Изменения содержания аминокислот в сыворотке крови при инфекционном гепатите
- Авторы: Воронина Е.М.1
-
Учреждения:
- Горьковский медицинский институт
- Выпуск: Том 48, № 3 (1967)
- Страницы: 30-31
- Тип: Статьи
- Статья получена: 24.01.2021
- Статья одобрена: 24.01.2021
- Статья опубликована: 29.05.1967
- URL: https://kazanmedjournal.ru/kazanmedj/article/view/59148
- DOI: https://doi.org/10.17816/kazmj59148
- ID: 59148
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Мы изучали аминокислотный спектр крови у 131 больного инфекционным гепатитом и у 50 здоровых. Исследования проводили методом одномерной нисходящей хроматографии на бумаге (3. С. Чулкова, И. И. Гумина, 1958; M. Н. Медведева, П. В. Кугенев, В. П. Щука, 1961), всегда утром натощак, в условиях основного обмена. Модификация методики разработана О. М. Гулиной.
Ключевые слова
Полный текст
Мы изучали аминокислотный спектр крови у 131 больного инфекционным гепатитом и у 50 здоровых. Исследования проводили методом одномерной нисходящей хроматографии на бумаге (3. С. Чулкова, И. И. Гумина, 1958; M. Н. Медведева, П. В. Кугенев, В. П. Щука, 1961), всегда утром натощак, в условиях основного обмена. Модификация методики разработана О. М. Гулиной.
Исследовали 0,5 мл сыворотки крови, взятой из вены. Для удаления белков добавляли равное количество 0,04 н. раствора НС1 и помещали в кипящую баню на 3—4 мин. Свернувшиеся белки отделяли центрифугированием в течение 20 мин. при 4000 об/мин. Фильтрат выпаривали досуха и перед нанесением пробы разводили в 100—150 мкл 0,01 н. раствора НС1.
Бумагу («быстрая», Ленинградской фабрики) предварительно для удаления минеральных солей промывали 0,1% раствором оксихинолина в уксуснобутиловом растворителе в течение 5 дней. После обработки на бумагу наносили все количество безбелкового фильтрата в виде отдельных полос в 1,5—2 см. Для хроматографического разделения аминокислот применяли в качестве растворителя верхний слой смеси бутилового спирта, уксусной кислоты и воды в соотношении 4:1:5. Растворитель пропускали многократно через бумагу с возрастающей экспозицией (5, 7, 12, 17, 20, 24 часа). После каждого пропускания растворителя хроматограммы высушивали при комнатной температуре (в последнем случае не менее 6 часов). Для проявления хроматограмм применяли 0,5% раствор нингидрина в 95% ацетоне, с подкислением ледяной уксусной кислотой из расчета 1 мл на 100 мл раствора. После проявления хроматограммы высушивали в течение суток при комнатной температуре в темноте. Стабилизация выявленных пятен достигалась погружением хроматограмм в 1% раствор азотнокислой меди в абсолютном ацетоне, с добавлением 0,02 мл концентрированной HNO3 Окрашенные пятна вырезали по шаблону и заливали 70% этиловым Спиртом для экстрагирования аминокислот (в течение 2 час.). Полученный экстракт подвергали колориметрии на ФЭК-М с зеленым светофильтром, с определением содержания аминокислот в единицах оптической плотности. Пересчет содержания аминокислот производили с помощью калибровочных кривых, полученных на основании контрольных исследований смеси химически чистых аминокислот.
Наши результаты обследования здоровых лиц в основном соответствовали данным других авторов, пользовавшихся методом бумажной хроматографии (Мютинг, 1958; Кнауфф и сотр., 1959; 3. Н. Лебедева, 1963; В. П. Волков, 1964; М. К. Усманов, 1964).
Мы вели динамическое наблюдение за аминокислотным спектром крови у больных инфекционным гепатитом. При легком течении заболевания (39 больных) содержание аминокислот было в основном в пределах нормальных колебаний. Для больных со среднетяжелым течением (53 чел.) характерным оказалось достоверное увеличение содержания глицина, аланина и тенденция к повышению аспарагиновой кислоты, тирозина, фенилаланина. Выявлено также снижение концентрации аргинина. После лечения содержание аминокислот в значительной мере нормализовалось.
При тяжелом течении болезни (39 больных) зарегистрировано достоверное увеличение глицина, аланина, пролина, тирозина, лейцина+изолейцина и некоторое повышение аспарагиновой кислоты, глютамина, фенилаланина. Противоположные сдвиги отмечены в содержании лизина, аргинина, глютаминовой кислоты. После лечения аминокислотный спектр крови улучшался, но полностью не нормализовался.
