Effect of lidase on human abdominal adhesions

Abstract

The main or interstitial substance of the connective tissue contains many high-polymer mucopolysaccharides. According to Jackson (1954), the main moment in its formation is the secretory activity of fibroblasts.

Full Text

Основное или межуточное вещество соединительной ткани содержит много высокополимерных мукополисахаридов. По мнению Джексона (1954), главным моментом в его образовании является секреторная деятельность фибробластов.

В образовании основного вещества принимают участие и тучные клетки, продуцирующие гиалуроновую кислоту (кислый мукополисахарид—КМ), которая как бы цементирует клетки и волокна соединительной ткани.

Мы поставили перед собою задачу исследовать наличие КМ в спайках брюшной полости человека.

Из работ отечественных авторов (Б. С. Касавина и Л. И. Музыкант, 1958) известно, что при биохимических и гистохимических исследованиях в рубцовой ткани было обнаружено увеличенное содержание гиалуроновой кислоты. Применение гиалуронидазы тормозит развитие рубцовой ткани (Э. Е. Уманский и В. А. Самарова, 1953).

Хорошие результаты были получены при лечении гиалуронидазными препаратами контрактуры Дюпюитрена в начальных стадиях (И. Н. Шинкаренко, 1961).

При воздействии гиалуронидазы основное вещество набухает, растворимые части при этом могут уноситься током крови, что приводит к размягчению рубцов.

Наличие КМ во внутрибрюшных спайках человека, с нашей точки зрения, может дать основание применять гиалуронидазные препараты в целях воздействия на структуру спаек и сращений.

Нами исследовались спайки у 50 больных. Спайки иссекались во время операций, выполненных по поводу различных заболеваний органов живота, как острых, так и хронических. Спайки были взяты у 30 больных со спаечной болезнью живота, у 14 — с острым аппендицитом и у 6 — с острым холециститом.

Для выявления КМ с помощью толуидинового синего в спайках брюшной полости человека нами применялась методика, описанная Пирсом (1962). Наши наблюдения показали, что в свежих, состоящих из молодой клеточной, сосудистой и волокнистой грануляционной ткани спайках, взятых у одного и того же больного при остром воспалительном процессе в брюшной полости, обнаруживалось значительное содержание КМ (выраженная диффузная метахроматическая реакция межклеточного основного вещества). Заметных количественных различий содержания КМ в различных компонентах, образующих свежую спайку, не отмечено.

При исследовании различных спаек, взятых у одного и того же больного при хронических заболеваниях органов брюшной полости, было выявлено, что КМ находится в различных количественных соотношениях в разных компонентах, образующих спайку. Следует подчеркнуть, что эта особенность отмечалась в спайках больных, у которых имелось длительное существование спаечного процесса в брюшной полости.

Проведенные наблюдения в известной степени подтверждают наличие динамических преобразований, происходящих в спайках брюшной полости. Разнообразие реакций КМ может часто говорить о «возрасте спайки».

Следующим разделом нашей работы было исследование влияния гиалуронидазного препарата — лидазы на спайки брюшной полости. Мы использовали методику, применявшуюся И. Н. Шинкаренко: 0,1 лидазы растворяли в 20 мл ацетатного буфера (pH — 5,6). В этом растворе мы инкубировали гистологические срезы 24—48 часов в термостате при температуре 37° С.

По данным И. Н. Шинкаренко, инкубация гистологических срезов в ацетатном буфере без добавления лидазы не вызывала изменения метахромазии. В наших контрольных опытах мы также инкубировали срезы спаек в ацетатном буфере без добавления лидазы и не выявили какого-либо воздействия ацетатного буфера на метахромазию.

После воздействия на ткань спайки (in vitro) лидазой наблюдалось уменьшение, а в некоторых случаях полное исчезновение метахромазии в срезах при последующей окраске этих срезов толуидиновым синим. Через 24 часа инкубации отмечалось заметное снижение метахромазии в срезах. После 48 часов инкубации метахромазия резко снижалась, а в некоторых случаях исчезала полностью. Уменьшение и полное исчезновение метахромазии в срезах спаек человека при воздействии на них лидазой подтверждает специфичность действия фермента на кислые мукополисахариды, находящиеся в спайках брюшной полости.

Для проверки полученных данных нами проводились контрольные исследования, подтверждающие специфичность действия гиалуронидазного препарата лидазы на субстрат КМ.

Исследования основывались на свойстве тучных клеток, в отличие от гиалуроновой кислоты, сохранять способность к метахромазии, несмотря на воздействие на них гиалуронидазой. Это связано с особенностью химического состава тучных клеток, гепариноцитов, содержащих главным образом гепарин.

Г.Г. Непряхин (1956) нашел, что у человека тучные клетки обнаруживаются всюду, где есть соединительная ткань.

Наши наблюдения проводились следующим образом: срезы тканей, в которых находились тучные клетки (печень собаки, подкожная жировая клетчатка и др.), инкубировались в лидазе, растворенной в ацетатном буфере (pH 5,5) точно по той же методике, что и срезы спаек.

В срезах спаек после их инкубирования в растворе лидазы способность к метахромазии от толуидинового синего заметно уменьшалась или полностью исчезала. Тучные клетки в срезах спаек и особенно в срезах печени собаки даже после 48- часовой инкубации в растворе лидазы сохраняли почти прежнюю способность к метахромазии.

Проведенные нами наблюдения позволяют думать о возможном воздействии гиалуронидазных препаратов на ход послеоперационного заживления и, в частности, на предупреждение развития грубого спаечного процесса брюшной полости.