Иммунологические тесты в диагностике кандидозной сенсибилизации
- Авторы: Пазюк Е.А.1, Лукашков В.М.1, Глушко Н.И.1, Булатова И.В.1
-
Учреждения:
- Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
- Выпуск: Том 68, № 4 (1987)
- Страницы: 242-245
- Тип: Статьи
- Статья получена: 08.01.2022
- Статья одобрена: 08.01.2022
- Статья опубликована: 15.08.1987
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/96112
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj96112
- ID: 96112
Цитировать
Полный текст
Аннотация
В настоящее время в Казанском НИИЭМ разработан аллерген Candida albicans для диагностики аллергических заболеваний, обусловленных сенсибилизацией к грибам рода Candida, с помощью кожно-аллергических проб. Однако в ряде случаев только по результатам кожно-аллергических проб невозможно судить о наличии грибковой сенсибилизации. Имеются заболевания, при которых постановка кожных проб противопоказана. Необходима разработка тестов in vitro, обеспечивающих полную безвредность специфической диагностики для больного.
Ключевые слова
Полный текст
В настоящее время в Казанском НИИЭМ разработан аллерген Candida albicans для диагностики аллергических заболеваний, обусловленных сенсибилизацией к грибам рода Candida, с помощью кожно-аллергических проб (КАП) [2]. Однако в ряде случаев только по результатам КАП невозможно судить о наличии грибковой сенсибилизации. Имеются заболевания, при которых постановка кожных проб противопоказана [6]. Необходима разработка тестов in vitro, обеспечивающих полную безвредность специфической диагностики для больного.
К доступным и информативным методам выявления сенсибилизации относятся следующие тесты: реакция дегрануляции базофилов (РДБ), реакция ингибирования миграции лейкоцитов человека (РИМЛ), показатель повреждения нейтрофилов (ППН) [5]. Каждый из них характеризует один из типов аллергической реакции. Так, по реакции дегрануляции базофилов человека оценивается I тип аллергической реакции — реакция аллергена со специфическим IgE на поверхности базофила с последующим выходом содержимого гранул из клетки. Реакция ингибирования миграции лейкоцитов позволяет судить о IV типе аллергической реакции. Тест основан на взаимодействии аллергена со специфическими Т-лимфоцитами, выделении ими лимфокинов, в том числе фактора, ингибирующего миграцию нейтрофилов, и воздействии этого фактора непосредственно на клетки-мишени (нейтрофилы), что проявляется уменьшением миграционного пути полинуклеаров. Тест ППН несет информацию о гиперчувствительности как немедленного, так и замедленного типов [6].
Цель настоящей работы заключалась в оценке, возможности использования экспериментально-производственных партий аллергена Candida albicans в тестах in vitro для характеристики кандидозной сенсибилизации.
Было обследовано 10 здоровых доноров крови без клинических признаков кандидозной сенсибилизации и 30 больных аллергодерматозами (хроническая рецидивирующая крапивница, нейродермит, аллергический дерматит, экзема) с предполагаемой грибковой сенсибилизацией. Клинический диагноз основывали на данных объективного обследования, кожных проб и иммунологических тестов. Кожно-аллергические пробы . (КАП) с аллергеном Candida albicans в концентрации 5 мкг/мл (20 PNV) были поставлены 24 больным. Иммунологическое лабораторное обследование включало три специфических теста (РДБ, РИМЛ, ППН) с аллергеном Candida albicans, направленных на выявление грибковой сенсибилизации.
РДБ ставили в модификации Н. В. Сардыко [3]. РИМЛ проводили по методике А. Г. Артемовой [1] в пятиканальных капиллярах Э. П. Трошанова [4], тест ППН — по методике В. А. Фрадкина [5] . В качестве антигена в этих реакциях применяли аллерген из дрожжеподобного гриба Candida albicans в следующих концентрациях: 120, 60, 30, 15, 8 мкг/мл. Использовали 3 партии аллергена.
У 10 здоровых доноров без клинических признаков грибковой сенсибилизации одновременно изучали тесты РДБ, РИМЛ, ППН с различными концентрациями аллергена. Разведения 120, 60, 30 и 15 мкг/мл давали 70—100% положительных реакций. Значения показателей реакций с дозой 8 мкг/мл были повышенными у 30—40% доноров, то есть примерно соответствовали проценту положительных реакций ЛАП у здоровых лиц (табл. 1), а с использованием высоких концентраций препарата были достоверно выше результатов тестов с малым содержанием аллергена (8 мкг/мл).
