Сравнительная характеристика показателей иммунограммы больных туберкулезом легких и здоровых доноров

Полный текст

Исход борьбы микро- и макроорганизма зависит от полноценности бактерицидных свойств фагоцитарной системы и усиливающих их реакций иммунной системы. Микробактериальная инфекция существенно снижает свойства клеток фагоцитарной системы и нарушает центральное звено развития иммунных реакций — представление чужеродного антигена лимфоидным клеткам [6]. Многочисленными исследованиями показана значительная poль в развитии и поддержании противотуберкулезной устойчивости лимфоцитарных популяций. В частности, огромное значение отводится количественному и качественному состоянию фракций CD4+ и CD8+ [1, 7, 9]. В то же время неоднозначно оценивается роль гуморальных факторов в целостной системе механизмов противотуберкулезной защиты [2, 8]. Иммунологические реакции при туберкулезе тесно связаны с типом иммунологического ответа. В зависимости от преобладания у больного гуморального или клеточного ответа можно прогнозировать течение заболевания и определять тактику лечения — целесообразность усиления тех или иных иммунных реакций или их подавления [3]. В этой связи важное значение приобретает изучение наиболее типичных нарушений иммунного статуса при различных формах туберкулеза легких и возможных механизмов их развития для решения вопроса о дальнейшей тактике лечения.

С этой целью нами исследован иммунный статус двух репрезентативных групп. 1-ю группу составили 58 больных инфильтративным туберкулезом легких в фазе распада и обсеменения, БК+, с преобладанием экссудативно-альтеративного компонентов специфического воспаления, 2-ю — 30 здоровых доноров.

Объем поражения легочной ткани составил от 1—2 до 14—15 сегментов. Клинические проявления болезни соответствовали объемам поражения и сопровождались интоксикационным синдромом различной выраженности. Поэтому больные были подразделены на подгруппы в зависимости от числа пораженных сегментов легких. Подгруппа 1а включала больных с объемом поражения легочной ткани до 5 сегментов, подгруппа 16 — более 5 сегментов.

Фенотипирование лимфоцитов проводили в реакции непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител серии И КО (РОНЦ РАМН) и Becton Dickinson Immunology Systems на проточном цитофлюориметре FACScan Becton Dickinson к рецепторам CD34-, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, HLA-DR [7]. Кроме того, определяли активность системы комплемента (СН₅₀) [8], а также уровень циркулирующих иммунных комплексов. Гуморальный иммунитет оценивали по количеству иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG) в периферической крови турбидиметрическим методом [4]. Для оценки неспецифических факторов резистентности исследовали фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН), фагоцитарное число (ФЧ), абсолютный фагоцитарный показатель (АФП), проводили нитросиний тетразолевый тест в спонтанной и стимулированной реакциях (НСТсп и НСТст). У больных инфильтративным туберкулезом легких анализировали результаты кожных туберкулиновых проб (проба Манту с АТК в разведении 1:10000). Вся полученная информация была статистически обработана с использованием программно-математической системы Analysis. Данные в таблицах представлены в виде М± δ.

Характеристика компонентов иммунограммы и факторов неспецифической резистентности у обследованных пациентов и здоровых лиц приведена в табл. 1—3. Установлено, что инфильтративный туберкулез вызывает выраженную лимфопению, которая прогрессивно нарастает по мере увеличения объема поражения легочной ткани (табл. 1, рис. 1). Так, у больных подгруппы 16 лимфопения была более выраженной (1,53±0,58), чем у здоровых доноров (2,02±0,54; Р<0,05) и в подгруппе 1а (1,83±0,52; Р<0,05). Средние величины абсолютного содержания Т-лимфоцитов (CD3+) также прогрессивно снижались по мере увеличения объема поражения, при этом получена достоверная обратная корреляция (r = —0,53). Однако количественных сдвигов в субпопуляционном клеточном составе не происходило, а снижение уровня CD4+ лимфоцитов у больных подгруппы 16 не было достоверным (Р>0,05).

 

Таблица 1. Популяции и субпопуляции лимфоцитов в периферической крови (абс. значение 10⁹ ± St. dev.)

