Диагностика ранних сроков беременности иммунологическим методом

Аннотация

В нашем предыдущем сообщении детально описаны иммунологические методы определения хорионического гонадотропина в моче беременных.

Полный текст

В настоящей работе мы ставили следующие задачи:

1. Проверить точность реакции торможения гемагглютинации для диагностики ранних сроков беременности и дифференциальной диагностики патологической бере­менности и подозрений на беременность.
2. С помощью количественного иммунологического теста исследовать динамику экскреции гонадотропина с мочой при нормальной беременности.

Иммунологический тест ставился в разные сроки нормальной беременности, при подозрении на маточную и внематочную беременность.

Мы исследовали утренние порции мочи 508 женщин (356 беременных, 89 с подо­зрением на маточную и 63 — на внематочную беременность). Контрольная группа состояла из 38 мужчин и 12 небеременных женщин. У всех 50 был получен отрица­тельный иммунологический тест.

а) Нормально развивающаяся беременность. Из 356 женщин с нормально раз­вивающейся беременностью сроком от 5 до 40 недель положительный результат полу­чен у 355, отрицательный — у одной со сроком беременности 29 недель.

б) Подозрение на беременность. У женщин с подозрением на беременность была задержка менструации от 3 до 15 дней.

Положительный результат иммунологической реакции получен у 32 женщин, отрицательный у 56 и сомнительный — у одной.

При дальнейшем исследовании беременными оказались 32 женщины. Срок после первого дня последней нормальной менструации у них составлял 36 и больше дней. Моча одной женщины с задержкой менструации в 3 дня дала отрицательный резуль­тат. Повторный анализ через неделю был уже положительным. У одной женщины с задержкой менструации в 14 дней мы получили сомнительный результат. Повторное наблюдение не обнаружило у нее беременности.

Остальные 56 женщин, с мочой которых иммунологическая реакция дала отрица­тельный результат, оказались небеременными.

в) Подозрение на внематочную беременность. Было исследовано 102 порции мочи от 63 женщин, поступивших в гинекологическое отделение с подозрением на внема­точную беременность.

У 30 из них одновременно с иммунологическим тестом ставилась реакция Галли — Майнини. У 6 женщин из этой группы получен положительный результат иммуноло­гического теста, у 24 — отрицательный. Биологические пробы были положительными у 5, отрицательными — у 25.

Положительные результаты иммунологической пробы были у 2 женщин с внема­точной беременностью, подтвержденной гистологически, у одной при сочетании ма­точной беременности с кистой желтого тела и апоплексией яичника, у одной с маточ­ной беременностью, у 2 с неполным абортом (у одной биологическая проба была отрицательна). У одной женщины с давно прервавшейся внематочной беременностью были получены отрицательные результаты обеих проб. У остальных 23 женщин кли­нически внематочная беременность не подтвердилась (у большинства из них было обострение хронических аднекситов, дисфункциональные маточные кровотечения).

При исследовании 66 порций мочи (от 33 женщин) ставилась только иммуноло­гическая реакция. Положительные результаты были получены в 14 порциях (от 10 женщин), отрицательные — в 52. Особую ценность приобретает иммунологический метод в динамике наблюдения при подозрении на внематочную беременность. Поло­жительным был иммунологический тест у 4 женщин с внематочной беременностью, у 3 с маточной и у 3 при неполном аборте.

У 23 женщин имелись или дисфункциональные маточные кровотечения, или обострения хронических воспалительных процессов придатков матки и околоматочных пространств.

Таким образом, из 388 женщин со сроком беременности от 4 до 40 недель мы получили положительный результат у 387. По нашим наблюдениям, начиная с 37-го дня после первого дня последней менструации положительные результаты получены в 99,5%. При отсутствии беременности точность иммунологического метода составляет 99,1%, что согласуется с литературными данными.

Таким образом, разобранный выше иммунологический тест можно применять для диагностики ранних сроков беременности и для дифференциальной диагностики бере­менности с некоторыми формами патологии (миома и беременность, внематочная беременность, пузырный занос, хорионэпителиома и др.).

