Peculiarities of immunoregulation in patients with hepatitis B

Full Text

В последние годы большое внимание в системе массовых медицинских осмотров и диспансеризации населения уделяется иммунологическим и иммуногенетическим обследованиям. Программа иммуногенетического скрининга и знания об иммунном статусе населения, удельном весе в его структуре лиц с определенными генотипами и иммунологическими нарушениями позволят подойти к решению одной из актуальных задач здравоохранения — оценке состояния здоровья и риска развития некоторых заболеваний у представителей разных генотипов HLA [2]. В работах последних лет показана фундаментальная роль системы гистосовместимости человека (HLA) в регуляции иммунного ответа на алло- и аутоантигены, распознавании «своего» и «чужого», иммунном киллинге инфицированных вирусом клеток-мишеней, поддержании иммунологического гомеостаза. Антигены HLA используются в качестве наиболее информативных генетических маркеров при оценке предрасположенности ко многим заболеваниям. Таких ассоциированных с HLA болезней к настоящему времени известно более 100 [5].

Данные литературы в отношении повышенной предрасположенности к НВ-инфекции у представителей разных генотипов HLA в известной мере противоречивы. Практически не освещено в литературе влияние генов HLA на тяжесть течения острого гепатита В. Перспективно изучение характеристик иммунного ответа в зависимости от фенотипа HLA при разных патологических состояниях, особенно когда имеется определенная форма нарушения иммунологического гомеостаза [1]. Этот вопрос при НВ-инфекции специально не изучался.

Целью настоящей работы являлась оценка роли фенотипа HLA в индукции повышенной предрасположенности к гепатиту В, регуляции иммунного ответа на вирус В и, следовательно, в формировании разных клинических вариантов острого течения болезни.

Обследовано 460 больных с разными клиническими вариантами гепатита В, в том числе 261 больной с острой формой заболевания. Типирование антигенов HLA проводили микролимфоцитотоксическим тестом [13] с использованием панели анти-HLA — А, В, С сывороток Кировского НИИ гематологии и переливания крови и объединения «Интертрансплант», соответствующих международным сывороточным стандартам. Контрольную группу составили 120 здоровых лиц той же популяционной выборки. Статистическая обработка выполнена с помощью критериев относительного риска (RR) по Woolf, х² с Yates¹ коррекцией на непрерывность популяции. Значение «Р» корректировалось на число типированных антигенов HLA (Р_с).

Общее количество Т-лимфоцитов периферической крови определяли в реакции спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) [7]; содержание Т-супрессоров и Т-хелперов — в реакции теофиллинзависимого Е-РОК [8]; ЛПЧ¹-реактивные клоны Т-лимфоцитов — в реакции стимуляции Е-РОК [6] с препаратом ЛПЧ; уровень иммуноглобулинов классов М, G, А — по Манчини. Интенсивность цитолиза гепатоцитов оценивали по активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) сыворотки крови.

Для оценки восприимчивости к гепатиту В проанализированы результаты HLA-типирования в общей группе больных по сравнению с данными здоровых. Установлено, что распределение большинства антигенов HLA в обеих группах практически одинаково. Достоверные отличия обнаружены только для антигена HLA-B18 (у 8,3% здоровых, у 22,2% больных, Р < 0,001). В отношении HLA-B8 и Bw35 различия недостоверны. Интересно отметить, что HLA-B18 и HLA- Bw35 относятся к одной группе перекрестно реагирующих антигенов и, по мнению некоторых авторов [10], имеют общую детерминанту «у». Существует также представление о наличии различных субтипов и конформационных вариантов у некоторых антигенов HLA, в том числе и у HLA-Bw35 [9]. В связи с этим повышение частоты HLA-Bw35 у больных нельзя считать случайным, хотя результаты недостоверны. Таким образом, повышенная предрасположенность к гепатиту В генетически детерминирована и ассоциирована с антигеном HLA-B18 и, вероятно, с некоторыми конформационными вариантами HLA-Bw35.

При анализе частоты распределения антигенов HLA у больных острым гепатитом В определены аналогичные, но более слабые ассоциации с HLA-B18 (RR = 2,7; Р < 0,01; Р_c > 0,05).

При раздельной оценке HLA-параметров у больных острым гепатитом установлено закономерное изменение частоты выявления некоторых HLA-антигенов в зависимости от тяжести течения болезни. Результаты представлены в табл. 1.

Из табл. 1 видно, что частота распределения антигенов HLA-A2, A3, В7, В8 в сводной группе больных острым гепатитом В практически не отличается от таковой в группе здоровых, однако при раздельном анализе в зависимости от тяжести течения гепатита выявлены закономерные особенности. Так, частота выявления HLA-B7, максимальная у больных с острой субклинической формой (40,5%), постепенно снижается при легкой и среднетяжелой формах, достигая 8,7% у больных с тяжелым течением. Вероятность субклинического течения острого гепатита В у лиц с фенотипом HLA-B7 в 7,2 раза выше, чем тяжелом (RR = 7,2; Р < 0,0025; Р_с > 0,05). Напротив, частота обнаружения HLA-B8 минимальна в группе больных с субклиническим течением и максимальна при тяжелой форме. Риск формирования тяжелого течения у больных с фенотипом HLA-B8 по сравнению с субклиническим составляет 10,7 (RR = 10,7; P < 0,0005; P_c < 0,025).

