Физико-химическая характеристика белков: сердечной мышцы и аорты кролика при экспериментальном атеросклерозе

Аннотация

Нами было предпринято изучение ультрафиолетового (УФ) и инфракрасного (ИК) спектров поглощения белками, извлекаемыми из тканей сердечной мышцы и аорты кро­ликов с экспериментальным атеросклерозом, который вызывали различными атеро­генными веществами.

Полный текст

Опыты проводили на 35 беспородных кроликах (масса тела —от 2,5 до 3 кг). Одной группе подопытных животных ежедневно в течение 6 мес давали холестерин в дозе 200 мг/к второй подкожно вводили монойодацетат в дозе 5 мг/кг в течение 8-9 нед, третьей давали альфа-глицерофосфат кальция в дозе 200 мг/кг. Контролем, служили кролики одного с подопытными животнами возраста и с такой же массой тела. В конце срока животных умерщвляли воздушной эмболией. Исследованию подвергали мышцу сердца и аорту. Для извлечения белков ткани охлаждали в жидком размельчали и настаивали в  рефрижераторе с фосфатным буфером pH 7,3.

электоофореза на агар-агаре. Из белков сердечной мышцы выделялось 5 фракций: альбумины, a1-глобулины, а2-глобулины, ß-глобулины, Y-глобулины; из белков аорты только 4 фракции. УФ-спектр измеряли на спектрофотометре СФ-4а, а ИК-спектры снимали на приборе марки «Спектромом-2000», для этого белки запрессовывали с броми­дом калия в пресс-формы и анализировали в области 5000—700см¹.

Установлено, что белковые фракции сердечной мышцы и аорты животных контроль­ной группы поглощают в ультрафиолетовой области спектра лучи с длиной волны от 240—300 нм с максимумом при 280—285 нм и минимумом при 270—275 нм.

Кривые поглощения белковых фракций сердечной мышцы кроликов с гиперхолесте­ринемией характеризуются смещением максимумов полос I, II и III фракций в коротко­волновую, а IV и V —в красную область. В адсорбционных кривых II, IV и V белко­вых фракций появляются дополнительные пики при 255 нм.

Глицерофосфатный атеросклероз сопровождается также снижением интенсивности поглощения и смещением максимумов в синюю область в I, III и V фракциях сердеч­ной мышцы. В форме спектров наблюдается появление ряда более сильных пиков.

При монойодацетатном атеросклерозе в I, II фракциях отмечается резкое сниже­ние интенсивности поглощения в точках максимума и появление дополнительных пи­ков. Кривые поглощения других фракций сердечной мышцы менее интенсивны.

Водорастворимые белки аорты имеют в УФ-области спектр поглощения с максиму­мом При 285 нм, который при гиперхолестеринемии смещается в I и II фракциях в красную область. Кроме ультрафиолетового изучен инфракрасный спектр этих же бел­ковых фракций. Анализ полученных ПК-спектрограмм белков сердечной мышцы и аорты показывает, что при различных моделях экспериментального атеросклероза происходят значительные изменения в строении различных атомных групп и их связей.

Результаты наших исследований позволяют заключить, что при различных моде­лях экспериментального атеросклероза наряду с количественными сдвигами происхо­дят и конформационные изменения белков в сердечной мышце и аорте.