Наряду с качественной реакцией в настоящее время подробно разработан и метод количественного определения гонадотропина в моче. Этот метод применяется для изучения экскреции гонадотропина в течение беременности, для оценки прогноза беременности при угрожающем или начавшемся аборте и во многих других случаях. Б его основу положена реакция торможения гемагглютинации. Тормозящая актив­ность мочи беременных сравнивалась с тормозящей активностью стандартного препа­рата гормона с известным количеством хорионического гонадотропина.

Для постановки реакции кроме мочи, иммунной сыворотки и 2,5% суспензии эритроцитов необходим еще стандарт препарата гормона.

Мы использовали в качестве стандарта ХГ-В, содержащий в ампуле 1500 ME, или ГБ-Г, содержащий в ампуле 500 ME. Реакцию ставят в 4 рядах, каждый из которых состоит из 10 пробирок. В первых двух рядах делают двукратные разведения про­фильтрованной мочи в солевом фосфатном буфере с pH 7,2, содержащем 0,5% нор­мальной кроличьей сыворотки по 0,4 мл в каждой пробирке. Первый ряд служит опытным, а второй — контрольным. В последующих двух рядах делают аналогичные двукратные разведения стандарта гормона из расчета 40 000 МЕ/л и 5 000 МЕ/л.

Затем в опытный ряд с разведенной мочой и в оба ряда разведений стандарта приливают по капле разведенной иммунной сыворотки. Иммунная сыворотка разво­дится в соотношении 10: 1 (так, если титр 1 : 1000, то разведение сыворотки — 1 : 100). В каждую пробирку контрольного ряда добавляют по 1 капле разводящей жидкости.

Во все пробирки приливают по капле эритроцитов, адсорбировавших антиген. Про­бирки встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 1,5 часа. Через 1,5 часа на дне пробирки образуется характерный осадок в виде кольца. Там, где кон­центрация хорионического гонадотропина достаточно высокая, чтобы тормозить гемаг­глютинацию, на дне пробирки образуется четкое кольцо с ровными краями. Во вто­ром (контрольном) ряду должны быть четкие кольца. С разведением мочи концен­трация гонадотропина постепенно падает настолько, что уже не может тормозить реакцию гемагглютинации. Реакцию торможения в ряду с разведением мочи сравни­вают с реакцией торможения в рядах с разведением стандарта. За конечную точку (титр) принимается то разведение мочи или стандарта, которое еще дает торможе­ние гемагглютинации.

Мы провели количественное определение экскреции хорионического гонадотро­пина у 288 женщин с нормальной беременностью сроком от 4—5 до 40 недель.

Наблюдение за экскрецией гормона в разные сроки беременности показывает, что постепенно с 4-й недели происходит нарастание количества гормона, достигая мак­симума к 9-й неделе (в среднем до 160 000 МЕ/л), затем идет на убыль и примерно с 14-й недели устанавливается на постоянном уровне (20—50 тыс. МЕ/л) вплоть до родов.

Наименьшее количество гонадотропина, которое можно определить с помощью нашего метода, — 600 МЕ/л. Обычно такой величины экскреция достигает на 7-й день задержки месячных.

Аналогичные данные получил Wide (1962). У него пик выделения находится меж­ду 60-м и 80-м днями после первого дня последней менструации с колебаниями от 80000 до 320 000 МЕ/л (в среднем 100 000 МЕ/л).

Затем наступает упадок экскреции гонадотропина в среднем до 20000 МЕ/л и остается довольно постоянным на этом уровне вплоть до родов. Lohmejer, Brosswitz (1964) при количественном определении гонадотропина нашли наибольшее выделение на 3-м месяце, где оно не превышало 50 000 МЕ/л в сутки.

По данным McCarthy (1964), в моче пик выделения приходится на 9—10-ю неделю с колебаниями от 44 000 ME до 195 000 ME в сутки.

ВЫВОДЫ

1. Иммунологический метод диагностики беременности — реакция торможения темагглютинации — отличается высокой степенью чувствительности и специфичности. Метод применим для дифференциальной диагностики при подозрении на беременность.

Самые ранние сроки беременности, определяемые реакцией пассивной гемагглюти­нации, — 37 дней после первого дня последней менструации.

2. Экскреция гонадотропина достигает максимума к 9-й неделе беременности, а с 14—15-й недели держится на постоянном уровне (20—50 тыс. МЕ/л) вплоть до родов.