Chelicobacteria infection of the mucous membrane of stomach and duodenum in various diseases of the gastroenteric tract

Full Text

В связи с фактом выявления способности Helicobacter pylori (Нр) вызывать изменения слизистой оболочки желудка, характерные для хронического гастрита[7, 8], появилось большое количество публикаций, в которых развитие язвенного гастродуоденита объяснялось обсеменением желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) этими бактериями [1, 4, 10]. Действительно, элиминация микроорганизмов приводит к исчезновению признаков гастрита: ликвидации лимфоцитарной, плазмоклеточной и полиморфонуклеарной инфильтрации, а в ряде случаев — к регрессии атрофии слизистой [1]. Однако до настоящего времени очевидные аргументы, указывающие на этиологическую роль Нр в развитии язвенной болезни, отсутствуют. Хеликобактеры относятся к числу самых распространенных бактерий: они определяются примерно у 50% населения Земли, но язвенный гастродуоденит регистрируют далеко не у всех инфицированных лиц [11]. Более объективным представляется признание роли Нр в рецидивах язвенного гастродуоденита. Вполне возможно, что бактерии участвуют и в патогенезе других заболеваний ЖКТ, но эта информация нуждается в дальнейшем подтверждении.

Целью наших исследований было выявление хеликобактериоза у больных с различной патологией ЖКТ. Материалом для исследования служили биоптаты слизистой оболочки, взятые во время эндоскопии желудка больных. Биоптаты помещали в пробирки с 5 мл транспортной среды (полужидкая тиогликолевая среда). Материал доставляли в лабораторию в течение первых 3 часов с момента его взятия. Из доставленных образцов готовили взвесь, растирая биоптат в ступке в присутствии 1 мл физиологического раствора. После микроскопии мазков, окрашенных разведенным фуксином и по Граму, определяли уреазную активность бактерий в Clo-тесте. Затем проводили посев на 2 чашки с 5% кровяным агаром (КА) и на одну чашку с эритрит-кровяным агаром, дополненным амфотерицином В и ванкомицином (ЭКАВ). Амфотерицин В (3 мкг/мл) вносили для подавления роста грибов, а ванкомицин (10 мкг/мл) — для ингибирования роста кокковой микрофлоры, которая может присутствовать в желудке. Кровяные среды готовили с использованием крови барана, так как человеческая кровь часто содержит антитела к Нр [7]. Посев биоптатов проводили внесением петлей 0,004 мл эмульсии на 3 чашки со средами. Посевы культивировали при 37°С в течение 6—7 суток. При этом посевы на КА и ЭКАВ инкубировали в микроаэрофильных условиях, а одну чашку с КА — в аэробных условиях для подтверждения микроаэрофильной природы выделенных бактерий. Микроаэрофильные условия создавали внесением в эксикатор с посевами зажженной парафиновой свечи и стаканчика с 10% раствором серной кислоты, в который помещали пакет из фильтровальной бумаги с питьевой содой. Пакет располагали на стенке стакана, избегая контакта с кислотой. Раствор кислоты и соду брали из расчета 10 мл и 1 г на 1 литр эксикатора. Эксикатор герметизировали и после угасания свечи его встряхивали, затем пакет с содой погружался в кислоту, выделяя углекислый газ. В результате в эксикаторе создавалась атмосфера, благоприятная для роста микроаэрофильных и капнофильных бактерий.

Выросшие колонии изучали визуально, подсчитывали их количество, пересчитывая на биоптат, микроскопировали мазки из колоний при окраске по Граму и разведенным фуксином, определяли подвижность в раздавленной капле методом фазово-контрастной микроскопии, а также гемолитическую, оксидазную, каталазную и уреазную активности культур, учитывали отсутствие роста в аэробных условиях. Колонии хеликобактеров были мелкими (диаметром 0,5 мм), прозрачными, влажными или суховатыми, окруженными узкой зоной (до 1 мм) р-гемолиза. К Нр относили грамотрицательные палочки, изогнутые в виде крыла чайки, с характерной штопорообразной подвижностью в раздавленной капле, не растущие в аэробных условиях, проявляющие каталазную, оксидазную, уреазную и гемолитическую активности.

По данным D. Graham [5], Нр попадают прежде всего в антральный отдел желудка, где и развиваются гастритические изменения, но практически не колонизируют и мало воздействуют на слизистую оболочку двенадцатиперстной кишки (ДПК). Вместе с тем связь между хеликобактерным антральным гастритом и дуоденальной язвой настолько тесна и очевидна, что известный афоризм “нет кислоты — нет язвы” приобрел новую формулировку: “нет Нр — нет язвы”. В связи с этим для обнаружения оптимального места взятия биоптата при гастроскопии мы провели 53 параллельных исследования биоптатов слизистой оболочки в двух местах: в антральном отделе желудка и в области луковицы ДПК. Результаты этих исследований представлены в табл. 1.