Обследованные группы	Лимфоциты	CD3	CD4	CD8	CD16	HLADR	CD19	CD4/CD8
Группа 1 -я	1,66±0,58	1,22±0,49	0,80±0,33	0,63±0,28	0,28±0,13	0,23±0,22	0,14±0,10	1,36±0,53
1а	1,83±0,52	1,33±0,42	0,88+0,22	0,64±0,32	0,31±0,14	0,18±0,11	0,19±0,10	1,57±0,59
16	1,53±0,58	1,14±0,53	0,74±0,38	0,62±0,24	0,26±0,11	0,26±0,27	0,11±0,09	1,22±0,54
Группа 2-я	2,02±0,53	1,51±0,44	0,84±0,24	0,63±0,23	0,29±0,14	0,21±0,13	0,15±0,12	1,46±0,49
Р1,2	<0,05	<0,05
Р2,1б	<0,05	<0,05
Р2,1а	<0,05
Р1а,1б							<0,05	<0,05

 

 

Рис. 1. Процентное количество популяций и субпопуляций лимфоцитов в периферической крови.

 

Таблица 2. Показатели фагоцитарных свойств нейтрофилов в периферической крови

Обследованные группы	ФАН	ФЧ	АФП	НСТсп	НСТст
1-я	72,45±13,67	5,04±1,41	18541±12208	34,28±20,21	54,93±21,46
1 а	77,83±10,42	5,93±1,61	14275±5197	37,00±22,15	53,65±21,62
1 б	68,65±14,39	4,41±0,79	21553±14603	32,35±18,47	56,75±21,08
2-я	75,50±15,75	5,76±2,04	11460±5196	14,08±15,26	29,23±26,17
Р1,2			<0,05	<0,05	<0,05
Р2,1б		<0,05	<0,05	<0,05	<0,05
Р2,1а				<0,05	<0,05
Р1а,1б	<0,05	<0,05

 

Таблица 3. Уровень иммуноглобулинов, комплемента и циркулирующих иммунных комплексов

Обследованные группы	ЦИК	Комплемент	IgA	IgM	IgG
1-я	0,039±0,020	65,0±16,4	2,73±1,14	2,28±0,91	20,58±5,97
1 а	0,037±0,016	63,3±13,7	2,68±0,67	2,52±0,91	18,96±5,89
1 б	0,040±0,023	66,2±17,9	2,76±1,38	2,11±0,88	21,71±5,76
2-я	0,026±0,013	55,1±9,4	2,14±0,77	2,08±0,75	14,07±2,50
Р1, 2	<0,05	<0,05	<0,05		<0,05
Р 2, 16	<0,05	<0,05	<0,05		<0,05
Р 2, 1а P 1а, 16	<0,05		<0,05		<0,05

 

Хорошо известно, что функциональная активность лимфоидной системы зависит не только от абсолютного количества лимфоидных популяций, но и от соотношения CD4+/CD8+. Как видно из табл. 1, нами выявлено достоверное падение индекса CD4+/CD8+ с 1,46 до 1,22 (Р <0,05) только в подгруппе 1 б, что свидетельствовало о выраженном дисбалансе субпопуляционного состава в сторону увеличения количественного уровня Т-супрессоров. Подобная закономерность у больных инфильтративным туберкулезом легких отмечена в работе Т.И. Морозовой и соавт. [5]. Ими показано, что инфильтративный туберкулез протекает на фоне дефицита общего числа Т-лимфоцитов и Т-хелперов-индукторов (CD4+). Увеличение объема поражения легочной ткани инфильтративным туберкулезом или сочетанное поражение бронхолегочного аппарата инфильтративным туберкулезом и хроническим гнойно-обструктивным бронхитом вызывало у больных еще большую депрессию числа CD3+ и CD4+, усугублялась диспропорция CD4+/CD8+, повышалось содержание в плазме крови количества иммуноглобулинов А и G, угнеталась комплементарная активность [5]. При анализе изменения субпопуляционного состава лимфоидных клеток нами обнаружена следующая закономерность: у больных подгруппы 1а многие сдвиги в иммунограмме указывают на компенсаторное стимулирование иммунной системы. При нарастании объема и тяжести поражения легочной ткани специфическим процессом (подгруппа 16) отмечается своеобразный "срыв”, отражаемый многими показателями иммунограммы, в том числе снижением числа В-лимфоцитов (CD19+) и NK (CD16+).

