Immunologic investigations of perilymph in patients with otosclerosis

Full Text

Анализ слуховой функции у больных отосклерозом [1, 2] показал, что по мере созревания отосклеротического очага и его инактивации происходит повышение порогов восприятия костнопроведенных звуков преимущественно на речевые и высокие частоты, указывающие на функциональное состояние улитки. В связи с этим несомненный интерес представляло изучение характера иммунных изменений во внутреннем ухе в активной и неактивной стадиях отосклероза и их взаимосвязь с выраженностью перцептивного компонента тугоухости.

Целью настоящего исследования являлось определение уровней иммуноглобулинов А, М. G и антител к нативной ДНК ¹ в перилимфе у больных отосклерозом в активной и неактивной стадиях заболевания и сопоставление полученных результатов с порогами восприятия костнопроведенных звуков на речевые и высокие частоты.

Объектом исследования служили сыворотка крови и перилимфа 30 больных отосклерозом (у 20 — активная и у 10 — неактивная стадия). Перилимфу получали во время слухоулучшающей операции. В качестве контроля использованы перилимфа и сыворотка крови, взятые у 10 человек в возрасте от 20 до 40 лет, умерших в результате травмы или несчастного случая. Забор материала производили не позднее 12—24 часов после смерти.

Для обнаружения специфических антител в сыворотке крови и перилимфе применен метод твердофазного иммуноферментного анализа [3, 5, 6].

Слуховую функцию у этих больных изучали по общепринятому методу. В данной работе мы приводим результаты исследования степени тугоухости на частотах от 500 до 8000 Гц. При статистическом анализе оценивали, как средние значения, так и индивидуальные показатели антител и порогов слуха.

При изучении динамики содержания иммуноглобулинов А, М, G и антител к ДНК в сыворотке крови и перилимфе в зависимости от активности отосклеротического процесса у больных с активными очагами в сыворотке крови выявлен прирост всех трех классов иммуноглобулинов по сравнению с таковым у больных с неактивными отосклеротическими очагами (табл. 1), особенно IgG (превышение контрольных показателей в 4 раза).

В перилимфе больных с активными отосклеротическими очагами имело место также достоверное (в 1,9 Таблица 1)

 

Таблица 1

Иммуноглобулины А, М, G в сыворотке крови и перилимфе у больных отосклерозом в зависимости от активности отосклеротического процесса

Отосклероз	Содержание иммуноглобулинов, мг/мл
	А	м	G
Активный (n = 20)	1,28±0,08 1,04±0,07	0,12±0,01 0,1 ±0,01	7,19±0,27 6,28±0,32
Неактивный (n=10)	0,86±0,2 0,75±0,09	0,07±0,02 0,1 ±0,02	4,66±0,32 3,34±0,39
	<0,1 <0,01	<0,1 >0,1	<0,001 <0,001
Р
Контроль (n=10)

Примечание. В числителе — показатели в сыворотке крови, в знаменателе — в перилимфе.

 

В перилимфе больных с активными отосклеротическими очагами имело место также достоверное (в 1,9 раза) повышение содержания IgG по сравнению с таковым у больных с неактивным процесссом. Менее выраженным было увеличение содержания IgA. При этом у больных в активной стадии заболевания концентрация IgG в перилимфе в 2 раза превышала контрольные показатели. Сопоставление результатов иммуноферментного исследования перилимфы больных в группе с неактивными очагами и перилимфы трупов, принятых за норму, не показало различия в содержании IgA и IgG (Р>0,1), средний же уровень IgM был выше контроля в 5 раз (Р<0,05).

Известно, что обнаружение высокого титра антител к ДНК в сыворотке крови свидетельствует о наличии аутоиммунного заболевания [4, 5].

Ранее проведенные нами исследования выявили у больных отосклерозом высокий титр антител к ДНК, превышающий контрольные показатели в сыворотке крови в 2,3 раза, а в перилимфе— в 2,7 раза.

Обнаружение высокого титра антител к ДНК может быть диагностическим критерием не только аутоиммунного заболевания, но и активности аутоиммунного процесса. Поэтому одновременно определяли содержание иммуноглобулинов и уровень антител к ДНК в сыворотке крови и перилимфе у больных с активным и неактивным отосклеротическим процессом (табл. 2).

