания антигена. Уолдер описал гистологические изменения у собак с гайденгайновским желудочком после пассивной иммунизации к париетальным клеткам: потерю нормальной подслизистой лимфоцитарной инфильтрации, вакуолиза­цию париетальных клеток, различную степень атрофии желез, интерстициальный отек; уменьшение главных клеток было выражено в меньшей степени. Ирвин (1966) указы­вает, что желудочная атрофия часто сопровождается выраженной круглоклеточной инфильтрацией.

Морига инъецировал собакам внутрикожно и внутримышечно гомогенаты аутоло­гической, изологической или гетерологической слизистой желудка в адъюванте Фрейнда 2 раза с промежутком в 2 месяца. У всех собак через 1 мес. обнаруживали в сли­зистой желудка отек и инфильтрацию лимфоидными клетками; через 2 мес.— атрофи­ческие изменения, которые были особенно резко выражены после инъекций гомо­генатов собственной слизистой желудка; через 3 мес.— увеличение количества соеди­нительной ткани. Атрофия желудка оставалась необратимой в течение 20 мес. Через 3 мес. после 1-й инъекции повышалась концентрация гаммаглобулина в сыворотке крови с последующим медленным снижением.

Крон иммунизировал 28 собак внутрикожными инъекциями аутологического или гомологического желудочного сока или гомогенатов слизистой оболочки желудка в те­чение 3—8 месяцев. В течение 1—2 недель развился поверхностный гастрит (данные биопсии), через 3—8 недель — воспаление всей толщи слизистой желудка и ее дегенерация (максимально поражались париетальные клетки), у некоторых собак — атрофия желез слизистой и фиброз. В сыворотке крови при помощи иммунофлюорес­ценции обнаруживались антитела против париетальных клеток и выявлялась кожная реакция при тесте с применяемым антигеном. Через 2—3 месяца из крови исчезали антитела против париетальных клеток, восстанавливалось нормальное состояние слизистой. Автор считает, что, вероятно, аутоантиген против париетальных клеток секретируется с желудочным соком.

Т. С. Сильченко и Ю. К. Кутлиев разработали экспериментальную модель хронического гастрита. Собакам вводили антигены, полученные фракционированием слизистой желудка, при этом возникали специфические антитела, не реагировавшие с тканевыми антигенами других органов. Гистологические и гистохимические исследо­вания слизистой подтвердили развитие хронического гастрита. Е. С. Брусиловский и В. Н. Медведева изучали биологическое влияние малых доз гастроцито-токсической сыворотки (ГЦС) на слизистую оболочку желудка собак (ГЦС получена путем иммунизации из слизистой оболочки анемизированной собаки). Исследование биопсированного материала в процессе введения ГЦС показало наличие отека слизистой, дистрофии клеток, увеличения количества ШИК-положительных вешеств в обкладоч­ных, главных клетках и клетках поверхностного эпителия (наблюдалась и регенера­ция). Поскольку цитотоксины, по И. И. Мечникову— антитела, эти наблюдения свидетельствуют о роли иммунных и аутоиммунных процессов в патогенезе хрониче­ского гастрита.

А.Е. Гельфман и соавт. (1959) иммунизировали 2 собак аутологичным антигеном, приготовленным из слизистой желудка собак. О степени иммунизации судили по реакции пассивной гемагглютинации по Бойдену. Собак забивали через 4 и 11 мес. после иммунизации. В наиболее ранние сроки были обнаружены явления поверхност­ного гастрита, в дальнейшем — дистрофические изменения железистых элементов, особенно в обкладочных клетках, в покровном эпителии — снижение кислых и нараста­ние нейтральных мукополисахаридов; появлялись очаговые скопления лимфоцитов, в более позднее время — умеренно-атрофический гастрит.

Наряду с морфологическими изменениями в слизистой желудка при эксперимен­тальной ауто (изогетеро-)-иммунизации изучались и функциональные изменения, в. первую очередь желудочная секреция, а также моторика.

