Ксимедон в комплексной терапии больных хроническим остеомиелитом и его влияние на созревание эритроцитов

Полный текст

Основной целью любого метода лечения больных хроническим остеомиелитом (ХО) являются радикальное удаление девитализированных тканей, подавление патогенной ассоциации бактерий и ускорение процессов регенерации [6, 9]. Сложилась традиционная тактика лечения ХО, основанная на комплексном подходе и использовании фистулосеквестрэктомии с рациональным сочетанием антибактериальных, противовоспалительных, иммунотерапевтических и других средств, повышающих специфическую и неспецифическую реактивность организма [9, 10, 11].

Вместе с тем все более очевидно, что склерозированные и некротизированные участки костной ткани, окружающие очаг поражения, препятствуют транспорту в него лекарственных и иммунных препаратов и в сочетании с высокой химиорезистентностью микрофлоры в зоне поражения сводят на нет усилия, направленные на его радикальную санацию [2, 9]. Это обстоятельство, с одной стороны, стимулировало разработку методов интенсивной химио- и физиотерапии непосредственно или вблизи поврежденного сегмента: внутрикостное введение антибиотиков, ультразвуковая кавитация костной полости, лазерная терапия, местная гипотермия и др. С другой стороны, оно послужило стимулом для поиска новых подходов к лечению и диагностике заболевания.

Один из таких подходов основан на признании факта нарушения при ХО генетического гомеостаза, что вполне согласуется с исследованиями последних лет, однозначно свидетельствующих о дестабильности генома при многих хронических заболеваниях, в том числе и инфекционной природы. При этом среди множества причин, дестабилизирующих геном, ключевыми, по мнению ряда авторов, являются выраженная иммуносупрессия и мощный прессинг на генетический аппарат больного эндомутагенов — метаболитов, образованных патогенной флорой или собственными клетками [5]. Наличие в патогенезе ХО аналогичных факторов обосновывает целесообразность изучения у больных состояния генома.

Выполненные нами ориентировочные исследования показали, что уровень микроядер (МЯ) в эритроцитах периферической крови больных ХО достоверно выше, чем у здоровых доноров. Данный факт свидетельствует о нарушении стабильности генетического аппарата и является основанием для более углубленного изучения этого явления с использованием в комплексной терапии ХО помимо традиционных методов специальных приемов, направленных на восстановление повреждений генома.

В качестве такого протектора был избран ксимедон [1, 11] — препарат из ряда пиримидиновых производных, обладающий способностью подавлять формирование хромосомных и точковых мутаций типа замены пар оснований и сдвига рамки считывания, а также индуцированный и спонтанный SOS-ot-вет [12, 13]. Ксимедон обладает, кроме того, иммуностимулирующей активностью, которая не уступает эффекту известного иммуномодулятора диуцифона [1, 7]. В последнее время появились сведения об иммунокоррекции цитогенетического действия некоторых мутагенов: иммуномодуляторы диуцифон и Т-активин в экспериментах значительно снижали уровень эритроцитов с МЯ в периферической крови [7, 13].

В связи с этим задачами настоящего исследования были изучение методом микроядерного анализа состояния генома у больных ХО и оценка эффективности внутрикостной терапии по сравнению со стандартным методом лечения больных ХО путем микроядерного анализа.

Стабильность генома у больных ХО определяли общепринятым для такого рода исследований методом учета количества эритроцитов с МЯ в периферической крови [3]. Мазок крови готовили традиционным способом. После высушивания при комнатной температуре мазок фиксировали метиловым спиртом и прокрашивали красителем Гимза. МЯ подсчитывали в полихроматофильных эритроцитах, содержащих большее количество аберрантных хромосом, чем более поздние клетки, — нормохромные эритроциты. Поскольку частота встречаемости эритроцитов крови с МЯ у человека достаточно низка, то в каждом случае анализировали не менее 20 тысяч клеток [4]. Количество эритроцитов с МЯ определяли в периферической крови у больных основной группы, группы сравнения и у здоровых доноров.

