Гистогенез аденолимфомы слюнных желез

Аннотация

Аденолимфомы по частоте наблюдений являются второй опухолью после плеоморфной аденомы слюнных желез. Противоречивость во взглядах на многие аспекты морфо- и гистогенеза, отсутствие работ с применением современных методов иммуноморфологии послужили для нас поводом для углубленного изучения аденолимфом.

Полный текст

В основу работы положены исследования операционного материала от 48 лиц в возрасте от 10 до 70 лет, прооперированных по поводу аденолимфом. Опухоль обнаружена у 18 мужчин и 30 женщин. Частота ее среди опухолей слюнных желез составила 10,5%.
Полученный во время операции материал помещали в жидкий азот для приготовления криостатных срезов, часть фиксировали в нейтральном формалине, жидкости Карнуа или в холодном спирте для последующей заливки в парафин. Кусочки, залитые в парафин, изучены на светооптическом уровне с применением окраски гематоксилин-эозином, пикрофуксином по ван Гизону, гистохимической реакции Гримелиуса для выявления инкреторных гранулоцитов, конго-красным и методом поляризационной микроскопии для обнаружения амилоида.

Иммуногистохимическое исследование опухолей провели непрямым методом Кунса с использованием поликлональных антител (ПКАТ) к миозину и карбоангидразе III человека, моноклональных антител (МКАТ) к Т-(ИКО-90) и В-(ИКО-12) лимфоцитам (объединение «Препарат», г. Н. Новгород). Вторыми антителами (АТ) являлись козьи иммуноглобулины, меченные ФИТЦем (фирма «HULAND»). Кроме того, в работе применен перокси давно-анти пероксидазный (ПАП) метод с использованием МКАТ к белкам промежуточных филаментов: цитокератину № 8 (клон H 1), № 17 (клон Е 3), а также к эпителиальному антигену — ЭМА (фирма «Дако»). В качестве контроля использована ткань 30 здоровых участков слюнных желез, полученная во время операции у тех же больных.

Гистологически опухоли состоят из железисто-кистозной паренхимы и лимфоидной стромы в различных соотношениях, что, по нашим наблюдениям, всецело зависит от длительности заболевания. При ранних сроках оперативного вмешательства (1—2 года) превалируют железистые структуры над лимфоидными инфильтратами, на более поздних сроках — строма, но при этом паренхима неоплазмы представлена кистозно расширенными по-лостями со множественными папилло- матозными выростами стенки. Кроме того, во втором случае чаще встречается пролиферация клеток по типу «подушек Сандерсена», которые отдельные авторы описывают как плоскоклеточную метаплазию. В более «молодых» опухолях в строме обнаруживаются небольшие скопления лимфоцитов, иногда с относительно малыми герминативными центрами. В длительно существующих аденолимфомах строма образована обширными диффузными полями лимфоцитов со множеством лимфоидных фолликулов. Нередко в опухолях встречаются очаги гиалиноза стромы. При окраске по Гримелиусу в аденолимфоме выявлены одиночные и образующие отдельные небольшие пролифераты инкреторные гранулоциты, причем первые чаще располагаются непосредственно под эпителиальными клетками железисто-кистозных структур, реже — в толще пролиферирующих эпителиальных клеток и за пределами базальной мембраны. Очаговые пролифераты инкреторных гранулоцитов обнаружены в строме опухолей вблизи базальной мембраны железистых и кистозных структур. В этой области, как правило, лимфоциты отсутствуют, поэтому они отчетливо выделяются в виде островков клеток зернистой цитоплазмой среди лимфоидного инфильтрата. При окраске конго-красным по ходу волокнистых структур выявлены отложения амилоида. При исследовании в поляризованном свете эти участки дают двойное лучепреломление. Характерно, что амилоид ни в одном случае не обнаружен в стенках сосудов. Последнее обстоятельство — подтверждение того, что амилоид носит местный характер.

