Роль микровезикул и нетоза при коагулопатиях у пациентов с COVID-19: рандомизированное клиническое исследование

Обоснование. Высокая частота тромботических осложнений при COVID-19 существенно ухудшает прогноз заболевания. Ключевая проблема заключается в недостаточной изученности механизмов, связывающих системное воспаление и активацию нейтрофилов с образованием внеклеточных ловушек, а также нарушениями гемостаза, опосредованными микровезикулами.

Цель исследования. Изучить влияние микровезикул и нейтрофильных внеклеточных ловушек на развитие коагулопатий при COVID-19 в зависимости от тяжести течения, оценив их количественные и качественные характеристики.

Методы. В исследование включены 213 пациентов с COVID-19 (138 — среднетяжёлое течение, 75 — тяжёлое) и 20 здоровых доноров. Всем пациентам проведены биохимические, коагулометрические и гематологические исследования. Количественный анализ микровезикул выполняли методом проточной цитометрии с моноклональными антителами к поверхностным маркёрам (CD45, CD3, CD14, CD15, CD61). Взаимодействие микровезикул с нейтрофильными внеклеточными ловушками изучали методом конфокальной микроскопии (Leica TCS SP5) с применением флуоресцентных меток (DAPI, FITC, APC, PE) и последующей колокализацией в пакете Las AF. Статистический анализ выполнен с использованием критерия Стьюдента, коэффициента корреляции Спирмена и методов линейной регрессии.

Результаты. У пациентов со среднетяжёлым течением COVID-19 выявлена гиперкоагуляция (фибриноген 4,8 [4,00; 5,60] г/л; D-димер 0,78 [0,30; 1,28] мг/л) с повышенным уровнем микровезикул нейтрофильного (CD15⁺ 53,34±6,92%) и тромбоцитарного (CD61⁺ 59,74±11,22%) происхождения. Обнаружены нитеподобные структуры нейтрофильных внеклеточных ловушек с микровезикулами, ассоциированные с тканевым фактором (TF⁺). При тяжёлом течении зарегистрировано снижение микровезикул нейтрофильного (CD15⁺ 10,32±4,29%) и тромбоцитарного (CD61⁺ 20,9±6,01%) происхождения, тромбоцитопения (139,5 [104,25; 177,75]×10⁹/л) и гипокоагуляция (международное нормализованное отношение — 2,60 [2,32; 3,58]), а также агрегаты CD62⁺-позитивных микрочастиц.

Заключение. Микровезикулы и нейтрофильные внеклеточные ловушки играют ключевую роль в нарушении системы гемостаза при COVID-19: гиперкоагуляция на ранних стадиях опосредована их прокоагулянтной активностью, тогда как при тяжёлом течении снижение уровня циркулирующих в периферической крови микровезикул отражает коагулопатию потребления.