Основную группу составили 15 больных ХО со сроком заболевания от одного года до 9 лет (средний возраст — 40 лет) и с локализацией очага на нижних конечностях, наличием свища с гнойным отделяемым. Диагноз подтверждали результатами рентгенорадионуклидной диагностики. Всем больным делали общеклинические анализы, исследовали иммунный статус.

В комплексное лечение помимо традиционных методов (радикальная операция с пластикой остаточной полости, антибактериальная, иммунная и противовоспалительная терапия) включали внутрикостную терапию, осуществляемую по оригинальному методу: в костномозговой канал (в конце операции под наркозом) устанавливали на 5—10 см дистальнее очага иглу специальной конструкции [8]. Это позволяло в послеоперационном периоде проводить через иглу сеансы лазеротерапии и вводить антибиотики.

В послеоперационном периоде (с 1-х суток) во время перевязок больным основной группы вводили антибиотики (под жгутом) с учетом чувствительности микрофлоры (канамицин, гентамицин, линкомицин), которые растворяли в 0,5% растворе новокаина (1г антибиотика на 2,0—3,0 мл раствора новокаина). На следующий день производили сеанс лазеротерапии с помощью гибкого световода, введенного через иглу в костномозговой канал. Использовали терапевтический гелий-неоновый лазер ЛГН-120 (длина волны — 0,63 нм, экспозиция — 10 мин). Ксимедон назначали по 0,5 г трехкратно внутрь [11]. Курс лечения в зависимости от клинической картины заболевания, размеров полости, данных рентгенорадионуклидной диагностики продолжали 10—15 дней. Иглу извлекали в конце лечения. У таких больных уровень МЯ в крови определяли в момент поступления и через 15 дней после операции. В некоторых случаях количество эритроцитов с МЯ у этих больных подсчитывали в динамике через 5, 10 и 15 дней после операции.

В качестве группы сравнения были выбраны больные, которых в послеоперационном периоде лечили традиционным методом. У больных группы сравнения (15 мужчин, средний возраст — 39 лет) внутрикостную терапию не проводили.

Группу доноров (20 чел.) составляли здоровые мужчины в возрасте 27—35 лет. Предварительные исследования показали, что у них количество МЯ в периферической крови было равно в среднем 0,14±0,03‰. Индивидуальные колебания уровней относительно средней величины были небольшими и статистически недостоверными. Статистическую обработку данных осуществляли по Стьюденту.

 

Количество МЯ в периферической крови больных ХО до операции и после нее

Код больного	Количество МЯ в эритроцитах крови				Р (по сравнению с дооперационный показателями)
	до операции		после операции
	число	М±m (‰)	число	М±m (‰)
Контроль	3	0,14±0,03	—	—
1-я группа
28	5	0,24+0,03*	3	0,14+0,03	<0,05
21	5	0,24+0,03*	3	0,14+0,03	<0,05
23	5	0,24+0,03*	3	0,14+0,03	<0,05
13	5	0,24+0,03*	3	0,14+0,03	<0,05
8	5	0,24+0,03*	2	0,09+0,02	<0,001
19	6	0,29+0,04*	4	0,19+0,03	<0,001
7	6	0,29+0,04*	4	0,19+0,03	<0,001
1	6	0,29+0,04*	5	0,24+0,03*	>0,05
26	7	0,33+0,04*	5	0,24+0,03*	>0,05
20	7	0,33+0,04*	5	0,24+0,03*	>0,05
4	7	0,33+0,04*	5	0,24+0,03*	>0,05
11	8	0,38+0,04*	2	0,09+0,02	<0,001
15	8	0,38+0,04*	6	0,29+0,04*	>0,05
9	8	0,38+0,04*	4	0,19+0,03	<0,001
24	9	0,43+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
30	9	0,43+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
22	9	0,43+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
25	9	0,43+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
17	9	0,43+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
6	10	0,43+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
10	9	0,43+0,05*	2	0,09+0,02	<0,001
Среднее	7	0,33+0,04*	4	0,19+0,03	<0,001
2 группа
14	11	0,52+0,05*	2	0,09+0,02	<0,001
27	12	0,58+0,05*	4	0,19+0,03	<0,001
5	12	0,58+0,05*	8	0,38+0,03*	<0,001
12	13	0,62+0,05*	8	0,38+0,04*	<0,001
3	18	0,85+0,06*	9	0,43+0,05*	<0,001
29	19	0,90+0,06*	17	0,81+0,06*	>0,05
2	22	1,05+0,07*	9	0,43+0,05*	<0,001
18	23	1,10+0,07*	18	1,10+0,08*	>0,05
16	13	0,62+0,05	10	0,48+0,04	>0,05
Среднее	18	0,86+0,06	16	0,78+0,05	>0,05