Значительное увеличение содержания всех исследуемых аминокислот в сыворотке крови обнаружено у больного острым некрозом печени с развитием печеночной комы. Особенно резко увеличилось содержание аланина, тирозина, валина, аргинина, лейцина + изолейцина. У этого больного на хроматограмме дополнительно выявлены нингидринположительные пятна, которые не были идентифицированы. При подостром некрозе печени изменения аминокислотного спектра крови были аналогичны встречавшимся у больных с тяжелым течением болезни; увеличение содержания аминокислот было менее значительным в связи с частичной компенсацией нарушений за счет регенераторных процессов.
Полученные результаты следует рассматривать как показатель значительного изменения межуточного обмена белка. Уровень аминокислот в сыворотке крови в норме, как известно, достаточно стабилен.
Трактовка отмеченных сдвигов, до сих пор не уточнена. Еще К. Рокитанский (1849) и Фрерикс (1860) описали появление кристаллов лейцина и тирозина в моче при развитии печеночной недостаточности. Кашен и сотр. (1951, 1954) объясняют уведичение тирозина и фенилаланина нарушением обмена ароматических аминокислот, считают их повышение специфическим индикатором недостаточности печени. Однако Кнауфф и Виндшаймер (1960) связывают появление кристаллов не с резким увеличением содержания аминокислот, а с их способностью легко кристаллизоваться.
Снижение аргинина в сыворотке крови может быть обусловлено увеличением активности аргиназы, выделяющейся в большом количестве из некротизированной ткани печени (Маннинг, Гризолиа, 1957; Вальберг и Беверидж, 1960). Допускают также, что снижение концентрации аргинина связано с нарушением процесса мочевинообразовання (Герок, 1963; Кнауфф и сотр., 1964). Однако содержание мочевины при инфекционном гепатите, как правило, не изменяется (А. Л. Михнев, 1950; Мадьяр, 1962).
Некоторое накопление глицина могло наступить в результате нарушения процесса образования парных соединений, который связан с расходом данной аминокислоты (Герок, 1963).
Снижение глютаминовой кислоты, как и повышение аспарагиновой кислоты и аланина, по-видимому, свидетельствует о нарушении процесса переаминирования (Ибер и сотр., 1957). Снижение глютаминовой кислоты при заболеваниях печени может частично зависеть от нарушения синтеза ее из альфа-кетоглютаровой кислоты (Кнауфф и сотр., 1960). Приходится также учитывать возможность перехода глютаминовой кислоты через гамма-полуальдегид в пролин (Герок, 1963).
Результаты работы подтвердили значение изучения аминокислотного спектра крови при инфекционном гепатите в качестве дополнительного критерия оценки тяжести течения болезни.
Об авторах
Е. М. Воронина
Горьковский медицинский институт
Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Кафедра инфекционных болезней
РоссияСписок литературы
- Волков В. П. Вести, дермат. и венер., 1964, 1.
- Лебедева 3. Н. Вопр. пит., 1963, 1.
- Медведева М. Н., Кугенев П. В., Щука В. П. Лаб. дело, 1961, 9.
- Михнев А. Л. Опыт клинического изучения нарушений обмена при заболеваниях печени. Киев, 1950.
- Усманов М. К. Свободные аминокислоты крови, мочи и кала при бактериальной дизентерии и тифо-паратифозных заболеваниях. Автореф. канд. дисс., Ташкент, 1964.
- Чулкова 3. С., Гумина И. И Лаб. дело, 1958, 3.
- Сachin М. Exp. Med. Surg., 1954, 12, 2, 215—221.
- Cachin M.. DurlachJ., Bernard N. Arch. Mal. Appar. dig., 1951, 41, 6, 637—642.
- Gerok W. Dtsch. med. Wschr., 1963, 23, 1188—1197.
- Iber F. L., Rosen H., Levenson S. M., Chalmers T. C. J. Lab. clin. Med., 1957, 50, 3, 417—425.
- Knauff H. G., Dieterle P., Zickgraf H. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem., 1959, 316, 186—198.
- Knauff H. G., Se1maiг H., Rei11inger A. Klin. Wschr., 1960, 38, 812—819.
- Knauff H. G., Windsheimer F. Naunyn Schmiedebergs Arch. exp. Path. Pharmak., 1960, 239, 442.
- Knauff H. G., Sevbold D., Miller B. Klin. Wschr., 1964, 42/7, 326—332.
- Manning R. F., Grisolia S. Proc. Soc. exp. Biol. (N. Y.), 1957, 95, 225—226.
- Va1berg L. S., Beve¬ridge J. M. Canad. J. Biochem., 1960, 38, 365—373.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)