Appearance of agglutinogens in human embryos

Abstract

Studying the practical application of blood transfusion led me to examine the blood of young embryos in order to determine whether they belonged to a particular group. Later on, the study came down to determining when the embryos had an isoagglutination reaction, and since the experience was carried out with standard serums and erythrocytes of the embryo, our study was mainly aimed at identifying agglutinogens.

Full Text

Изучение практического применения переливания крови натолкнуло меня на мысль исследовать кровь молодых эмбрионов с целью определения принадлежности их к той или иной группе. В дальнейшем исследование свелось к определению момента появления у эмбрионов реакции изоагглютинации, а так как опыт проводился со стандартными сыворотками и эритроцитами эмбриона, то в основном наше исследование имело в виду выявление агглютиногенов.

Мне казалось, что агглютиногены появляются только в известный момент эмбриональной жизни, и если удастся выяснить время появления агглютиногенов, то, на основании знания эмбриогенеза органов и тканей, можно будет выявить место их образования.

Обратившись к доступной литературе, я не мог найти ни одной статьи, трактующей вопрос в том виде, как задуман мною, и выяснил, что исследований реакций изоагглютинации у человеческих эмбрионов с первых недель зародышевой жизни не имеется вовсе в мировой литературе. Это, конечно, объясняется тем, что очень трудно получить необходимые для опытов объекты. Для исследования годны только живые эмбрионы, причем надо быть вполне уверенным в том, что к крови эмбриона не примешивается кровь матери. Отсюда материал, получаемый при искусственных абортах и самопроизвольных выкидышах, для этой цели не годится. Я пользовался исключительно целыми плодными яйцами, получаемыми как при операции малого кесарского сечения, так и после ампутации беременной фиброзно-перерожденной матки.

Методика исследования заключалась в следующем: Плодное яйцо обертывалось марлей таким образом, что оставался свободным только один полюс его без ворсинок; это место прокалывалось; околоплодная жидкость вытекала, и собиралась в подставленную баночку. Эмбрион, связанный пуповиной с оболочками, осторожно клался на край тазика, причем обернутые марлей оболочки опускались ниже края тазика, и пуповина обрезалась ножницами; таким образом эмбрион оставался лежать на краю тазика со свешивающейся пуповиной, в конце которой скапливалась кровь.

Реакция изоагглютинации определялась на микроскопическом стекле по методу Vinсеnt’a. Первые выдержанные стандартные сыворотки II ß и III а получены из Московск. института переливания крови. В дальнейшем мы пользовались сыворотками, приготовленными в Ярославском филиале Московск. института переливания крови. Перед опытом сыворотки всегда проверялись на предмет их годности с кровью лиц, работниц больницы, принадлежащих к Аß и Ва группам. Кровь с пуповины наносилась в каплю стандартной сыворотки стеклянной палочкой, отдельной для каждой капли. Кроме того делался мазок крови с целью определения состава форменных элементов каждого данного случая. Эти мазки должны были также служить доказательством того, что мы имели дело действительно с эмбриональной кровью. Принимались все меры к тому, чтобы не загрязнить мазок материнской кровью (тщательная чистота рук, ножниц и т. д.). Одновременно производились измерения длины, веса эмбриона, протоколировалось состояние различных органов (глаза, конечности, кишечник, печень и т. д.), определялась кровяная группа матери и в нескольких случаях группа отца. Т. к. при получении крови эмбрион не затрагивался пальцами, то мы избежали сдавливания печени и выдавливания из нее крови, тем самым обеспечили получение крови, соответствующей физиологическим условиям. Здесь могу отметить, что у эмбрионов очень молодых, можно получить крови максимум одну—две капли. Обычно опыт проводился не позже двух часов после получения плодного яйца, а часто через 15—20 минут.

Весь полученный материал может быть сведен в приводимую ниже таблицу.

При рассмотрении данной таблицы видно, что реакция определения агглютиногенов в эритроцитах эмбрионов совершенно ясно выпадает у эмбрионов меньше 3,9 см длиной и 3,5 г весом.