Примечание. *Р <0,001 (относительно контроля).

 

У больных до операции во всех случаях количество эритроцитов с МЯ было достоверно выше (см. табл.). Индивидуальные колебания числа МЯ в этой группе были достаточно большими, что позволило выделить две группы больных. У больных 1-й группы количество эритроцитов с МЯ превышало контрольные значения (у доноров) в 2—3 раза (0,34±0,04‰). Большинство обследованных вошли в эту группу. 2-ю группу составили больные, у которых количество эритроцитов с МЯ превышало контрольные значения более чем в 3 раза. У 2 больных этой группы (код больных — 2, 18) число МЯ было очень большим — в 6—7 раз выше контрольных значений. Число МЯ во 2-й группе больных было равно в среднем 0,72±0,05‰.

У больных 2-й группы наблюдалась бурная клиническая картина заболевания: выраженный интоксикационный синдром, обширная зона поражения кости. В послеоперационном периоде рана длительное время не заживала. Сцинтиграммы показывали высокий уровень накопления РФП в пораженном сегменте и близлежащих суставах. Выявлялась взаимосвязь между подавленным иммунным статусом и большим количеством микроядерных эритроцитов.

 

Рис. 1. Количество МЯ в периферической крови у больных остеомиелитом, оперированных без применения внутрикостной терапии.

 

У большинства больных (77,7%) после операции произошло уменьшение числа МЯ по сравнению с таковым до операции. У 7 прооперированных (код больных - 1, 26, 20, 4, 15, 23 и 29) число МЯ осталось на дооперационном уровне достоверно выше контроля. У 4 больных оно уменьшилось по сравнению с дооперационным показателем, но так и не достигло значения, наблюдавшегося у здоровых доноров (рис. 1 и 2).

 

Рис. 2. Количество МЯ в периферической крови у больных остеомиелитом, оперированных с применением внутрикостной терапии.

 

Следовательно, ХО является заболеванием, которое вызывает морфологические повреждения (типа хромосомных аберраций) генетического аппарата человека. Вполне закономерно, что такого рода изменения могут нарушить нормальную экспрессию самых различных генов и ферментативное обеспечение молекулярного хозяйства клеток и, как следствие, привести к снижению защитных (специфических и неспецифических) сил организма. Одним из способов восстановления стабильности генома у больных ХО являются назначение фармакологических средств защиты генома и внутрикостная терапия.

Выводы

1. У больных ХО обнаруживается высокое содержание в крови микроядерных эритроцитов.
2. Определяется связь между изменениями, происходящими в ядре клетки крови, и иммунной системой больных ХО.
3. Новое пиримидиновое соединение ксимедон в комбинации с внутрикостным методом лечения в комплексной терапии приводит к коррекции генетических нарушений при ХО.

Об авторах

К. В. Малышев

Казанский государственный медицинский университет

Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com

Кафедра общей хирургии, Кафедра биологии и медицинской генетики

Россия, Казань

В. Ю. Терещенко

Казанский государственный медицинский университет

Email: info@eco-vector.com

Доцент, заведующий кафедрой общей хирургии, Кафедра биологии и медицинской генетики

Россия, Казань

В. В. Семенов

Казанский государственный медицинский университет

Email: info@eco-vector.com

Кафедра общей хирургии, Кафедра биологии и медицинской генетики

Россия, Казань

Список литературы

Дополнительные файлы