Экссудативный тип течения воспалительного процесса у больных подтверждается фактом резкого усиления функциональной активности гуморального звена иммунитета, выражающегося в повышенном синтезе IgA и IgG. Их уровни возрастали прямо пропорционально тяжести заболевания и объему поражения легочной ткани (табл. 2, рис. 2). У больных подгруппы 16 были обнаружены максимальные уровни IgA и IgG в сыворотке крови — соответственно от 2,14±0,77 до 2,76±1,38 г/л (Р<0,05) и от 14,07±2,5 до 21,71±5,76 г/л (Р<0,05). Считается, что специфические антитела, принимающие участие в механизмах защиты, относятся к классу IgG [3]. По мере увеличения объема поражения получена достоверная обратная корреляция с пробами Манту (r=—0,56). Комплексный учет состояния Т- и В-системы иммунитета и факторов специфического гуморального и клеточного ответа показа, что увеличение содержания IgA при низкой потенциальной активности Т- клеток в подавляющем большинстве случаев отмечается при неблагоприятной динамике заболевания. При сохраняющемся у больных в процессе лечения преобладании гуморального ответа положительных клинико-рентгенологических сдвигов не наблюдается. Наиболее неблагоприятным признаком в клиническом отношении является наличие у больного одновременно высокого уровня ПТАТ и IgA при отрицательных показателях РБТЛ с ППД и ФГА [3].

 

 

Рис. 2. Уровень иммуноглобулинов классов А, М, G.

 

С увеличением объема поражения легочной ткани и тяжести клинической картины уровень ЦИК и активность системы комплемента также достоверно возрастали. Особенно это относится к уровню ЦИК, который в подгруппе 16 достигал 0,04±0,023, что было достоверно выше, чем у здоровых доноров (0,026±0,013; Р<0,05) и в подгруппе 1а (0,037±0,016; Р<0,05).

Микобактерии туберкулеза принадлежат к внутриклеточным организмам и обладают способностью персистировать в мононуклеарных фагоцитах и только активированные мононуклеарные фагоциты могут оказывать бактерицидный эффект [8]. При анализе фагоцитарного звена в подгруппах 1а и 1б мы наблюдали положительную динамику показателей в сравнении с таковым у здоровых доноров. Стимуляция фагоцитарной активности проявлялась в увеличении АФП, НСТсп и НСТст при достоверном подавлении фагоцитарной активности (ФАН и ФЧ) в подгруппе с наиболее распространенными формами легочного туберкулеза (подгруппа 16).

Таким образом, при инфильтративном туберкулезе легких в экссудативно-альтеративной фазе воспаления отмечается активация гуморального звена иммунитета, сопутствующая наиболее тяжелым формам заболевания. На этом фоне показатели клеточного звена иммунитета после кратковременного компенсаторного стимулирования у больных с небольшим объемом поражения легочной ткани имеют тенденцию к снижению, что особенно достоверно проявляется на уровне кожных реакций замедленного типа на туберкулин и соотношения CD4+/CD8+ субпопуляций лимфоцитов.

Об авторах

О. В. Фирсов

Республиканский медицинский диагностический центр; Казанская государственная медицинская академия последипломного образования

Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Россия

Ю. Д. Слабнов

Республиканский медицинский диагностический центр; Казанская государственная медицинская академия последипломного образования

Email: info@eco-vector.com
Россия

И. Г. Мустафин

Республиканский медицинский диагностический центр; Казанская государственная медицинская академия последипломного образования

Email: info@eco-vector.com
Россия

А. П. Цыбулькин

Республиканский медицинский диагностический центр; Казанская государственная медицинская академия последипломного образования

Email: info@eco-vector.com
Россия

Список литературы

Дополнительные файлы