On the question of the choice of immunizing material for active immunization against diphtheria

Abstract

The problem of anti-diphtheria active immunization, approaching its practical solution, still needs to be covered by the question of the choice of immunizing material.

Full Text

Проблема противодифтерийной активной иммунизации, приближаясь к своему практическому разрешению, нуждается еще в освещении воп­роса о выборе иммунизирующего материала. В качестве последнего, как известно, были предложены: 1) дифтерийный токсин (Дзержговский, Scholtz); 2) ослабленный токсин—старый (Gleany и Hopkins) и свежий, обработанный физико-химическим способом (Gleany, Hopkins, Ramon, Potter); 3) смеси токсин-антитоксина—гипонейтральные (Behring, Park, Zingher), нейтральные и гипернейтральные (Kassowitz, Opitz, Löwenstein, Bieber, Löwenthal, Renault, Lewy); 4) дифтерийные бактерии—убитые теплом (Wood, Reith, Fraser, Dipson, Petruschky) и живые (Bohme и Riebold).

Существование такого многообразия способов иммунизации побудило нас произвести ориентировочные опыты на морских свинках с целью выяснить, какой способ активной иммунизации лучше предохраняет от заражения дифтерийными бациллами, и при каком переносится организмом большее количество токсических доз. Считаем своим долгом оговориться, что, за недостатком животных, нам нельзя было поставить опыты шире и придать им большую систематичность; все же мы решили поделиться полученными результатами.

Иммунизация свинок была произведена: анатоксином, смесями ТА (токсин-антитоксин), вакциной из дифтерийной культуры и т. наз. ана­токсином «totale» Ramon’а.

Нами было заготовлены:

1. 4 анатоксина по способу Ramon’в ¹) (токсины, формалинизиро­ванные 3% и выдержанные при 40°—42° в термостате втечение 30 дней; перед приготовлением анатоксина устанавливалась DLM, — минимальная смертельная доза, токсина, из которого он готовился; после 30-дневной выдержки при 40°—42° анатоксины проверялись, в количестве 5 к. с., на свинках весом 400—500 гр.), а именно: 1) анатоксин A (DLM токсина —0,0035), 5 к. с. которого у свинки не вызывали ни инфильтрата, ни уменьшения веса; 2) анатоксин I (DLM токсина—0,003), 5 к. с. которого у свинки также не вызывали ни инфильтрата, ни падения веса; 3) ана­токсин II(DLM токсина—0.002), 5 к. с. которого инфильтрата у свинки не вызывали, причем вес животного увеличился; 4) анатоксин VI (DLM токсина—0,003), 5 к. с. которого ни инфильтрата, ни падения веса у свинки тоже не вызывали.
2. Смеси ТА из токсина с L_o=0,1 и сыворотки, содержащей 250 АЕ в 1 к. с.: 1) смесь I—L_o+2 АЕ в 1 к. с., 5 к. с. которой, впры­снутые свинке до 500 гр., дали небольшой инфильтрат, рассосавшийся в 5 дней; 2) смесь II—Б_о+1 АЕ в 1 к. с., 5 к. с. которой дали средний инфильтрат, рассосавшийся в 7 дней.
3. Вакцина из лабораторной токсической «Pasteur’овской» культуры, содержавшая 1 миллиард тел в 1 к. с.; вакцина эта подвергалась прогреванию втечение часа до 70°, употреблялась без прибавления антисептических веществ.
4. Анатоксин «totale» Ramon’а—свежеприготовленная семиднев­ная «Раstеur’овская» культура (на мартыновском бульоне), формали­низированная 3% и выдержанная 30 дней при 42°, 5 к. с. которой, будучи впрыснуты свинке весом 853гр., вызвали падение веса, большой ин­фильтрат и смерть через 12 дней.

Для установления качества и дозировки каждого из заготовленных нами анатоксинов и определения промежутка времени от иммунизации до проверки нами были произведены следующие предварительные опыты на свинках (см. таблицу I):

Из таблицы этой видно, что анатоксины (за исключением А), вве­денные в количестве 5 к. с., иммунизируют свинок через 16—19 дней против 25—30 DLM (40 и 50 DLM еще не переносятся); через 30 дней свинка переносит уже 100 DLM (от 500—погибает).