Менее закономерные изменения отмечены для антигенов HLA-A2 и A3, при этом риск формирования тяжелого течения у больных с HLA-A2 по сравнению с легким равен 4,9 (Р < 0,0025; P_c > 0,05). В то же время фенотип HLA-A3 выявляется чаще при легком течении гепатита (RR = 3,6; Р > 0,05).

Гены HLA-A3 и В7 находятся в неравновесном сцеплении и часто передаются от родителей детям единым гаплотипом, поэтому изменение частоты HLA-A3 может быть вторичным по отношению к HLA-B7. Представленные материалы свидетельствуют о том, что тяжесть течения НВ-инфекции в значительной мере генетически детерминирована.

Сочетанный анализ некоторых иммунологических показателей в зависимости от фенотипа HLA больных позволяет приблизиться к пониманию механизмов иммунорегулирующего действия некоторых HLA-генов. Соответствующие материалы приведены в табл. 2. У больных с фенотипом HLA-B8, ассоциированным с тяжелым течением гепатита В, существенно меньше общее число Т-лимфоцитов и Т-супрессоров и, наоборот, выше содержание Т-хелперов, IgG и частота обнаружения сенсибилизации Т-клеток к ЛПЧ по сравнению с больными без этого генетического маркера. Обнаруженные нарушения иммунорегуляции у больных с фенотипом HLA-B8 соответствуют гипосупрессорному иммунодефициту по Т-системе, активации гуморального звена иммунитета, а в ряде случаев и аутоиммунных механизмов. Именно такие нарушения иммунореактивности приводят к более интенсивному иммунному киллингу инфицированных вирусом В гепатоцитов. Клиническим эквивалентом этого является преимущественно тяжелое и фульминантное течение гепатита В с быстрой сероконверсией у представителей HLA-B8.

Присутствие в фенотипе больных HLA-B7 обусловливает значительное увеличение общего количества Т-лимфоцитов и Т-супрессоров, умеренное повышение концентрации сывороточных IgG и снижение частоты обнаружения ЛПЧ- реактивных клонов Т-лимфоцитов. Подобные нарушения иммунореактивности больных с HLA-B7 затрагивают в основном Т-клеточное звено, характеризуются слабой интенсивностью цитолиза гепатоцитов и преимущественно субклиническим течением, что при сохранности иммунного ответа по гуморальному типу приводит к формированию протективного иммунитета и выздоровлению, наблюдающемуся у большинства больных с фенотипом HLA-B7.

Для объяснения повышенной предрасположенности к некоторым заболеваниям у лиц с определенным фенотипом HLA существует несколько гипотез. С нашей точки зрения, наиболее удачно повышенную восприимчивость к НВ-инфекции у лиц с фенотипом HLÀ-B18 объясняет рецепторная теория [12]. Суть ее в том, что болезнетворный агент (в данном случае вирус В) взаимодействует непосредственно с определенными HLA-детерминантами на поверхности иммунокомпетентных клеток. В литературе имеются сообщения о том, что именно антигены HLA I класса (антигены локусов HLA-A, В, С) являются аппаратом первичного распознавания чужеродных субстанций и в первую Очередь вирусов [5, 11]. Можно считать, что антигенные детерминанты HLA-B18 и некоторых конформационных вариантов HLA-Bw35 обладают повышенным сродством к вирусу В.

В пределах системы Н-2 мышей (аналог HLA системы) в последние годы показано существование генов иммунного ответа (Ir-гены), контролирующих характер и силу иммунного ответа на различные аллоантигены. Многочисленные результаты исследований у человека также свидетельствуют, хотя и косвенным образом, в пользу существования таких генов в пределах системы HLA или тесно сцепленных с ней. Вероятно, именно от функционирования Ir-генов зависит тяжесть течения гепатита В. Из литературы известно, что ген HLA-B8 (или гаплотип HLA-Al, В8, DRw3) определяет сильный иммунный ответ преимущественно по гуморальному типу на многие ауто- и аллоантигены, в том числе и на вирусы [1, 4]. В то же время ген HLA-B7 связан с иммунодефицитным состоянием [5], обусловливает сниженный иммунный ответ по клеточному типу на некоторые вирусы [3] и, возможно, тесно сцеплен с геном, регулирующим активность супрессоров [1]. Полученные нами результаты в отношении вируса В согласуются с данными литературы и подтверждают первостепенное значение генов HLA в регуляции иммунного ответа на вирус В, формировании тяжелого или, наоборот, субклинического течения НВ-инфекции.

Представленные материалы позволяют сделать вывод о повышенной восприимчивости к гепатиту В лиц с фенотипом HLA-B18. Больные с фенотипом HLA-B8 составляют группу риска в отношении тяжелого и особо тяжелого течения, в то время как у больных с фенотипом HLA-B7 чаще формируется субклиническое течение. Выявленные HLA-ассоциации с НВ-инфекцией важно учитывать при отборе первоочередных контингентов для вакцинации против гепатита В из числа лиц с наиболее высоким риском заражения (сотрудники отделений гемодиализа, инфекционных, хирургических, реанимационных отделений, лабораторий и др.), профессиональном отборе кадров для работы в подобных условиях, а также при прогнозировании тяжести течения острого гепатита В при первичной диагностике заболевания с целью раннего начала дифференцированной превентивной терапии тяжелых и комагенных форм.

¹ЛПЧ — липопротеин печени человека, рассматривается как условно печеночно-специфический антиген.

About the authors

E. B. Malysheva

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation

G. A. Zaitseva

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation

References

Supplementary files