Гроза изучал действие сенсибилизации лошадиной сывороткой на желудочную секрецию и моторику гайденгайновского желудочка. При этом значительно увеличи­валась желудочная секреция на пищевой раздражитель, а также содержание пепсина в желудочном соке, возможно за счет накопления гистамина и ацетилхолина на уровне слизистой оболочки желудка. При вызываемом натощак анафилактическом шоке наблюдалась желудочная гиперсекреция. Сенсибилизация сопровождалась зна­чительным увеличением частоты сокращений желудка, а также выраженным сниже­нием периода покоя. В дальнейших наблюдениях Гроза и соавт. установили, что при сенсибилизации собак в малом желудочке по Павлову резко увеличивалось выделение сока и повышалась концентрация пепсина, а в малом гайденгайновском желудочке секреция и количество пепсина в желудке резко увеличивались, при наполненном желудке секреция резко снижалась. Таким образом, аллергия обусловливает в желудках с сохраненной вагусной иннервацией повышенную секрецию с высокой концентрацией пепсина; обратные результаты наблюдаются при вагусной денервации желудочков, что свидетельствует о значении вагусной иннервации в развитии тканевых аллергических процессов. Теллец-Гирон и Рамос иммунизировали кроликов- пепсиногеном свиньи в смеси со стимулятором Фрейнда, а глобулиновые фракции полученных сывороток, содержащих антитела к пепсиногену, вводили в сердце крысам. Было обнаружено статистически значимое снижение объема и кислотности желудоч­ного сока и концентрации пепсиногена в плазме. Гласс, ссылаясь на Арнон и: Перлманн, указывает, что пепсин и пепсиноген обладают антигенными свойствами...

Введение пепсина кроликам позволило получить иммунную сыворотку, которая при повторных инъекциях крысам снижала объем желудочного сока, концентрацию НС1 и содержание пепсина [55].

Рааб и соавт. вызывали у крыс анафилактический шок, при этом было выявлено значительное увеличение уропепсиногена, что объясняется стимулирующим влиянием биологически активных веществ на клетки слизистой желудка.

Е. С. Брусиловский и В. Н. Медведева установили, что в процессе введения ГЦС имела место тенденция к повышению кислотности желудочного сока, пепсиногено- образующая функция и объем секреции существенно не менялись. А. Е. Гельфман и соавт. (1969) показали, что иммунизация животных вызывала через 3 недели умень­шение объема секреции из малого желудочка на мясо, хлеб, молоко и значительное увеличение концентрации свободной HCÎ. Через 1,5 месяца объем секреции стал еще меньше, а кислотность снизилась более чем в 2,5 раза. Протеолитическая активность после иммунизации возросла, изменились 'белковые фракции желудочного сока; после повторной иммунизации в желудочном соке резко увеличилось количество сиаловых кислот и Na.

В.П. Казначеев и А. Е. Гельфман установили, что при повторной иммунизации собак титр противожелудочных антител поддерживался на высоком уровне, одно­временно снижались объем секреции и кислотность желудочного сока, в последнем появлялось большое количество нейтральных мукополисахаридов (признак воспали­тельного поражения слизистой).

Изменения секреторной функции желудка наблюдали также Е. Г. Лемелева и О. Н. Богоявленская (1969), вводившие 5 собакам антиген из слизистой желудка здоровой собаки; авторы обнаружили уменьшение свободной НС1 у 3 собак, увели­чение у 2; общая кислотность увеличилась в 1,5—2 раза у 4 собак, переваривающая сила пепсина снизилась в 2—8 раз.

Гастроспецифическая сенсибилизация влияет на двигательную функцию желудка [9], вызывая увеличение тонуса желудка, средней амплитуды желудочных сокращений, уменьшение времени работы, увеличение периода покоя. Гроза и Корняну зарегистри­ровали у собак после сенсибилизации резкое учащение сокращений желудка, удлине­ние периодов сокращений, укорочение промежутков между ними.

В ряде исследований установлены в ходе сенсибилизации разнообразные измене­ния некоторых ферментных систем. Так, Паржизек и соавт. через месяц после введе­ния антигена определили у собак повышение активности кислой фосфатазы в клетках поверхностного эпителия и в железах, преимущественно в обкладочных клетках. Активность неспецифической эстеразы в клетках поверхностного эпителия 'снижалась. Через 2—3 месяца на фоне атрофии в некоторых обкладочных клетках активность кислой фосфатазы была резко повышена. Активность аминопептидазы в процессе иммунизации не изменялась.

Н. И. Пастернак, X. X. Шерматов подвергли 10 собак гепато- и 10 — гастроспеци­фической сенсибилизации в течение 3 мес. и обнаружили у животных второй группы наибольшее увеличение активности гиалуронидазы в первые дни; постепенное возвра­щение к исходному уровню происходило к 50-м суткам. Антигиалуронидаза характери­зовалась более выраженной стабильностью. Гастроспецифическая сенсибилизация приводила к угнетению продукции и выделения плазмина.

