Полный текст
Наиболее простым и быстрым методом количественного определения белков сыворотки и плазмы крови в клиникодиагностических лабораториях является рефрактометрический (В. Е. Предтеченский, С. Д. Балаховский, А. Гиттер (Gitter) [1, 4, 9]). Коэффициент преломления сыворотки в подавляющем большинстве случаев служит показателем количественного содержания белка в ней, за исключением сыворотки больных диабетом, желтухой, больных с уремией, хилезной сыворотки.
Еще в 1910 г. Рейсс (Reiss) разработал таблицу для вычисления процента белка по коэффициенту преломления сыворотки. При переводе табличного вычисления на график, где по оси ординат откладывается процентное содержание белка, а по оси абсцисс—коэффициент преломления, оказалась прямо пропорциональная зависимость между этими двумя величинами, что графически выражается прямой линией (рис. 1).
Большинство отечественных рефрактометров, в том числе и рефрактометр марки «РПЛ», выпущено в качестве сахариметров. Обладая высокой точностью, они отградуированы по сахарозе, что очень неудобно для пользования ими с целью определения белка. Для пересчета удобно пользоваться таблицей Шенрока [7], свидетельствующей о том, что показатель преломления сахарозы прямо пропорционален концентрации последней в водном растворе (рис. 2).
Пользуясь данными Рейсса и Шенрока, можно любой рефрактометр-сахариметр превратить в рефрактометр для количественного определения белка. Наиболее просто это достигается путем построения графика для каждого имеющегося рефрактометра- сахариметра. По графику можно без переводных таблиц и с большой точностью определить концентрацию белка в сыворотке.
Мы в лабораторной практике, применяя прецизионный лабораторный рефрактометр-сахариметр марки «РПЛ» для количественного определения белка, вместо табличного вычисления, рекомендуемого Д. Ф. Пресняковым [5], практикуем графический метод вычисления. Точность прибора позволяет, выдерживая стандартные условия анализа, определять концентрацию сывороточного белка с точностью до 0,01 г/%, что очень выгодно отличает рефрактометр «РПЛ» от рефрактометра ти- яа Аббе и др.
Проведенные проверочные испытания рефрактометров типа Аббе, Пульфриха и «РПЛ» (см. фиг. 3), одновременно с определением белка гравиметрически и методом микрокьельдаля убедили нас в высокой точности составленного градуировочного графика. Для иллюстрации приводим эквивалентные величины концентрации белка в сыворотке крови, полученные разными методами определения — микрокьельдалем, гравиметрически, рефрактометрами Аббе, Пульфриха и «РПЛ» (табл. 1).
* Выражаю благодарность доктору И. Н. Сапожниковой (зав. отделением сыво роток НИИВС гор. Казани) за любезное предоставление для проведения проверочных испытаний рефрактометра Пульфриха.