On some conditions of survival of synthomycin-resistant dysentery bacteria in the faeces of patients

Abstract

Studies of recent years have characterized conditions of different viability of dysentery bacteria in faeces of patients, which has certain significance for dysentery epidemiology. As shown by studies of M. S. Idina (1959), periods of persistence of dysentery microbes in faeces depend on temperature: maximum period of detection of a pathogen in faeces at glacier temperature was equal to 61 days, at room temperature - 28 days.

Full Text

Исследованиями последних лет охарактеризованы условия разной жизнеспособности дизентерийных бактерий в испражнениях больных, что имеет определенное значение для эпидемиологии дизентерии. Как показали исследования М. С. Идиной (1959), сроки сохранения дизентерийных микробов в фекалиях зависят от температуры: максимальный срок обнаружения возбудителя в испражнениях при температуре ледника равнялся 61 суткам, при температуре комнаты — 28. Г. Г. Мирзоев (1959) отметил, что на выживаемость возбудителей дизентерии, кроме температуры и влажности, влияет количество синтомицина и левомицетина, выделяемых с фекалиями больных в разные сроки лечения их антибиотиками. В испражнениях больных впервые 2—3 дня антибиотикотерапии дизентерийные палочки обнаруживались в течение 5—11 дней, а в фекалиях больных после 10—11 дня лечения антибиотиками— в течение лишь 2—3 дней. При изучении выживаемости дизентерийных палочек в высохших испражнениях О. В. Бычковская (1955) установила, что при комнатной температуре чувствительные к сульфаниламидам дизентерийные бактерии Флекснера сохранялись от 2 до 9 дней, а резистентные—от 7 до 28 дней. Сульфаниламидо-чувствительные бактерии Зоине оказались жизнеспособными при тех же условиях от 5 до 23, а устойчивые к сульфаниламидам штаммы выживали от 12 до 31 дня.

Из испражнений больных, находившихся на излечении в инфекционной больнице, нами выделены 89 штаммов дизентерийных бактерий. Чувствительность выделенных культур к синтомицину определялась методом серийных разведений в бульоне Готтингера. Если исходить из критерия, что чувствительными следует считать штаммы, развивающиеся в жидкой среде при концентрации не выше 12 гаммов синтомицина в 1 мл (Е. Н. Куликова, 1958), то таких было 39 среди выделенных культур. 50 штаммов, выраставших в бульоне с содержанием синтомицина более 1 гаммов/мл, относились к синтомицинорезистентным. Таким образом, удельный вес синтомицино- устойчивых дизентерийных штаммов среди выделенных культур был довольно высоким и составлял 56,1%.

Для двух серий опытов были отобраны фекалии 41 больного. В этих испражнениях обнаружены дизентерийные бактерии, или высокорезистентные, или высокочувствительные к синтомицину. Первыми считались те штаммы, которые росли в бульоне с содержанием синтомицина 70 гаммов/мл и выше, вторыми — растущие при концентрации антибиотика не более 1,5 гамма/мл. Больные острой дизентерией были госпитализированы на 5—10-й дни болезни, больные хронической дизентерией — на 2—7-й дни обострения болезни. Фекалии в виде кашицеобразного стула без видимых примесей слизи и крови отбирались на 1—2-й дни лечения антибиотиками в комплексе с сульфаниламидными препаратами.

Следует отметить, что высокорезистентные бактерии выделены от больных с обострением хронической дизентерии, высокочувствительные штаммы — от больных острой дизентерией. Это согласуется с данными К. И. Стариковой (1958), В. Ф. Максимова (1962) и некоторых других исследователей, наблюдавших более частое выделение синтомицинорезистентных культур от хронических больных.

Все выделенные дизентерийные культуры были типичными, однако синтомицинорезистентные штаммы в несколько меньших титрах, чем чувствительные, агглютинировались диагностическими сыворотками.