Таблица 1. Частота обнаружения Нр на слизистой оболочке желудка и ДПК у больных язвенной болезнью в зависимости от места взятия биоптата

Локализация язвенной болезни	В области антрального отдела			В области луковицы ДПК
	число больных	количество положительных результатов	%	число больных	количество положительных результатов	%
Желудок	9	5	55,5±10,9	9	4	44,4±10,9
ДПК	44	31	67,9±6,4	53	22	41,5±6,6
Всего	53	36	67,9±6,4	53	22	41,5±6,6

Проведенные исследования показали, что из биоптатов антрального отдела желудка хеликобактеры выделялись независимо от вида патологии чаще, чем из биоптатов, взятых в области луковицы ДПК (Р<0,05). При этом из биоптатов антрального отдела слизистой желудка у больных язвой желудка и у больных язвой ДПК Нр высевались одинаково часто.

Из биоптатов, взятых в области луковицы ДПК, Нр были обнаружены у 70,4±6,9% больных язвой желудка и у 40,9±7,4% больных язвой ДПК (Р<0,05). Следовательно, для более точного выявления хеликобактеров биоптаты следует брать из антрального отдела желудка.

Были обследованы 355 больных гастроэнтерологического отделения Набережно-Челнинской городской больницы № 2 со следующими заболеваниями ЖКТ: язвенная болезнь ДПК (у 214), язвенная болезнь желудка (у 49), гастрит (у 36), гастродуоденит (у 25), холецистопанкреатит (у 22), колит (у 6), рак желудка (у 3). Данные обследованных больных и результаты изучения инфицированности их Нр в зависимости от пола представлены в табл. 2.

Показано, что первичное заражение Нр происходит, по-видимому, еще в детском возрасте, и наибольший пик инфицированности приходится на возраст от 20 до 30 лет и более [6, 9]. Нр-ассоциированные гастриты прогрессируют медленно и в целом “атрофический финал” и скорость его наступления в большей мере определяет время заражения. В развивающихся странах у 50% детей в возрасте до 5 лет уже обнаруживают хеликобактериозный гастрит, приводящий через 20 лет к атрофии фундального отдела желудка, кишечной метаплазии, а у ряда больных — и к раку желудка. В развитых странах Нр выявляются у 10% лиц в возрасте 20 лет и у 50% — к 60 годам [9].

Первичное инфицирование детей чаще происходит после 3 лет жизни, но антитела к Нр определялись даже у новорожденных, что связано, очевидно, с проникновением микроба в плод через плаценту. Инфицированность взрослого населения России, по результатам выборочных исследований, колебалась от 50 до 80%, а в некоторых регионах приближалась к 100%. Результаты наших исследований инфицированности Нр в зависимости от возраста показаны в табл. 3, а от диагноза — в табл. 4.

Таблица 4. Частота выделения Hp в зависимости от характера патологии ЖКТ

При анализе степени обсемененности биоптатов хеликобактерами при различной патологии ЖКТ было выявлено, что она колебалась от 10³ до 10⁷ микробных тел/биоптат, при этом высокая обсемененность (10⁵—10⁷ микробных тел/биоптат) имела место в 147 пробах из 210, то есть в 70,0±3,1% случаев.

Выводы:

1. Бактериологическое обследование больных с патологией ЖКТ выявило хеликобактериоз у 59,0±2,6% лиц, при этом наиболее часто — при язве ДПК (68,2±3,1 %) и язве желудка (51,0±7,1 %). Реже бактерии обнаруживали при гастродуодените, холецистопанкреатите, гастрите и колите (от 40,9 до 33,6%).
2. Степень обсемененности биоптатов Hp при различных заболеваниях ЖКТ колебалась от 10³ до 10⁷ микробных тел/ биоптат, при этом она не зависела от патологии. Высокая обсемененность (10⁵—10⁷ микробных тел/биоптат) регистрировалась одинаково часто при язвенной болезни желудка (68,0±9,5%) и другой патологии (от 50,0±13,4 до 55,6±17,5%).
3. Больные в возрасте от 15 до 20 лет были инфицированы Нр в 50,0±8,5% случаев. Инфицированность больных возрастала в группе лиц от 21 до 30 лет (63,0±5,9%) и сохранялась на уровне 59—61% в более старших возрастных группах. Одновременно отмечено, что наиболее часто с патологией ЖКТ обращаются лица в возрасте 41 года и старше (46,6±2,6%) и реже — в молодых возрастных группах: 31—40 лет (26,4±5,1%), 21 - 30 лет (18,3±2,0%), 15-20 лет (9,6±1,4%).
4. Наилучшим местом взятия биоптатов на хеликобактериоз является слизистая антрального отдела желудка (частота выделения — 67,9±6,4%).

About the authors

O. K. Pozdeev

Kazan State Medical University; Kazan State Medical Academy

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan

M. V. Fartdinova

Kazan State Medical Academy; Kazan State Medical University

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan

G. N. Lapshina

Kazan State Medical Academy; Kazan State Medical University

Email: info@eco-vector.com

Department of Microbiology

Russian Federation, Kazan; Kazan

R. R. Bakirov

Kazan State Medical Academy; Kazan State Medical University

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan

L. G. Morozova

Kazan State Medical Academy; Kazan State Medical University

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, Kazan; Kazan

References

Supplementary files