Большинство опухолей слюнных желез в своем строении и развитии отражает особенности организации нормальной слюнной железы, поэтому иммуноморфологическое исследование аденолимфом мы проводили параллельно с изучением особенностей локализации иммунных комплексов в нормальной слюнной железе (см. табл.).

Экспрессия маркеров эпителия и миоэпителия в нормальной слюнной железе и аденолимфоме

Специфичность антител	Нормальная железа (и—30)				Аденолимфома (n—48)
	железистые клетки ацинусов	МЭК ацинусов	железистые клетки выводных протоков	МЭК выводных протоков	цилиндрический эпителий паренхимы	пролиферирующие МЭК	лимфоциты лимфоидных фолликулов	лимфоидный инфильтрат
Миозин	—	+	—	+	—	+	—	—
Карбо ангидраза III	—	+	—	+	—	+	—	—
Кератин №8	+	—	+	—	+	—	—	—
Кератин № 17	—	+	—	+	—	+	—	—
ЭМА	—	—	+	—	+	—	—	—
Т-лимфоциты							—	+
В-лимфоциты							+	—

В нормальной слюнной железе миоэпителиальные клетки (МЭК) ацинусов и междольковых выводных протоков давали положительную реакцию с АТ к миозину, карбоангидразе III, кератину № 17. Железистые клетки ацинусов иммунореактивны только с АТ к кератину № 8, эпителий междольковых протоков — с АТ к кератину № 8 и ЭМА. В опухолевой ткани связывание указанных антител имеет отчетливую гистотопографию. Цилиндрический эпителий паренхимы аденолимфомы во всех случаях характеризуется положительной иммунореактивностью с АТ к кератину № 8 и ЭМА, причем эпителиальный мембранный антиген локализуется в апикальной части железистых клеток (рис. 1). Субэпителиальные клетки и очаги их пролиферации соответственно «подушкам Сандерсена» давали положительную реакцию с поликлональными антителами к миозину, карбоангидразе III (рис. 2) и МКАТ к кератину № 17. В лимфоидной строме опухоли выявлена отчетливая положительная реакция с МКАТ к Т- и В-лимфоцитам, при этом установлено, что В-лимфоциты располагаются в зоне реактивных центров, а Т-клетки — среди лимфоцитов, образующих мономорфную популяцию.

Рис. 1. Экспрессия ЭМА в акцикальной части цилиндрического эпителия железистого образования аденолимфомы (стрелка). ПАП методХ120.

Рис. 2. Положительная иммунореактивность с антителами к карбоангидразе III МЭК «подушек Сандерсена» (стрелка) и единичных клеток стенки кистозной полости (двойная стрелка). СТ — строма. Метод иммунофлюоресценцииХ220.

Итак, иммуноморфологически доказано различие фенотипа паренхиматозных клеток аденолимфом. Цилиндрический эпителий, выстилающий железистые и кистозные полости и железистые клетки междольковых выводных протоков нормальной слюнной железы, обладает перекрывающимся спектром белков. В свою очередь, ЭМА иммунореактивен только в железистых клетках междольковых выводных протоков. Железистый эпителий опухоли иммунореактивен с ЭМА, поэтому можно связать лроисхождение неопластических клеток с эпителием выводных протоков. Субэпителиальные клетки и клеточные пролифераты, соответствующие на светооптическом уровне «подушкам Сандерсена», давали положительную реакцию с ПКАТ к миозину, карбоангидразе III и МКАТ к кератину № 17, что является подтверждением их миоэпителиального происхождения.

Выводы

1. Аденолимфомы — истинные опухоли слюнных желез. Формирований их происходит в результате опухолевой трансформации железистых структур и миоэпителиальных клеток дистальных отделов протоков слюнных желез.
2. Метаплазирующий эпителий железистых структур аденолимфомы с образованием «подушек Сандерсена» связан в своем происхождении с пролиферирующим миоэпителием, строма опухоли — с Т- и В-зависимыми лимфоидными клетками.
3. Эпителиальный мембранный антиген может служить эффективным маркером при верификации происхождения эпителиального компонента аденолимфом.