На основании исследования мазков обнаружилось, что ясная реакция агглютинации появляется в тот момент, когда в крови кроме мегалобластов и мегалоцитов появляются эритробласты. Это обстоятельство указывает на то, что началось кроветворение эритробластического ряда или, другими словами, что в круг кроветворения вступила печень. По данным совместной работы с Е. А. Бондаренко ¹) эритробласты в периферической крови впервые появляются с восьмой недели зародышевой жизни, следовательно, этот возраст и надо считать за время, когда агглютиногены уже сформировываются. В доказательство этого положения можно привести следующие данные нашей таблицы, у эмбриона № 13, имеющего возраст в 9 недель, эритробласты составляют 30% всех форменных элементов периферической крови, причем реакция с сывороткой III» дала ясно отрицательный результат, с сывороткой же 113 неясный, обозначенный нами как +-, а у эмбриона № 9 в возрасте 8 недель, у которого эритробласты составляют только 2,8% всех форменных элементов периферической крови,— реакция с сывороткой Ша также дала ясно отрицательный результат, а с сывороткой Пр результат очень сомнительный, обозначенный нами вопросительным знаком. Это говорит за то, что агглютиногены, появляясь с 8-недельного возраста в небольшом количестве, быстро вступают в реакцию с соответствующим агглютинином сыворотки, что не дает ясного скучивания кровяных клеток; в дальнейшем же у 9—9,5-недельного и более взрослых зародышей, агглютиногены уже накапливаются в достаточном количестве, и реакция агглютинации становится совершенно ясной.

Таким образом на основании нашего исследования мы можем определенно высказать мнение, что, во-первых, агглютиногены у человека появляются с восьмой недели эмбриональной жизни, и, во-вторых, что печень является тем органом, в котором впервые вырабатываются агглютиногены.

При более внимательном изучении наших данных мы можем отметить следующий, очень интересный факт: эмбрионы, у которых впервые ясно определяется агглютинация, содержат агглютиногены, совпадающие с агглютиногенами своих матерей, другими словами, согласно терминологии Гиршфельда, в этих случаях мы наблюдали гомоспецифическую беременность. Это дает возможность сделать предположение, что при гомо- специфической беременности условия для возникновения и выявления агглютиногенов более благоприятны.

Начиная с момента вполне ясного выявления агглютиногенов (эмбрион 9—9,5-недельн. возр.), я мог обнаружить у эмбрионов и плодов агглютиногены, принадлежащие всем группам, причем процентное отношение кровяных групп в нашем материале мало чем отличается от таков по для взрослых. Это может служить как бы доказательством идентичности материала и указанием на то, что агглютиногены, раз возникшие в эмбриональной жизни, — не изменяются.

Параллельно с выявлением агглютиногенов у эмбрионов я проделал сотни опытов с выявлением агглютининов: а) в околоплодной жидкости, б) сыворотке крови у более взрослых эмбрионов и с) в жидкости головного мозга. Агглютинины ни разу не были обнаружены. Это вполне согласуется с литературными данными, указывающими, что агглютинины появляются часто только спустя некоторое время после рождения.

Выводы.

1) Агглютиногены у человеческих эмбрионов появляются с восьмой недели зародышевой жизни. Вполне ясно они выявляются, начиная с 9—9,5 недели зародышевой жизни.

2) Печень является тем органом, в котором вырабатываются впервые агглютиногены. Эритробласты являются первыми клетками, содержащими агглютиногены.

3) Накопление агглютиногенов или агглютинабельность эритроцитов идет постепенно.

4) Накопление агглютиногенов или агглютинабельность эритроцитов идет быстрее при гомоспецифической беременности.

5) В околоплодной жидкости, сыворотке крови, жидкости головного мозга эмбрионов первой половины беременности—агглютинины отсутствуют.

¹) В. Б. Файнберг и Е, А. Бондаренко. „Динамика изменений периферической крови у человеческих эмбрионов в первой половине зародышевой жизни", сдано в печать—Сборник трудов Москов. госуд. и-та переливания крови в январе 1934 года.