Обоснование. Высокая частота тромботических осложнений при COVID-19 существенно ухудшает прогноз заболевания. Ключевая проблема заключается в недостаточной изученности механизмов, связывающих системное воспаление и активацию нейтрофилов с образованием внеклеточных ловушек, а также нарушениями гемостаза, опосредованными микровезикулами.

Цель исследования. Изучить влияние микровезикул и нейтрофильных внеклеточных ловушек на развитие коагулопатий при COVID-19 в зависимости от тяжести течения, оценив их количественные и качественные характеристики.

Методы. В исследование включены 213 пациентов с COVID-19 (138 — среднетяжёлое течение, 75 — тяжёлое) и 20 здоровых доноров. Всем пациентам проведены биохимические, коагулометрические и гематологические исследования. Количественный анализ микровезикул выполняли методом проточной цитометрии с моноклональными антителами к поверхностным маркёрам (CD45, CD3, CD14, CD15, CD61). Взаимодействие микровезикул с нейтрофильными внеклеточными ловушками изучали методом конфокальной микроскопии (Leica TCS SP5) с применением флуоресцентных меток (DAPI, FITC, APC, PE) и последующей колокализацией в пакете Las AF. Статистический анализ выполнен с использованием критерия Стьюдента, коэффициента корреляции Спирмена и методов линейной регрессии.

Результаты. У пациентов со среднетяжёлым течением COVID-19 выявлена гиперкоагуляция (фибриноген 4,8 [4,00; 5,60] г/л; D-димер 0,78 [0,30; 1,28] мг/л) с повышенным уровнем микровезикул нейтрофильного (CD15⁺ 53,34±6,92%) и тромбоцитарного (CD61⁺ 59,74±11,22%) происхождения. Обнаружены нитеподобные структуры нейтрофильных внеклеточных ловушек с микровезикулами, ассоциированные с тканевым фактором (TF⁺). При тяжёлом течении зарегистрировано снижение микровезикул нейтрофильного (CD15⁺ 10,32±4,29%) и тромбоцитарного (CD61⁺ 20,9±6,01%) происхождения, тромбоцитопения (139,5 [104,25; 177,75]×10⁹/л) и гипокоагуляция (международное нормализованное отношение — 2,60 [2,32; 3,58]), а также агрегаты CD62⁺-позитивных микрочастиц.

Заключение. Микровезикулы и нейтрофильные внеклеточные ловушки играют ключевую роль в нарушении системы гемостаза при COVID-19: гиперкоагуляция на ранних стадиях опосредована их прокоагулянтной активностью, тогда как при тяжёлом течении снижение уровня циркулирующих в периферической крови микровезикул отражает коагулопатию потребления.

论证：COVID-19血栓并发症的高发病率显着恶化了疾病的预后。关键问题在于缺乏对将全身炎症和中性粒细胞活化与细胞外陷阱的形成以及由微血管介导的止血障碍联系起来的机制的理解。

目的：根据病程的严重程度，研究微泡和中性粒细胞胞外陷阱对COVID-19凝血病发展的影响，评估其定量和定性特征。

方法：该研究包括213名COVID-19患者（138名中度，75名重度）和20名健康捐赠者。所有患者都接受了生化，凝血和血液学检查。用单克隆抗体对表面标记物（CD45、CD3、CD14、CD15、CD61）进行流式细胞术对微泡进行定量分析。共聚焦显微镜（Leica TCS SP5）使用荧光标签（DAPI、FITC、APC、PE）和随后在Las AF包装中进行共定位，研究了微泡与中性粒细胞胞外陷阱的相互作用。使用学生准则，Spearman相关系数和线性回归方法进行统计分析。

结果：在中度 COVID-19 患者中检测到高凝状态（纤维蛋白原 4.8 ［4.00; 5.60］ g/l；D-二聚体 0.78 ［0.30; 1.28］ mg/l），中性粒细胞（CD15⁺ 53.34±6.92%）和血小板（CD61⁺ 59.74±11.22%）微囊泡水平升高。发现中性粒细胞胞外陷阱与组织因子（TF⁺）相关的微泡的丝状结构。 在严重的情况下，记录了中性粒细胞（CD15⁺ 10.32±4.29％）和血小板（CD61⁺ 20.9±6.01％）来源的微血管减少，血小板减少（139.5［104.25; 177.75］×10⁹/l）和低凝（国际归一化比率为2.60［2.32; 3.58］），以及CD62⁺-阳性微颗粒的聚集体。

结论：微泡和嗜中性粒细胞胞外陷阱在破坏COVID-19的止血系统中起关键作用：早期的高凝是由它们的促凝血活性介导的，而在严重的情况下，外周血中循环的微泡水平的降低反映了消耗性凝血病。