Cationic proteins of leukocytes in peripheral blood of patients with brucellosis

Abstract

According to a number of authors, a highly informative way to assess the state of non-specific resistance is to determine the content of non-enzymatic cationic proteins (NPCs) of neutrophil granulocytes of peripheral blood. Non-enzyme cationic proteins, in addition to their participation in the preparation of bacteria for phagocytosis, also serve as mediators of the inflammatory reaction.
We set a goal to identify the possibility of using the indices of non-enzymatic cationic proteins of leukocytes in patients with brucellosis to assess the severity of the disease and to predict its outcomes.

Full Text

По мнению ряда авторов, высокоинформативным способом оценки состояния неспецифической резистентности организма является определение содержания неферментных катионных белков (НКБ) нейтрофильных гранулоцитов периферической крови. Неферментные катионные белки помимо участия в подготовке бактерий к фагоцитозу служат еще и медиаторами воспалительной реакции.

Мы поставили задачу выявить возможность использования показателей неферментных катионных белков лейкоцитов у больных бруцеллезом для оценки тяжести течения заболевания и прогнозирования его исходов.

Содержание неферментных катионных белков нейтрофильных гранулоцитов периферической крови определяли цитохимическим методом путем окрашивания бромфеноловым синим при pH 8,1—8,2 с последующим докрашиванием ядер раствором сафранина и оценивали их число в цитоплазме по 4-балльной шкале. По этим результатам высчитывали средний цитохимический коэффициент (СЦК) и коэффициент «К», характеризующий отношение числа лейкоцитов с высоким содержанием неферментных катионных белков к общему числу НКБ-положительных лейкоцитов. Для выведения нормальных значений изученных показателей было обследовано 50 здоровых людей в возрасте от 18 до 35 лет.

Под наблюдением находились 173 пациента с бруцеллезом в возрасте от 18 до 49 лет. 1-ю группу составили 30 больных острым бруцеллезом. Диагноз бруцеллеза был подтвержден эпидемиологически, клинически, а также высокими титрами серологических реакций (реакция Райта — 1 : 800—1 : 1600, РИГА — 1 : 800—1 : 3200). Очаговая симптоматика отсутствовала. Проба Бюрне у 12 больных была отрицательной, у остальных слабо положительной или сомнительной. В клиническом анализе периферической крови определялись умеренно выраженный нейтрофильный лейкоцитоз (от 8,4 до 10,6- 10⁹/л) и увеличенная СОЭ (15—25 мм/ч). Обследование больных острым бруцеллезом проводилось на 18—24-й день от начала заболевания.

Во 2-й группе было 80 больных хроническим бруцеллезом давностью 1—3 года и частыми (до 3—4 раз в год) обострениями. Диагноз заболевания помимо клинических данных подтверждался у них эпидемиологическими показателями и результатами серо-аллергологического обследования (у всех больных проба Бюрне была положительной, реакция Райта — 1 : 200—1 : 400, РИГА — 1 : 200—1 : 800). Бруцеллез у этих больных протекал с преимущественным поражением опорно-двигательного аппарата и периферической нервной системы.

Сенсибилизацию у больных хроническим бруцеллезом определяли по показателю повреждаемости нейтрофилов (ППН). В качестве аллергена использовали бруцеллин. В группе контроля величина ППН не превышала 0,1. С учетом значений ППН больные хроническим бруцеллезом были подразделены на две подгруппы. К первой подгруппе были отнесены больные с умеренно выраженной сенсибилизацией, у которых величина ППН не превышала 0,2 (49 чел.), ко второй — больные с величиной ППН, превышающей 0,3 (31 чел.). Больные хроническим бруцеллезом обследованы в фазе декомпенсации процесса.

63 человека с положительными серо-аллергическими реакциями на бруцеллез, не имевшие в анамнезе указаний на перенесенный в прошлом бруцеллез и не предъявляющие жалоб, вошли в 3-ю группу. Реакция Райта у них определялась в титрах 1 : 50 — 1 : 200; РИГА — 1 : 100 — 1 : 200. Проба Бюрне была положительной у 33 человек. ППН составил 0,2.

У больных 1-й группы показатели неферментных катионных белков до начала лечения превышали соответствующие значения у лиц из группы контроля (Р<0,01). При просмотре мазков крови больных острым бруцеллезом после окраски обнаруживалось большое количество лейкоцитов с выходом катионных белков за пределы цитоплазмы.

Всем больным 1 -й группы проводили антибактериальную терапию, которая включала курс внутримышечного введения стрептомицина 2 раза в сутки по 0,5 в течение 3 нед. Одновременно с этим больные получали второй антибиотик — левомицетин в дозе 1,0 в сутки двумя курсами по 7 дней каждый с перерывом между ними в одну нед. Антибактериальную терапию сочетали с применением десенсибилизирующих препаратов. После лечения у 21 больного уровень неферментных катионных белков снизился до показателей контрольной группы и у 9 больных к моменту окончания лечения сохранялся на уровне исходных значений.

При анализе отдаленных последствий перенесенного острого бруцеллеза (срок наблюдения— 1 год) было отмечено, что из 9 больных, имевших высокий уровень неферментных катионных белков к моменту выписки из стационара, переход в хронический бруцеллез зарегистрирован у 8, а из числа лиц с низким его уровнем — только у 5.

Таким образом, определение содержания неферментных катионных белков у больных острым бруцеллезом может иметь известное прогностическое значение.

У больных 2-й группы показатели неферментных катионных белков также превышали значения группы контроля (Р < 0,01), однако по мере возрастания уровня сенсибилизации их уровень снижался. 45 больных хроническим бруцеллезом, у которых показатель ППН равнялся 0,3 и был ниже (нормоэргическая реакция), лечили бруцеллезной вакциной путем 5—6-кратного ее введения с интервалами в 3—5 дней. До 2—3-кратного введения вакцины наблюдалось повышение содержания неферментных катионных белков (Р <С 0,01), однако последующая антигенная стимуляция приводила к снижению их уровня, которое сохранялось до 3 мес после окончания лечения. В ответ на каждое введение бруцеллезной лечебной вакцины у больных возникала общая (повышение температуры, озноб) и очаговая (усиление болей в суставах, мышцах, головная боль и т. д.) реакции.

Ближайший положительный эффект вакцинотерапии (улучшение самочувствия, уменьшение или полное исчезновение болей в суставах) был отмечен у 32 больных; у 13 улучшения состояния не наступило. У 29 из 32 больных, почувствовавших улучшение самочувствия после лечения, обострение процесса развилось в срок до 6 мес после его окончания и у 3 — в течение года. Нам не удалось выявить достоверной зависимости частоты и сроков развития рецидивов у больных хроническим бруцеллезом после вакцинотерапии от уровня неферментных катионных белков лейкоцитов.

У лиц 3-й группы результаты исследования неферментных катионных белков не отличались от значений контрольной группы.

Полученные данные позволяют рекомендовать определение содержания неферментных катионных белков лейкоцитов периферической крови у больных бруцеллезом для более полной характеристики клинических проявлений заболевания и его исходов.