Нами были также параллельно поставлены опыты со смесью ТА (L_o+2 АЕ): результаты видны из таблицы II.

Как показывает таблица II, смесь I. введения в количестве 5 к. с., через те же сроки (16—24 д.) предохраняет свинку только против 10 DLM (при наличии большого инфильтрата); от 15—25 DLM все свинки погибли.

Из предварительных опытов (таблицы I и II) т. о. выяснилось, что 1) значительный иммунитет получается через месяц; поэтому проверка иммунизированных свинок через этот срок нам казалась рациональной; 2) 50—100 DLM могут служить единицей для измерения у свинок через 1 месяц иммунизирующей силы наших анатоксинов: 8) наша смесь I уступает, по иммунизирующей силе, анатоксинам.

По проверке анатоксинов на флокулирующую способность их наи­лучшим оказался анатоксин I, который и был выбран для иммунизации в главном опыте. В этом последнем иммунизация была произведена всеми перечисленными выше средствами в дозе 0,5, 1 и 2 к. с. Промежутки: 8—9 дней между ин’екциями и месяц—между последним впрыскиванием и испытанием. Проверка иммунитета производилась в одной серии жи­вотных токсином, в другой—живой, свежевыделенной культурой (клини­чески и бактериологически установленный случай дифтерии), минимальная смертельная доза которой для свинки в 500 гр. равнялась ¹/₂₀ петли в 2 мгр.). Результаты главного опыта представлены на таблицах IIIи IV.

Из таблиц III и IV главного опыта видно:

1) По отношению токсина: а) наибольшую устойчивость оказали свинки, иммунизированные анатоксином I (против 50 DLM) и анатоксином «totale» Ramоif’а (против 100—200 DLM); б) гораздо меньшую устой­чивость обнаружила свинка, иммунизированная смесью II(L_n+1 АЕ), против 25 DLM (у через месяц); свинка же, иммунизированная смесью I (L_o+2 АЕ), вовсе не обнаружила устойчивости против 25 DLM (через сутки); в) вакциною не удалось иммунизировать свинку против 25 DLM (свинка пала через 2 суток).

2) По отношению дифтерийной культуры: а) устой­чивее всех оказались животные, иммунизированные анатоксином I (от 1 и 2 петель свинки выжили, от 5— через 12 дней) и анатоксином «totale» Ramon’а (от 1 и 2 петель свинки выжили, от 5— через 25 дней); б) меньшую устойчивость обнаружила свинка, иммунизированная смесью II (от 2 петель через 15 дней); свинки же, иммунизированные смесью I, от той же дозы и даже от 1 петли пали через сутки; в) из свинок, иммунизированных вакциной, испытанная 1 петлей культуры жила 15 дней, испытанная же 5 петлями пала на 2 сутки.

На основании результатов настоящей работы мы не считаем воз­можным делать какие-либо окончательные выводы, но можно с большой вероятностью предположить, что иммунизация анатоксином (обыкновенным или «totale» Ramon’а) дает наилучшую устойчивость как против диф­терийных бацилл, так и против их токсинов.

D-r E. I. Spessivzeff (Ufa). Zur Frage über die Auswahl des Immunisierungmaterials bei aktiver Diphtherieimmunisierung.

Auf dem Grunde seiner Versuchen hält D-r S. für möglich mit grossem Grade der Wahrscheinlichkeit vorauszusetzen, dass die Immuni­sierung mit dem Anatoxin (gewönlichem oder «totale» von Ramon) die beste Resistenz wie gegen den Diphtheriebacillen, so auch gegen ihren Toxinen gibt.

¹ Необходимо отметить, что эти анатоксины были приготовлены из токсинов, выдержанных до 1 года. Наблюдая, что такие анатоксины переносятся очень легко живым организмом, мы хотели заодно убедиться, в какой мере они иммунизируют.