Следует отметить и ряд скептических высказываний. Так, по мнению некоторых авторов, нет еще убедительных данных, свидетельствующих о том, что хронический гастрит можно вызвать у экспериментальных животных иммунологическим методом [28, 47].

                 2. Содержание антител к слизистой желудка у здоровых людей

Результаты определения антител к слизистой желудка у здоровых людей противо­речивы. Так, Фикса и соавт. (1966), применяя реакцию связывания комплемента, а Блага и соавт— метод иммунофлюоресценции, не нашли желудочных антител у здо­ровых людей. Однако Гласс констатировал наличие париетальноклеточных антител у 2% здоровых людей в возрасте до 20 лет, у 6,8% — от 30 до 60 лет и у 16% лиц старше 60 лет; Ирвин (1966)—у 5% доноров (непрямая реакция иммунолюминесценции), О. Я. Гриншпун — у 4,1% доноров (реакция связывания комплемента и пассив­ной гемагглютинации), Т. С. Сильченко и соавт— у 6 из 80 обследованных (пассив­ная гемагглютинация).

Л. Т. Пяй считает, что свободные противотканевые антитела определяются у здо­ровых людей, их обнаружение не всегда свидетельствует о процессах аутоагрессии. Все же в высоких титрах противотканевые антитела выявляются при патологических состояниях, глубоких нарушениях иммунологической реактивности организма. Следует также иметь в виду, что так называемые нормальные аутоантитела и повышение их титров имеют место при усиленной функциональной нагрузке органов [13].

                3. Клинические исследования

В настоящее время в иммунологических исследованиях применяется значительное число различных методик, позволяющих составить мнение о характере аллергических нарушений как в эксперименте, так и в клинических условиях. Эти методики нашли свое применение и при анализе иммунологических нарушений, свойственных хрониче­скому гастриту.

1. Реакция Бойдена — пассивная гемагглютинация, позволяющая определять гумо­ральные антитела к слизистой желудка [3, 4, 17, 18].
2. Иммунофлюоресцентный метод (по Кунсу — Каплану), позволяющий определять клетки с антигенными свойствами —обкладочные клетки (комплексы антиген — антитело видны под ультрафиолетовым микроскопом после добавления флюоресцирую­щей иммунной сыворотки) [15, 16, 37, 40, 41].
3. Реакция связывания комплемента (РСК) [17, 29, 30, 31, 48].
4. Цитопатический эффект [3, 4 и др.].
5. Реакция поглощения антиглобулина (при соединении антиглобулина с антите­лами его титр падает) [II].
6. Реакция Штеффена — для изучения свободных неполных аутоантител [10].
7. Реакция Кумбса как косвенный иммунологический тест при хроническом гастрите [3, 4].

Мысль о том, что гастриты могут вызываться аутоиммунным механизмом, выска­зывалась довольно давно [53]. В связи с этим заслуживают внимания наблюдения Кафилл и соавт. над 47 больными гастритом. Оказалось, что антитела к париетальным клеткам определялись у 61% женщин с атрофическим гастритом и лишь у 12,5% муж­чин. Авторы отмечают частичную корреляцию между изменениями слизистой и нали­чием антител. Высший титр париетальных антител клеток определялся при pH желу­дочного сока 6,0 или выше после нагрузки гистамином. Нарушения абсорбции вита­мина В12 коррелировали с титром антител к париетальным клеткам. Авторы подчер­кивают значительное сходство картины атрофии и воспалительной клеточной инфиль­трации слизистой у больных атрофическим гастритом и хроническим атрофическим тиреоидитом, который рассматривается как заведомо аутоиммунное заболевание.

Ирвин и соавт. не могли обнаружить при гиперхлоргидрии антител к париеталь­ным клеткам слизистой желудка, в то время как при гистаминрефрактерной ахлор­гидрии, при редукции париетальных клеток (по данным биопсии) и при патологически высокой лимфоцитарной инфильтрации слизистой желудка такие антитела выявлялись часто. Однако при тяжелой форме атрофического гастрита с ахлоргидрией и выра­женной лимфоцитарной инфильтрацией антитела в сыворотке в ряде случаев не опре­делялись. Авторы придают важное значение клеточно-связанным антителам, которые разносятся лимфоцитами к различным органам и имеют большее значение в патоге­незе атрофического гастрита, чем антитела в форме сывороточных гаммаглобулинов.

