К вопросу о количественном учете некоторых вегетативно-гуморальных сдвигов в крови
- Авторы: Хамитов Х.С.1
-
Учреждения:
- Казанский медицинский институт
- Выпуск: Том 41, № 4 (1960)
- Страницы: 48-49
- Тип: Теоретическая и клиническая медицина
- Статья получена: 09.12.2021
- Статья одобрена: 09.12.2021
- Статья опубликована: 15.04.1960
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/90018
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj90018
- ID: 90018
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Функциональное состояние вегетативной нервной системы у большинства больных оказывается нарушенным, в связи с чем наблюдаются выраженные изменения в количестве освобождающихся медиаторов нервного возбуждения — адреналина и ацетилхолина. Поскольку вегетативные сдвиги оказывают влияние на клиническую картину заболевания, важно характеризовать их количественно.
Ключевые слова
Полный текст
Функциональное состояние вегетативной нервной системы у большинства больных оказывается нарушенным, в связи с чем наблюдаются выраженные изменения в количестве освобождающихся медиаторов нервного возбуждения — адреналина и ацетилхолина. Поскольку вегетативные сдвиги оказывают влияние на клиническую картину заболевания, важно характеризовать их количественно.
Можно считать циркуляцию в крови адреналина точно установленной, а методы его количественного определения — вполне удовлетворительными (А. М. Утевский. 1939, 1950; К. В. Лебедев и С. В. Сенкевич, 1959). В то же время циркуляция в крови ацетилхолина оспаривается некоторыми исследователями. Основанием для этого служит быстрая его разрушаемость под влиянием холинэстеразы. По количественному определению лишь активности сывороточной холинэстеразы, чем особенно широко пользуются в клинической практике, иногда бывает трудно судить о состоянии холинэргических процессов. Так, Д. Е. Альперн (1955) отметил, что усиленный синтез ацетилхолина сопровождается повышением активности холинэстеразы. Однако, под влиянием сильного возбуждения парасимпатического отдела вегетативной нервной системы и выделения большого количества ацетилхолина активность холинэстеразы может резко падать. Поэтому лишь совместное определение активности холинэстеразы и количества ацетилхолина может служить важным фактором в объективной оценке состояния холинэргических процессов. Между тем, существующие методы количественного определения ацетилхолина не являются достаточно совершенными. Наиболее употребляемым методом является тестирование на мышечном препарате пиявки (Фюнер, 1918; Минц, 1947). С помощью мышцы пиявки можно обнаружить ацетилхолин в разведении 10-8 в отдельных случаях — 10-9.В качестве тест-объекта используется также прямая мышца живота лягушки, но этот метод менее чувствителен и надежен, чем тестирование на пиявке. Для обнаружения ацетилхолина, кроме того, пользуются многими фармакологическими реакциями, вызываемыми этим веществом: его отрицательным инотропным действием на сердце лягушки и на правое изолированное сердечное ушко кролика; гипотензивным действием, особенно проявляющимся на кошках; действием на кишечную ткань морской свинки или белой мыши. Все эти реакции не являются специфичными. При благоприятных условиях граница наибольшей чувствительности находится в пределах концентрации ацетилхолина от 10-8 до 10-9.
Наши исследования связаны с наблюдениями Корстена (1941), предложившего изолированное легкое лягушки в качестве тест-объекта для определения малых концентраций ацетилхолина. В нашем первоначальном использовании данного метода (X. С. Хамитов, 1959), изолированное легкое лягушки подвергалось предварительной обработке эзерином с целью блокирования тканевой холинэстеразы, что было показано экспериментально (Л. Д. Фирер и X. С. Хамитов, 1957). Однако, при обработке эзерином отмечалось непостоянство чувствительности препарата и легкое длительно расслаблялось. Мы стали искать другие методы обработки препарата. В литературе появились данные (Мернаган, 1958), показывающие, что предварительная обработка морфином и эзерином препарата пиявки значительно увеличивает чувствительность его к ацетилхолину. Поэтому было решено исследовать влияние такой обработки на чувствительность изолированного легкого лягушки.
