Появление агглютиногенов у человеческих эмбрионов

Аннотация

Изучение практического применения переливания крови натолкнуло меня на мысль исследовать кровь молодых эмбрионов с целью определения принадлежности их к той или иной группе. В дальнейшем исследование свелось к определению момента появления у эмбрионов реакции изоагглютинации, а так как опыт проводился со стандартными сыворотками и эритроцитами эмбриона, то в основном наше исследование имело в виду выявление агглютиногенов.

Полный текст

Мне казалось, что агглютиногены появляются только в известный момент эмбриональной жизни, и если удастся выяснить время появления агглютиногенов, то, на основании знания эмбриогенеза органов и тканей, можно будет выявить место их образования.

Обратившись к доступной литературе, я не мог найти ни одной статьи, трактующей вопрос в том виде, как задуман мною, и выяснил, что исследований реакций изоагглютинации у человеческих эмбрионов с первых недель зародышевой жизни не имеется вовсе в мировой литературе. Это, конечно, объясняется тем, что очень трудно получить необходимые для опытов объекты. Для исследования годны только живые эмбрионы, причем надо быть вполне уверенным в том, что к крови эмбриона не примешивается кровь матери. Отсюда материал, получаемый при искусственных абортах и самопроизвольных выкидышах, для этой цели не годится. Я пользовался исключительно целыми плодными яйцами, получаемыми как при операции малого кесарского сечения, так и после ампутации беременной фиброзно-перерожденной матки.

Методика исследования заключалась в следующем: Плодное яйцо обертывалось марлей таким образом, что оставался свободным только один полюс его без ворсинок; это место прокалывалось; околоплодная жидкость вытекала, и собиралась в подставленную баночку. Эмбрион, связанный пуповиной с оболочками, осторожно клался на край тазика, причем обернутые марлей оболочки опускались ниже края тазика, и пуповина обрезалась ножницами; таким образом эмбрион оставался лежать на краю тазика со свешивающейся пуповиной, в конце которой скапливалась кровь.

Реакция изоагглютинации определялась на микроскопическом стекле по методу Vinсеnt’a. Первые выдержанные стандартные сыворотки II ß и III а получены из Московск. института переливания крови. В дальнейшем мы пользовались сыворотками, приготовленными в Ярославском филиале Московск. института переливания крови. Перед опытом сыворотки всегда проверялись на предмет их годности с кровью лиц, работниц больницы, принадлежащих к Аß и Ва группам. Кровь с пуповины наносилась в каплю стандартной сыворотки стеклянной палочкой, отдельной для каждой капли. Кроме того делался мазок крови с целью определения состава форменных элементов каждого данного случая. Эти мазки должны были также служить доказательством того, что мы имели дело действительно с эмбриональной кровью. Принимались все меры к тому, чтобы не загрязнить мазок материнской кровью (тщательная чистота рук, ножниц и т. д.). Одновременно производились измерения длины, веса эмбриона, протоколировалось состояние различных органов (глаза, конечности, кишечник, печень и т. д.), определялась кровяная группа матери и в нескольких случаях группа отца. Т. к. при получении крови эмбрион не затрагивался пальцами, то мы избежали сдавливания печени и выдавливания из нее крови, тем самым обеспечили получение крови, соответствующей физиологическим условиям. Здесь могу отметить, что у эмбрионов очень молодых, можно получить крови максимум одну—две капли. Обычно опыт проводился не позже двух часов после получения плодного яйца, а часто через 15—20 минут.

Весь полученный материал может быть сведен в приводимую ниже таблицу.

При рассмотрении данной таблицы видно, что реакция определения агглютиногенов в эритроцитах эмбрионов совершенно ясно выпадает у эмбрионов меньше 3,9 см длиной и 3,5 г весом.