По данным Холдмэйкер и Вельде, при тяжелых формах гастрита увеличивается количество антител против париетальных клеток. Райт и соавт. сопоставляли образо­вание антител с микроскопическими изменениями слизистой желудка. Оказалось, что количество антител к париетальным желудочным клеткам увеличивается по мере нарастания повреждения слизистой (самостоятельное повреждение слизистой или при пернициозной анемии). Правда, антитела к париетальным желудочным клеткам могут обнаруживаться и при отсутствии поражения слизистой. С другой стороны, при пора­жении желудка антитела могут отсутствовать. Фиассе и соавт. полагают, что высокая частота циркулирующих антител к париетальным клеткам при атрофическом гастрите свидетельствует о возможном иммунологическом механизме этой болезни.

Ничего не известно, однако, о влиянии циркулирующих антител на париетально­клеточную секрецию, об их взаимодействии с гастроном, эндогенным ингибитором желудочной секреции, присутствующим в анацидном желудочном соке. Л. И. Геллер и соавт. сопоставили морфологические изменения слизистой желудка и кислотообра­зующую функцию с частотой и титром аутоантител против обкладочных клеток сли­зистой желудка у 53 больных хроническим гастритом с разной степенью секреторной недостаточности и пришли к выводу, что у части больных секреторная недостаточность желудка может быть патогенетически связана с аутоантителами против обкладочных клеток. Т. В. Горошевская определяла у больных различными формами гастритов гуморальные антитела к слизистой желудка методом пассивной гемагглютинации по Бойдену, а у части больных — реакцией связывания комплемента (РСК). Антитела к антигену из слизистой оболочки желудка реакцией Бойдена и РСК у 5 больных с гиперацидным состоянием выявлены не были. У 1 из 3 больных хроническим атрофиче­ским гастритом был констатирован положительный эффект цитопатического действия лимфоцитов. Противожелудочные антитела обнаруживались чаще и в более высоком титре у лиц, страдавших хроническим гастритом с функциональной экскреторной не­достаточностью, в периоде обострения болезни и в конце курса лечения.

Краветц и сотр. полагают, что у людей образование антител к обкладочным клет­кам желудка является вторичным. Частота выявления противожелудочных антител зависит от тяжести и распространенности поражения слизистой желудка, активности гастритического процесса. По мнению В. П. Салупере (1969) и некоторых других авторов, наличие циркулирующих противожелудочных антител прямо коррелирует с морфологическим поражением желудка — хроническим гастритом. Это относится не только к первичному хроническому гастриту, но и к вторичным формам гастрита, в частности при язвенной болезни. Наличие противожелудочных антител заставляет думать о хроническом гастрите, однако далеко не во всех случаях этого заболевания появляются противожелудочные антитела (особенно у больных, перенесших резекцию желудка).

Таким образом очевидно, что хронический гастрит является лишь одним из условий для возникновения противожелудочных циркулирующих антител, ибо в про­тивном случае антитела присутствовали бы в сыворотке крови всех больных хрони­ческим гастритом, в том числе атрофическим. По мнению ряда авторов, циркулирую­щие противожелудочные антитела представляются следствием или признаком хрони­ческого гастрита и они, по всей вероятности, могут возникать у больных хрониче­ским гастритом только при наличии соответствующей генетической детерминирован­ности. По данным В. П. Казначеева и А. Е. Гельфмана, повышение проницаемости капилляров является одним из непременных условий для аутоиммунизации. При сопоставлении титра противожелудочных антител с экскреторной способностью желуд­ка, которую можно рассматривать как тест на проницаемость капилляров, у больных хроническим гастритом была выявлена статистически достоверная корреляция между этими процессами.

Приведенные выше данные подводят нас вплотную к анализу иммунологического механизма развития хронического гастрита в связи с оценкой реального патологиче­ского значения антител к клеткам желудка.