 

Таблица 2

Уровень антител (АТ) к ДНК в сыворотке крови и перилимфе больных отосклерозом в зависимости от активности процесса

Отосклероз	АТ к ДНК, ед. опт. пл.
	Число  исследований	в сыворотке крови	Число  исследований	в перилимфе
Активный	35	0,214±0,005	20	0,154±0,008
Неактивный	10	0,199±0,005	10	0,103±0,010
Контроль 8		Р<0,05  0,091 ±0,012	8	Р<0,01 0,051 ±0,006

 

Анализ полученных данных показал, что средний уровень антител к ДНК в перилимфе больных с активными очагами выше, чем у больных с неактивным процессом, в 1,5 раза (Р<0,01), а в сыворотке крови это увеличение было менее значительным (Р<0,05). Уровень антител к ДНК в активной стадии отосклеротического процесса в сыворотке крови превышал контрольные показатели в 2,4 раза, а в перилимфе — в 3 раза.

Полученные данные свидетельствуют о том, что у больных отосклерозом во внутреннем ухе имеют место иммунные изменения, проявляющиеся повышением в перилимфе уровня иммуноглобулинов, особенно IgG, и антител к ДНК, наиболее выраженные в активной стадии заболевания. Изменения именно этих показателей точнее и быстрее других отражают динамику костной перестройки.

Анализ взаимосвязи IgG и антител к ДНК У больных с активным отосклеротическим процессом, выраженный графически, представлен на рис. 1 и 2. Как видно, низким порогам восприятия костнопроведенных звуков соответствуют наиболее высокие уровни IgG и антител к ДНК, повышение же порогов звуковосприятия сопровождается снижением их концентрации в перилимфе. У больных с неактивными очагами показатели IgG и антител к ДНК группируются в средней и нижней части графиков с равномерным распределением по оси абсцисс. При этом одновременно с повышением порогов восприятия костнопроведенных звуков также наблюдается снижение их уровней. Из этого следует, что снижению активности отосклеротического процесса и переходу в неактивную его стадию сопутствуют понижение в перилимфе концентрации IgG и антител к ДНК и повышение порогов восприятия костнопроведенных звуков на речевые и высокие частоты.

 

Рис. 1 Соотношение содержания IgG в перилимфе больных отосклерозом с активным (треугольник), неактивным (квадрат) процессами и средних порогов слуха по костной проводимости на частотах от 500 до 8000 Гц.

 

Рис. 2 Соотношение содержания АТ к ДНК в перилимфе больных отосклерозом с активным (треугольник), неактивным (квадрат) процессами и средних порогов слуха по костной проводимости на частотах от 500 до 8000 Гц.

 

При изучении влияния отосклеротического очага на внутреннее ухо была выявлена корреляция выраженности перцептивного компонента тугоухости и иммунных изменений в перилимфе у больных в активной и неактивной стадиях отосклеротического процесса. Исследовано соотношение средних значений индивидуальных показателей иммуноглобулинов А, М, G и антител к ДНК в перилимфе больных отосклерозом и средних порогов восприятия костнопроведенных звуков на частотах от 500 до 8000 Гц. У больных с активным процессом выявлены обратная корреляция средней степени (—0,6) между уровнем IgG, антител к ДНК и порогами звуковосприятия, а также слабая связь с уровнем IgM (—0,1) и слабая прямая связь с IgA (+ 0,12).

У больных с неактивными очагами имели место обратная корреляция в значительной степени (—0,9) содержания антител к ДНК, в средней степени (—0,6) уровней IgG, в слабой степени IgA (—0,4) с порогами восприятия костнопроведенных звуков, а также прямая корреляция в слабой степени между последними и уровнем IgM (+0,45). Из этого следует, что повышение порогов восприятия костнопроведенных звуков у больных отосклерозом сочетается со снижением уровней IgG и антител к ДНК и с менее значительным снижением уровней IgM (при активном процессе) и IgA (при неактивном). Наряду с этим прослеживается и некоторое нарастание содержания IgA в активной и IgM в неактивной стадиях отосклеротического процесса.

Таким образом, снижение уровней IgG и антител к ДНК в перилимфе больных отосклерозом, а следовательно, уменьшение активности отосклеротического процесса и инактивация отосклеротических очагов сопровождаются угнетением слуховой функции. Последнее проявляется повышением порогов восприятия костнопроведенных звуков на речевые и высокие частоты вследствие поражения рецепторных образований в улитке.

Полученные данные демонстрируют характер иммунных проявлений в активной и неактивной стадиях отосклероза и показывают зависимость выраженности нейросенсорного компонента тугоухости от иммунных проявлений во внутреннем ухе. Они могут быть использованы для разработки консервативных методов лечения отосклероза, особенно его неоперабельных форм.

¹ Прим, ред.* Двуспиральная ДНК, изолированная из клеток, с сохраненными водородными связями между цепями.

About the authors

L. G. Svatko

Kazan Medical University

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com

Department of Otorhinolaryngology

Russian Federation, Kazan

N. N. Reshetnikov

Kazan Medical University

Email: info@eco-vector.com

Department of Otorhinolaryngology

Russian Federation, Kazan

References

Supplementary files