В первой серии опытов использовано 20 проб фекалий, 10 из которых содержали бактерии Флекснера (серотипа «с»), 10 — бактерии Зонне. Каждый вид дизентерийных бактерий был представлен поровну синтомициноустойчивыми и синтомициночувствительными формами возбудителей. Испражнения в бюксах сохранялись при комнатной температуре (18—22°) в темном месте. Ежедневно из каждой порции фекалий производились высевы на чашки с дифференциально-диагностической средой. Для этого 0,5 фекалий эмульгировались в 5 мл стерильного физиологического раствора поваренной соли, и 0,1 мл эмульсии распределялось шпателем на чашке с агаром Плоскирева. Остатком материала на шпателе засевалась вторая чашка со средой Плоскирева, а затем — чашка со средой Левина. После суточного инкубирования посевов в термостате изучались лактозонегативные колонии, из которых выделялись чистые культуры и идентифицировались по обычной схеме бактериологической диагностики дизентерии. Гибель дизентерийных бактерий регистрировалась в тот день, после которого дальнейшие 12-кратные высевы были отрицательными.

Антибиотикочувствительные бактерии погибали в испражнениях раньше антибиотикорезистентных форм возбудителей. Чувствительные к синтомицину бактерии Флекснера выживали в фекалиях от 6 до 10, в среднем 8 дней, резистентные — от 9 до 13, в среднем 11 дней. Синтомициночувствительные бактерии Зонне сохранялись в фекалиях 11—13, в среднем 12,4 дня, резистентные—13—17, в среднем 15,0 дней.

Во второй серии опытов, кроме изучения сроков выживания дизентерийных бактерий в фекалиях больных, одновременно проводились исследования по количественному учету их. При разработке метода количественного учета нами использованы работы Т. А. Авдеевой и М. С. Идиной (1953), М. С. Идиной (1958, 1959, 1960). Из 21 порции фекалий, взятых для этих опытов, 11 содержали бактерии Флекснера (серотипа «с»), 10 — бактерии Зонне. Среди них было 11 синтомицинорезистентных и 10 синтомициночувствительных штаммов.

В фекалиях, находившихся в холодильнике, антибиотикочувствительные бактерии Флекснера сохраняли жизнеспособность в среднем 8,8 дня, при комнатной температуре — 6 дней. Синтомицинорезистентные палочки Флекснера выживали в холодильнике в среднем 13,8 дня, при комнатной температуре—10,3.

Аналогичны результаты и с бактериями Зонне, среди которых синтомицино-чувствительные выживали при 4—6° в среднем 15 дней, при температуре 18—22°— 10,6 дня. Синтомицинорезистентные штаммы палочек Зонне высевались из фекалий, находившихся в холодильнике, в среднем до 17,2 дня, при комнатной температуре — до 14,2 дня.

Достоверность полученных результатов подтверждена расчетами дисперсионного анализа по методу Р. А. Фишера.

Как показали наши исследования, почти во всех порциях фекалий от больных острой формой заболевания количество дизентерийных палочек в первый день исследования превышало количество таковых в фекалиях хронических больных. Если в испражнениях больных острой дизентерией их было от 400 000 до 820 000 в 1,0, то в фекалиях хронических больных — от 200 000 до 520 000. Как уже было указано, первые содержали высокочувствительные к синтомицину штаммы, вторые высокорезистентные.

При наблюдении за динамикой отмирания дизентерийных микробов в фекалиях установлено, что количество синтомициночувствительных бактерий в фекалиях, хранившихся при комнатной температуре, начинало снижаться со второго дня. При тех же условиях хранения фекалий количество синтомицинорезистентных дизентерийных бактерий в первые два дня не уменьшалось, в некоторых случаях даже увеличивалось. Лишь с третьего дня количество их шло на убыль. По-видимому, процесс отмирания синтомициночувствительных возбудителей в фекалиях больных протекает несколько интенсивнее, нежели синтомицинорезистентных. Высеваемость возбудителей из фекалий в большинстве случаев прекращалась после того дня, когда количество их уменьшалось в 300—3900 раз.

Таким образом результаты описанных исследований подтверждают данные, полученные нами ранее в опытах с искусственно инфицированными испражнениями (Казанский мед. ж., 1962, 5).

ВЫВОДЫ

1. Высокочувствительные к синтомицину дизентерийные бактерии обнаружены в фекалиях больных острой дизентерией, высокорезистентные — в фекалиях больных хронической формой заболевания. Обсемененность первых больше, чем вторых.
2. В фекалиях дизентерийных больных высокорезистентные к синтомицину бактерии Флекснера и Зонне выживают более длительно, чем высокочувствительные.
3. Постепенное отмирание высокочувствительных к синтомицину дизентерийных бактерий начинается со второго дня, высокорезистентных — с третьего дня хранения фекалий при комнатных условиях.