Методика количественного определения ацетилхолина в крови сводилась к следующему. Лягушка предварительно не менее суток выдерживалась в холодильнике при температуре + 4°. Отрезалась верхняя челюсть, разрушался спинной мозг, вскрывалась грудная клетка и отпрепаровывались оба легких. В стенке легкого вырезалось маленькое отверстие, чтобы изменение объема препарата по возможности испытывало меньшее сопротивление. Легкие тщательно прополаскивались в рингеровском растворе. Оба легких сначала погружались в сульфат морфия (4 или 5×10-5 г/мл) на рингеровском растворе для холоднокровных и помещались в холодильник на 2—3 часа, затем на 30 мин в раствор морфина (4 или 5×10-5 г/мл) и эзерина (10-5 г/мл). Легкое помещалось в специальный сосудик. Более подробное описание установки опыта представлено нами в предшествующей работе (1959). Методом сравнения кривой сокращения от инъецируемого раствора с сокращением от раствора ацетилхолина известной концентрации определялось количество ацетилхолина в исследуемой крови.
Перед взятием крови для определения ацетилхолина в клинике часто практикуется предварительное введение в организм инактиваторов холинэстеразы — эзерина или прозерина. Такого рода манипуляция небезопасна для человеческого организма. Взятие крови у животных и человека нами производилось по методике, описанной З. В. Беляевой (1953), с некоторыми изменениями. В 10-граммовый шприц набиралось заранее 5 мл прозерина (5.10-5 или 5.10-4), приготовленного на физиологическом растворе. Надетой на шприц стерильной иглой прокалывалась локтевая вена у человека или v. saphena у собаки, и насасывалось 5 мл крови. Кровь, разведенная в два раза раствором ингибитора, выливалась в стаканчик и дефибринировалась. Такая процедура обеспечивала полное торможение холинэстеразы в момент извлечения крови, и, следовательно, сохранение ацетилхолина от разрушения. Взятие крови обычно производилось в одних и тех же условиях — в утренние часы, натощак, и исследование на ацетилхолин производилось в течение ближайших 3—4 часов.
Изолированный препарат легкого лягушки, обработанный вышеуказанным способом, широко используется в нашей лаборатории как тест-объект для определения малых количеств ацетилхолина в органах и тканях животных. Для большинства препаратов при такой обработке порог чувствительности к ацетилхолину был 10-20, кроме того, легкое быстро расслаблялось после введения тестируемых растворов. Чувствительность легкого к ацетилхолину не падала в течение 5—7 часов определения. В настоящее время этот тест-объект для определения ацетилхолина в крови больных используется в ряде клиник нашего института.
Все сказанное позволяет широко рекомендовать морфинизированное и эзеринизованное изолированное легкое лягушки как тест-объект для количественной характеристики холинэргической реакции в крови при самых разнообразных исследованиях в области теоретической и клинической медицины.
Об авторах
Х. С. Хамитов
Казанский медицинский институт
Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Канд. мед. наук, кафедра нормальной физиологии
Россия, КазаньСписок литературы
- Альперн Д. Е. Тез. докл. VIII Всесоюзн. съезда физиол., биохим. и фармак., М., 1955
- Беляева З. В. В сб.: Вопр. физиол. и морфол. центр, нервн. сист;, изд. АМН СССР, 1953
- Лебедев К. В. и Сенкевич С. В. В сб.: О физиол. роли медиаторов, Казань, 1959, вып. VII
- Утевский А. М. Биохимия адреналина, Харьков, 1939
- Он же. Усп. биол. хим., 1950, т. 1
- Фирер Л. Д. и Хамитов X. С. Бюлл. эксп. биол. и мед., 1957, вып. 11
- Xамитов X. С. В сб.: О физиол. роли медиаторов, Казань, 1959, вып. VII
- Corsten М. Pfl. Arch., 1941. 244,2
- Murnaghan М. F. Nature, 1958, 182
- Minz B. La transmission chemique de l’influx nerveux, Paris, 1947
- Fühner H. Biochem. J., 1918, 77
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)