На основании исследования мазков обнаружилось, что ясная реакция агглютинации появляется в тот момент, когда в крови кроме мегалобластов и мегалоцитов появляются эритробласты. Это обстоятельство указывает на то, что началось кроветворение эритробластического ряда или, другими словами, что в круг кроветворения вступила печень. По данным совместной работы с Е. А. Бондаренко ¹) эритробласты в периферической крови впервые появляются с восьмой недели зародышевой жизни, следовательно, этот возраст и надо считать за время, когда агглютиногены уже сформировываются. В доказательство этого положения можно привести следующие данные нашей таблицы, у эмбриона № 13, имеющего возраст в 9 недель, эритробласты составляют 30% всех форменных элементов периферической крови, причем реакция с сывороткой III» дала ясно отрицательный результат, с сывороткой же 113 неясный, обозначенный нами как +-, а у эмбриона № 9 в возрасте 8 недель, у которого эритробласты составляют только 2,8% всех форменных элементов периферической крови,— реакция с сывороткой Ша также дала ясно отрицательный результат, а с сывороткой Пр результат очень сомнительный, обозначенный нами вопросительным знаком. Это говорит за то, что агглютиногены, появляясь с 8-недельного возраста в небольшом количестве, быстро вступают в реакцию с соответствующим агглютинином сыворотки, что не дает ясного скучивания кровяных клеток; в дальнейшем же у 9—9,5-недельного и более взрослых зародышей, агглютиногены уже накапливаются в достаточном количестве, и реакция агглютинации становится совершенно ясной.

Таким образом на основании нашего исследования мы можем определенно высказать мнение, что, во-первых, агглютиногены у человека появляются с восьмой недели эмбриональной жизни, и, во-вторых, что печень является тем органом, в котором впервые вырабатываются агглютиногены.

При более внимательном изучении наших данных мы можем отметить следующий, очень интересный факт: эмбрионы, у которых впервые ясно определяется агглютинация, содержат агглютиногены, совпадающие с агглютиногенами своих матерей, другими словами, согласно терминологии Гиршфельда, в этих случаях мы наблюдали гомоспецифическую беременность. Это дает возможность сделать предположение, что при гомо- специфической беременности условия для возникновения и выявления агглютиногенов более благоприятны.

Начиная с момента вполне ясного выявления агглютиногенов (эмбрион 9—9,5-недельн. возр.), я мог обнаружить у эмбрионов и плодов агглютиногены, принадлежащие всем группам, причем процентное отношение кровяных групп в нашем материале мало чем отличается от таков по для взрослых. Это может служить как бы доказательством идентичности материала и указанием на то, что агглютиногены, раз возникшие в эмбриональной жизни, — не изменяются.

Параллельно с выявлением агглютиногенов у эмбрионов я проделал сотни опытов с выявлением агглютининов: а) в околоплодной жидкости, б) сыворотке крови у более взрослых эмбрионов и с) в жидкости головного мозга. Агглютинины ни разу не были обнаружены. Это вполне согласуется с литературными данными, указывающими, что агглютинины появляются часто только спустя некоторое время после рождения.

Выводы.

1) Агглютиногены у человеческих эмбрионов появляются с восьмой недели зародышевой жизни. Вполне ясно они выявляются, начиная с 9—9,5 недели зародышевой жизни.

2) Печень является тем органом, в котором вырабатываются впервые агглютиногены. Эритробласты являются первыми клетками, содержащими агглютиногены.

3) Накопление агглютиногенов или агглютинабельность эритроцитов идет постепенно.

4) Накопление агглютиногенов или агглютинабельность эритроцитов идет быстрее при гомоспецифической беременности.

5) В околоплодной жидкости, сыворотке крови, жидкости головного мозга эмбрионов первой половины беременности—агглютинины отсутствуют.

¹) В. Б. Файнберг и Е, А. Бондаренко. „Динамика изменений периферической крови у человеческих эмбрионов в первой половине зародышевой жизни", сдано в печать—Сборник трудов Москов. госуд. и-та переливания крови в январе 1934 года.