Как указывает В. П. Салупере, антитела обладают органоспецифичностью, особен­но к париетальным клеткам слизистой желудка, но вместе с тем практически отсут­ствует видовая специфичность противожелудочных антител; можно говорить о нали­чии определенной связи между гастритическим процессом в желудке и антителами, а определение противожелудочных антител в сыворотке крови является не только косвенным признаком хронического гастрита, но и показателем тяжести и распростра­ненности процесса. По мнению Фикса и соавт., иммунный механизм хронического гастрита можно считать подтвержденным. Лимфоцитарная инфильтрация желудочной слизистой при поверхностном гастрите и дегенеративные изменения слизистой при строфическом гастрите соответствуют патологической характеристике некоторых аутоиммунных болезней. Гласс пишет об аутоиммунном блокирующем патогенетическом механизме хрони­ческого гастрита. Однако следует считаться с возможностью того, что циркулирующие антитела направлены против различных клеточных и секреторных компонентов сли­зистой желудка и являются лишь показателем патологических процессов, происходя­щих в желудке [56]. При прогрессировании воспалительного поражения антигенный патологический материал может возникнуть в измененной слизистой и стимулировать образование антител в сыворотке крови больного. Возможно также, что эти антитела возникают против «скрытого» в нормальных условиях желудочного антигена, освобож­дающегося при патологическом процессе.

Другой точки зрения придерживаются Дониах и соавт. (1963). Она основана на том, что антитела, образуемые против антигена желудочной слизистой («скрытые» нормальные или патологические), участвуют в развитии атрофического процесса в слизистой желудка и являются причиной эволюции процесса атрофии. Следовательно, желудочная атрофия представляет собой аутоиммунное заболевание. В дальнейшем Дониах и соавт. (1966) пришли к выводу, что желудочный аутоиммунитет может иметь место в ранних стадиях хронического^ гастрита. Генетическое предрасположение и развитие желудочного аутоиммунитета свидетельствуют в пользу того, что образо­вание желудочных аутоантител интимно связано с патогенезом хронического гастрита. Но это еще не позволяет высказаться за или против того, что аутоиммунитет являет­ся первичным фактором в развитии данного болезненного процесса.

Наконец, некоторые полагают, что указанные антитела образуются в результате генетически обусловленной потери иммунологической толерантности к желудочным антигенам в иммунокомпетентном клоне образующих антитела клеток [39]. По мнению Тэйлор (1965), развитие гастритов с интересующей нас точки зрения возможно в рамках определенной гипотетической схемы. Небольшая травма слизистой может быть причиной острого гастрита, заканчивающегося полным выздоровлением. Однако в некоторых случаях под влиянием предшествующих иммунологических, эндокринных, пищеварительных факторов заболевание приобретает хроническое течение (органоопедифическая аутоиммунизация).

Хотя в ряде исследований в крови были обнаружены специфические аутоантите­ла, до сих пор остается неясным, в какой именно период болезни они образуются. Н. А. Левкова допускает, что аутоантитела предшествуют развитию заболевания. В пользу такого мнения говорит то, что введение готовых антител в организм живот­ного приводит к развитию заболевания с поражением тех органов, против которых вводились антитела, и что в период болезни специфические антитела исчезают. Поэто­му предположение, что антитела появляются в результате самой болезни, еще не­достаточно обосновано. По данным Н. А. Левковой, в развитии аллергических забо­леваний наряду с общим аллергическим состоянием организма играют роль и нару­шения местной реактивности тканей или органов, возникающие в результате действия специфических антител, вступающих в связь со своим антигеном, что приводит к раз­витию патологического процесса. Важно участие цитотропных антител, по-видимому, присущих нормальным тканям, но образующихся в избытке под влиянием внешних и внутренних факторов, что является причиной патологического процесса.

В.П. Салупере (1968) считает, что об участии механизмов аутоиммунизации в патогенезе некоторых форм хронического гастрита свидетельствует успешное лечение их иммунодепрессивными средствами, в том числе кортикостероидными гормонами.

Во внутреннюю среду организма постоянно поступают антигены экзо- и эндоген­ного происхождения. Поэтому лечение иммунодепрессивными средствами при хрони­ческом аутоиммунном гастрите должно быть длительным — в течение многих месяцев и даже лет.

Резюмируя, следует отметить, что представленные выше экспериментальные и клинические данные отчетливо демонстрируют важную роль иммунных процессов в патогенезе некоторых форм хронического гастрита.

About the authors

I. M. Rahmatullin

Kazan GIDUV them. V. I. Lenin

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com

professor

Russian Federation

O. S. Radbil

Kazan GIDUV them. V. I. Lenin

Email: info@eco-vector.com

Professor

Russian Federation

S. G. Vainshtein

Kazan GIDUV them. V. I. Lenin

Email: info@eco-vector.com

Candidate of Medical Sciences

Russian Federation

A. V. Chumakova

Kazan GIDUV them. V. I. Lenin

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation

References

Supplementary files