У больных аллергодерматозами с предполагаемой грибковой сенсибилизацией средние значения показателей РДБ, РИМЛ и ППН были несколько выше, чем у здоровых доноров. Высокие концентрации препарата вызывали 70—100% положительных реакций. Доза 8 мкг/мл давала 54% положительных реакций в РДБ, 64% — в РИМЛ и 65% — в тесте ППН. Показана достоверная разница в результатах у больных аллергодерматозами и у здоровых доноров (табл. 2).
Проведено сравнение показателей тестов и кожно-аллергических проб (табл. 3). Была отмечена корреляция РДБ с КАП: у 84% больных с положительными КАП по немедленному типу наблюдались высокие значения РДБ и лишь у 20% больных с отрицательными КАП — повышенные. Обнаружена резко выраженная разница в средних данных: соответственно 28,1±5,4 и 5,7±3,1 (Р<0,01). Показатели РИМЛ практически не зависели от данных кожных тестов: у больных с положительными и отрицательными КАП — соответственно 73% и 62% положительных реакций. Различие в средних значениях показателей РИМЛ также было недостоверным. Показатели теста ППН коррелировали с результатами кожных проб по немедленному типу: у 87% больных с положительными КАП были и повышенные значения показателей теста ППН, при отрицательных пробах тест ППН был положительным в 44% случаев. При сравнении средних величин различий не выявлено. Совпадений показателей теста ППН и результатов КАП по замедленному типу не было. По-видимому, вследствие сложности развития процесса замедленной гиперчувствительности кожно-аллергические пробы и реакции in vitro несут разную информацию о патологических изменениях, происходящих в организме.
Проведено одновременное изучение 3 различных партий аллергена Candida albicans в тестах РДБ, РИМЛ, ППН у 10 больных аллергодерматозами с предполагаемой кандидозной сенсибилизацией (табл. 4). Во всех случаях использовали одну и ту же концентрацию аллергена — 8 мкг/мл. По средним величинам и процентам положительных результатов различия показателей тестов in vitro в изученных партиях препарата были недостоверными, то есть разные партии аллергена стандартны.
Изучена возможность использования аллергена из дрожжеподобного гриба Candida albicans в качестве антигена в реакциях РДБ, РИМЛ и ППН. Высокие концентрации аллергена (120, 60, 30, 15 мкг/мл) оказывают неспецифическое цитотоксическое действие и вызывают положительные реакции почти в 100% случаев. Рабочее разведение препарата 8 мкг/мл одинаково реагирует во всех трех тестах и дает примерно такой же процент положительных результатов у больных аллергодерматозами, как и препарат для кожного тестирования. Полного совпадения показателей кожно-аллергических проб и тестов in vitro не было, особенно при диагностировании гиперчувствительности замедленного типа, поскольку механизм действия аллергена в кожных тестах и реакциях in vitro различен. Для улучшения выявления кандидозной сенсибилизации необходимо параллельно с кожными тестами исследовать показатели лабораторных тестов in vitro. Особенно важен их результат при невозможности постановки КАП из-за наличия противопоказаний или изменения кожной реактивности вследствие процессов, поражающих кожу (нейродермит, экземы и т. д.). В таких случаях тесты in vitro могут служить единственным критерием, подтверждающим наличие кандидозной сенсибилизации.
ВЫВОДЫ
1. Аллерген Candida albicans можно использовать в качестве специфического антигена в реакциях РДБ, РИМЛ и ППН. Постановка тестов in vitro параллельно с кожными пробами улучшает качество диагностики кандидозной сенсибилизации.
2. Для проведения тестов РДБ, РИМЛ и ППН следует применять рабочую концентрацию аллергена 8 мкг/мл. Более высокие концентрации препарата оказывают неспецифическое цитотоксическое действие.
3. Различные партии аллергена стандартны и могут быть использованы в реакциях РДБ, РИМЛ и ППН в одной и той же дозе.
4. Показатели тестов РДБ и ППН в большинстве случаев коррелируют с результатами кожно-аллергических проб по немедленному типу.
Об авторах
Е. А. Пазюк
Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
В. М. Лукашков
Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
Н. И. Глушко
Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
И. В. Булатова
Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Email: info@eco-vector.com
Россия, Казань
Список литературы
- Артемова А. Г. // Бюлл. экспер. биол.— 1973.— № 10.— С. 67—71.
- Лукашков В. М., Глушко Н. И., Шахбазова Е. Н. и др. // В кн.: Инфекционная аллергия и иммунитет.— Казань, 1983.
- Сардыко Н. В. // ЖМЭИ.— 1980.— № 5.— С. 103—106.
- Трошанов Э. П., Паньшин А. Г.//Лабор. дело.— 1977.— № 5. — С. 311.
- Фрадкин В. А.// В кн.: Аллергодиагностика in vitro.— М., Медицина, 1975.
- Фрадкин В. А.// В кн.: Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови.— М., Медицина, 1985.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)